陳國(guó)銘，湯順莉，鄺梓君，黃雁，趙金龍，於菁雯，陳子茵，林洪榮，黃楚瑤，許華（.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣州 50405；.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院，廣州 50405；.廣州中醫(yī)藥大學(xué)針灸康復(fù)臨床醫(yī)學(xué)院，廣州 50405；4.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科，廣州 50405）

茵陳為菊科植物濱蒿（Artemisia scoparzaWaldst.et Kit.）或茵陳蒿（Artemisia capillarisThunb.）的干燥地上部分，味苦、辛，性微寒，歸脾、胃、肝、膽經(jīng)，具清熱利濕、利膽退黃之功效，主治黃疸性疾病、小便不利、濕瘡瘙癢、傳染性黃疸型肝炎等癥[1]。藥理學(xué)研究證實(shí)，茵陳具有保肝利膽、鎮(zhèn)痛消炎、抗病原微生物、調(diào)節(jié)免疫和心血管系統(tǒng)、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖血脂等作用，被廣泛應(yīng)用于治療急性黃疸型肝炎、膽汁性肝硬化、藥物性肝損傷等多種臨床疾病[1-4]。

中藥藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)不是某一特定的有效化學(xué)成分，其起效機(jī)制也并非作用于某一特異性靶標(biāo)，而是多成分、多靶標(biāo)、多環(huán)節(jié)整體調(diào)節(jié)、共同作用的結(jié)果[5]。目前，關(guān)于茵陳有效化學(xué)成分及其作用的現(xiàn)代藥理學(xué)研究較多，但有關(guān)其多成分、多靶標(biāo)、多途徑、多效應(yīng)的藥效作用機(jī)制研究則相對(duì)較少。作為新興學(xué)科，系統(tǒng)藥理學(xué)打破傳統(tǒng)的“一個(gè)藥物、一個(gè)靶標(biāo)、一種疾病”的框架，融合系統(tǒng)生物學(xué)、多向藥理學(xué)、計(jì)算生物學(xué)、網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)等多學(xué)科的技術(shù)和內(nèi)容，進(jìn)行“疾病-表型-基因-藥物”多層次網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建，從整體角度去探索藥物與疾病的關(guān)聯(lián)性，具有整體性和系統(tǒng)性的特點(diǎn)，與中醫(yī)學(xué)整體觀和辨證論治的原則相對(duì)應(yīng)[5-6]。鑒于此，本研究擬采用系統(tǒng)藥理學(xué)方法對(duì)茵陳可能的作用機(jī)制進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)，為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

1 資料與方法

1.1 構(gòu)建茵陳所含化合物數(shù)據(jù)庫(kù)

利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)數(shù)據(jù)庫(kù)（TCMSP，https：//ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php）檢索茵陳所含的所有化學(xué)成分。根據(jù)TCMSP的推薦，通過口服利用度（OB）和類藥性（DL）對(duì)所有化學(xué)成分進(jìn)行篩選。OB是指藥物被吸收進(jìn)入全身循環(huán)系統(tǒng)的程度和速度，是客觀評(píng)價(jià)藥物口服生物利用度和內(nèi)在質(zhì)量的重要指標(biāo)，也是判斷生物活性分子是否具有藥物潛質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)；DL是藥動(dòng)學(xué)特性和安全性的總和（包括溶解度、通透性和穩(wěn)定性等），與化合物理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)因素的相互作用有關(guān)，是評(píng)價(jià)成藥性優(yōu)劣的關(guān)鍵指標(biāo)，可用于優(yōu)選化合物、解釋活性和類藥性分析結(jié)果、挖掘活性和類藥性的關(guān)系、分析化合物特性、預(yù)測(cè)體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特征、指導(dǎo)分子結(jié)構(gòu)修飾等?；衔锏腛B、DL越高，表明其越有可能被開發(fā)成為臨床藥物[7-8]。本研究以O(shè)B≥30%、DL≥0.18作為篩選條件[9]，對(duì)茵陳有效化合物進(jìn)行進(jìn)一步篩選。

1.2 構(gòu)建有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)

通過TCMSP導(dǎo)出所選茵陳有效化合物對(duì)應(yīng)的所有相關(guān)靶標(biāo)蛋白，將其輸入Cytoscape 3.5.1軟件中進(jìn)行可視化處理，以構(gòu)建茵陳有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)。網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建采用布局算法，設(shè)置節(jié)點(diǎn)在視圖中的幾何位置，通過分層染色、圖形、標(biāo)注等方式直觀顯示出該網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，使各個(gè)節(jié)點(diǎn)合理布局，產(chǎn)生清晰的視覺效果。其中，有效化合物與靶標(biāo)蛋白以節(jié)點(diǎn)表示，兩個(gè)節(jié)點(diǎn)間的相互作用以邊表示。對(duì)該網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析，采用節(jié)點(diǎn)度值（Degree）和中介中心度（Betweenness cen-trality）對(duì)各節(jié)點(diǎn)的重要性進(jìn)行評(píng)估，以評(píng)價(jià)茵陳有效化合物、靶標(biāo)蛋白的重要程度。節(jié)點(diǎn)度值表示網(wǎng)絡(luò)中與節(jié)點(diǎn)相連邊的數(shù)量，節(jié)點(diǎn)大小與其度值成正比；中介中心度主要表示網(wǎng)絡(luò)中最短路徑經(jīng)過該節(jié)點(diǎn)的數(shù)量占路徑總和的比例，反映了該節(jié)點(diǎn)對(duì)整個(gè)網(wǎng)絡(luò)的作用及影響力。各節(jié)點(diǎn)對(duì)應(yīng)的參數(shù)值越大，則提示其在網(wǎng)絡(luò)中的樞紐作用越重要[10]。

1.3 構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)

由于蛋白質(zhì)很少以獨(dú)立個(gè)體的方式實(shí)現(xiàn)其生物功能，即在同一細(xì)胞的生化過程中，蛋白質(zhì)一般是通過彼此之間的相互作用形成大分子復(fù)合物后，才能完成相應(yīng)的生物學(xué)過程，因此PPI及其網(wǎng)絡(luò)的研究與分析是理解生命活動(dòng)中細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)和功能必不可少的基礎(chǔ)[11]。為了從系統(tǒng)水平更好地理解靶標(biāo)蛋白的作用，將有效化合物對(duì)應(yīng)靶標(biāo)蛋白的信息導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//string-db.org），從而獲得PPI的相關(guān)信息。STRING是目前常用的檢索或預(yù)測(cè)PPI的數(shù)據(jù)庫(kù)，其結(jié)果來源于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、文獻(xiàn)挖掘、相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)以及生物信息學(xué)預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)，通過系統(tǒng)自帶評(píng)分機(jī)制對(duì)以上不同路徑獲得的結(jié)果進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分越高，表示PPI信息置信度越高。故為保證信息的高置信度、獲取最佳的預(yù)測(cè)效果，本研究將評(píng)分條件（置信度）設(shè)定為大于0.9[12]，利用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，并根據(jù)節(jié)點(diǎn)度值統(tǒng)計(jì)靶標(biāo)蛋白的關(guān)聯(lián)頻次。

1.4 通路富集分析

KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)（www.kegg.jp）是由東京大學(xué)和日本京都大學(xué)共同研制并建立的，可提供通路查詢，并與DAVID生物信息學(xué)資源數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//david.ncifcrf.gov./）關(guān)聯(lián)。本研究將通用蛋白編號(hào)[Uniprot ID，于UniGene數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/unigene/）中查詢]導(dǎo)入DAVID生物信息學(xué)資源數(shù)據(jù)庫(kù)中，對(duì)所有蛋白的編碼基因進(jìn)行通路富集分析，計(jì)算每條富集通路的P值，并采用Bonferroni法校正（P＜0.01的結(jié)果被認(rèn)為是“顯著富集”），探索相關(guān)靶標(biāo)蛋白參與表達(dá)的生物學(xué)通路。

2 結(jié)果

2.1 茵陳有效化合物篩選結(jié)果

從TCMSP中共獲得化合物106個(gè)，根據(jù)其OB、DL值篩選出有效化合物13個(gè)：異鼠李素（Isorhamnetin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、茵陳黃酮（Arcapillin）、芫花素（Genkwanin）、玄參黃酮（Skrofulein）、異茵陳蒿黃酮（Isoarcapillin）、澤蘭素（Eupalitin）、澤蘭苷配基（Eupatolitin）、茵陳色原酮（Capillarisin）、4′-甲基茵陳色原酮（4′-methylcapillarisin）、去甲氧基茵陳色原酮（Demethoxycapillarisin）、Artepillin C、槲皮素（Quercetin），詳見表1。

2.2 茵陳有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)分析

共導(dǎo)出靶標(biāo)蛋白189個(gè)，見表2（表中，由于1個(gè)蛋白可能對(duì)應(yīng)多個(gè)編碼基因，故對(duì)應(yīng)的Uniprot ID可能不止1個(gè)；同時(shí)，由于有的蛋白編碼基因未收錄在UniGene數(shù)據(jù)庫(kù)中，故無對(duì)應(yīng)的Uniprot ID）。將其信息導(dǎo)入Cytoscape 3.5.1軟件后，得茵陳有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)，見圖1。該網(wǎng)絡(luò)共202個(gè)節(jié)點(diǎn)、368條邊。其中，最內(nèi)圈及中點(diǎn)13個(gè)節(jié)點(diǎn)代表茵陳有效化合物，中間圈51個(gè)節(jié)點(diǎn)和最外圈138個(gè)節(jié)點(diǎn)代表靶標(biāo)蛋白。最外圈節(jié)點(diǎn)是度值為1的靶標(biāo)蛋白，中間圈節(jié)點(diǎn)是度值≥2的靶標(biāo)蛋白（為多個(gè)化合物共同作用的靶標(biāo)蛋白）。網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析結(jié)果顯示，其網(wǎng)絡(luò)集中度為0.746、網(wǎng)絡(luò)密度為0.018、網(wǎng)絡(luò)異質(zhì)性為3.184、最短路徑為40 602。節(jié)點(diǎn)的平均度值為3.625，大于該平均度值的節(jié)點(diǎn)有38個(gè)；節(jié)點(diǎn)平均中介中心度為0.008，大于該平均中介中心度的節(jié)點(diǎn)有20個(gè)。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)度值和中介中心度等拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)篩選核心節(jié)點(diǎn)并進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，槲皮素、β-谷甾醇、異鼠李素、Artepillin C、茵陳黃酮、澤蘭素、茵陳色原酮、4′-甲基茵陳色原酮等有效化合物與前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、熱休克蛋白90（HSP90）、二肽基肽酶Ⅳ、蛋白激酶A催化亞基Cα、PTGS1、胰蛋白酶原1（PRSS1）、鈉通道蛋白5型α亞基（SCN5A）、雄激素受體（AR）、核受體共激活因子2（NCOA2）、凝血酶、醛糖還原酶等靶標(biāo)蛋白在整個(gè)網(wǎng)絡(luò)中具有重要的樞紐作用，可能是關(guān)鍵的化合物或者靶標(biāo)蛋白，詳見表3。

表1 茵陳有效化合物Tab1 Effective compounds ofA.capillaries

2.3 茵陳有效成分對(duì)應(yīng)的靶標(biāo)蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果

設(shè)置置信度大于0.9，剔除獨(dú)立于網(wǎng)絡(luò)之外的靶標(biāo)蛋白，得茵陳有效成分對(duì)應(yīng)的靶標(biāo)蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)，見圖2（由于可能與其余蛋白質(zhì)聯(lián)系緊密，故圖中涉及到非茵陳有效化合物的靶標(biāo)蛋白，如ARD1D）。該網(wǎng)絡(luò)共包含129個(gè)節(jié)點(diǎn)、529條邊，平均度值為8.3。其中，各節(jié)點(diǎn)表示靶標(biāo)蛋白，每條邊表示各靶標(biāo)蛋白間的相互作用關(guān)系，邊數(shù)越多表示該節(jié)點(diǎn)對(duì)應(yīng)的靶標(biāo)蛋白越重要，如JUN、TP53等。根據(jù)各節(jié)點(diǎn)的度值繪制大于平均度值的關(guān)鍵靶標(biāo)蛋白（共22個(gè)）的信息條形圖，見圖3。結(jié)果顯示，JUN的度值為44，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其余靶標(biāo)蛋白，表明其在網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮了關(guān)鍵作用，成為連通網(wǎng)絡(luò)中其他節(jié)點(diǎn)的橋梁。

2.4 KEGG通路富集分析結(jié)果

通過DAVID生物信息學(xué)資源數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)茵陳靶標(biāo)蛋白的編碼基因進(jìn)行KEGG通路富集，共得富集結(jié)果122條（包含非信號(hào)通路富集結(jié)果），其中通路富集結(jié)果有34條，有32條通路的P值小于0.01。利用P值和富集基因數(shù)進(jìn)行交叉篩選，取兩個(gè)參數(shù)均排前10位的通路進(jìn)行分析，結(jié)果見表4。由表4可見，編碼基因顯著富集在TNF-α信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/絲蘇氨酸蛋白激酶（P13K/Akt）信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、凋亡信號(hào)通路等通路上。

表2 茵陳有效化合物的靶標(biāo)蛋白Tab 2 Target proteins of effective compounds ofA.capillaries

續(xù)表1Continued tab 1

圖1 茵陳有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)Fig 1 Effective compound-target protein network of A.capillaries

3 討論

3.1 有效化合物

有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析結(jié)果表明槲皮素、β-谷甾醇、異鼠李素等是茵陳的關(guān)鍵性有效成分。

槲皮素為黃酮類化合物，具有抗氧化、抗纖維化、抗炎、抑癌、抗病毒、抗衰老、抗抑郁和保護(hù)心血管、維持血糖穩(wěn)定等作用[13]。體外試驗(yàn)表明，槲皮素可以通過多條信號(hào)通路影響多種腫瘤細(xì)胞的代謝，抑制其分裂增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)其凋亡；此外，槲皮素還能夠增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)其他抗腫瘤藥的敏感性，逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥性[14-15]。這與茵陳的抗腫瘤作用相符。

β-谷甾醇為植物甾醇類化合物，具有抗炎、抑癌、調(diào)節(jié)免疫、防治前列腺肥大、抗氧化、降血脂、鎮(zhèn)痛、促進(jìn)傷口愈合、調(diào)節(jié)骨代謝平衡、保護(hù)胃黏膜、治療癲癇等藥理活性[16-17]。研究表明，β-谷甾醇可通過調(diào)節(jié)局部免疫、抑制環(huán)氧合酶與脂肪氧合酶通路、抑制前列腺素合成、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活性來發(fā)揮抗炎的作用[18]。這進(jìn)一步印證了茵陳具有鎮(zhèn)痛抗炎、調(diào)節(jié)免疫的功效。

表3 茵陳有效化合物-靶標(biāo)蛋白網(wǎng)絡(luò)關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)及其拓?fù)鋵W(xué)特征Tab 3 of effective compound-target protein network and its topology features of A.capillaries

異鼠李素為黃酮類化合物，具有保護(hù)內(nèi)皮、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗心肌缺血、保護(hù)心肌細(xì)胞、抑制心肌纖維化、降血壓、抗血栓、抑制血小板凝集、抗氧化等多種心腦血管保護(hù)作用，同時(shí)還具有抑制脂肪細(xì)胞分化、耐缺氧、抗腫瘤、降糖、抗炎、抗病毒等多種作用[19]。異鼠李素可抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，同時(shí)也具有保肝的作用[20]。這進(jìn)一步佐證了茵陳具有保肝利膽、調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)的臨床藥用價(jià)值。

3.2 靶標(biāo)蛋白

PTGS2、HSP90、二肽基肽酶Ⅳ等是茵陳的關(guān)鍵靶標(biāo)蛋白。

圖2 靶標(biāo)蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)Fig 2 PPI network of target proteins

圖3 關(guān)鍵靶標(biāo)蛋白的信息條形圖Fig 3 Information bar chart of key target proteins

表4 P值和富集基因數(shù)均排前10位的KEGG富集通路Tab 4 KEGG enrichment pathway in the top 10 list of P value and the number of enrichment gene

PTGS2也稱環(huán)氧合酶2（COX-2），是花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素前體（前列腺素H2）的限速酶[21]。Fujita H等[22]研究發(fā)現(xiàn)，COX-2可以通過抑制前列腺癌細(xì)胞凋亡起到促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖的作用，且COX-2與前列腺癌血管形成及癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。鄧琳等[23]的研究表明，過表達(dá)COX-2后，卵巢癌細(xì)胞的增殖和遷移能力增強(qiáng)，而經(jīng)COX-2抑制劑處理后則變?nèi)酢OX-2作為炎性因子，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)紅腫熱痛，最終誘發(fā)炎癥，而使用COX-2抑制劑則可減少這種反應(yīng)的發(fā)生[24]。鑒于比，筆者認(rèn)為茵陳有可能通過抑制該酶活性來發(fā)揮抗腫瘤、鎮(zhèn)痛消炎的作用。

許多研究表明，HSP90是抗腫瘤藥的作用靶標(biāo)之一，抑制HSP90能夠抑制腫瘤的增長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[25-26]。張杰等[27]采用狹縫雜交法定量證明了HSP90編碼基因mRNA的表達(dá)水平在人肝癌細(xì)胞中最高，非癌肝組織中次之，正常肝中最少，提示HSP90可能是茵陳保肝抗癌的重要靶標(biāo)蛋白之一。

二肽基肽酶Ⅳ對(duì)免疫、炎癥、脂肪代謝及細(xì)胞生長(zhǎng)凋亡等具有多方面的調(diào)節(jié)作用[28-29]。研究表明，非酒精性脂肪肝患者的肝細(xì)胞中二肽基肽酶Ⅳ的mRNA表達(dá)水平較健康人群高，且該物質(zhì)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究中均表現(xiàn)出了一定的降壓作用；在心肌缺血再灌注損傷過程中，二肽基肽酶Ⅳ抑制劑可激活P13K/Akt信號(hào)通路，保護(hù)心肌細(xì)胞，減少心梗面積[30]。這提示該靶標(biāo)蛋白可能與茵陳保護(hù)心血管系統(tǒng)的作用密切相關(guān)。

3.3 靶標(biāo)蛋白的相互作用

PPI網(wǎng)絡(luò)分析表明，JUN、TP53的度值遠(yuǎn)高于其余靶標(biāo)蛋白。編碼JUN等原癌基因靶標(biāo)蛋白的基因?yàn)榧纯淘缙诨颍ㄒ蛟谕饨缫蛩卮碳は履苎杆俦磉_(dá)而得名），包括c-fos、c-jun、c-myc等[31]。在外來因素刺激下，c-fos和c-jun可迅速表達(dá)，翻譯成JUN，影響靶基因的轉(zhuǎn)錄[32]。編碼TP53的基因是一種重要的抑癌基因。據(jù)報(bào)道，超過50%的腫瘤患者存在該基因突變，且未突變的患者也常伴有相關(guān)通路的部分失活[33]。Attallah AM等[34]通過研究發(fā)現(xiàn)，TP53編碼基因突變?cè)蕉?，則肝癌組織中該蛋白的表達(dá)越多、腫瘤分化越低、患者預(yù)后越差。相關(guān)研究顯示，該蛋白編碼基因的表達(dá)是肝癌患者生存期的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[35]。由此可見，TP53可能是治療腫瘤的一個(gè)新靶標(biāo)。茵陳在臨床上單獨(dú)或配伍用于治療腫瘤并不少見，但關(guān)于其起效機(jī)制的研究尚淺，上述結(jié)果或許可為后續(xù)深入研究提供參考。

3.4 信號(hào)通路

KEGG通路富集結(jié)果顯示，TNF-α信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、PI3K/Akt信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、凋亡信號(hào)通路等是茵陳發(fā)揮作用的重要通路。大多數(shù)靶標(biāo)蛋白編碼基因顯著富集到PI3K/Akt信號(hào)通路、TNF-α信號(hào)通路和HIF-1信號(hào)通路上。相關(guān)研究表明，PI3K/Akt信號(hào)通路是腫瘤通路之一，通過調(diào)控該通路可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移，促進(jìn)其凋亡[35-37]。TNF-α信號(hào)通路通過TNF和腫瘤壞死因子受體1（TNFR1）結(jié)合而激活，激活的TNF-α信號(hào)通路可導(dǎo)致核轉(zhuǎn)錄因子κB核易位和c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38蛋白、JUN活化，促進(jìn)促炎細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子和TNF-α等的表達(dá)[38]。HIF-1作為一種氧敏感的轉(zhuǎn)錄激活因子，是由HIF-1A和HIF-1B兩個(gè)亞基組成的異源二聚體，參與維持體內(nèi)氧氣和能量平衡[39]。研究表明，HIF-1信號(hào)通路與組織損傷時(shí)機(jī)體在短時(shí)間內(nèi)調(diào)動(dòng)大量間充質(zhì)干細(xì)胞從骨髓進(jìn)入循環(huán)池并遷移、歸巢至損傷部位參與修復(fù)損傷有關(guān)[40]；此外，低氧、HIF-1A的高表達(dá)與腫瘤血管的形成、轉(zhuǎn)移以及患者的病死率和預(yù)后密切相關(guān)[41]。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體處于低氧狀態(tài)時(shí)，HIF-1和核轉(zhuǎn)

錄因子κB的活化可促進(jìn)成纖維母細(xì)胞中CAV1的自體吞噬與降解，而CAV1的降解能夠抑制鄰近癌細(xì)胞的凋亡[42]。Legendre C等[43]的研究結(jié)果顯示，在肝癌細(xì)胞中，HIF-1A可通過下調(diào)藥物代謝酶的表達(dá)來影響肝癌患者的化療效果。亦有研究表明，微核糖核酸-338-3p（miR-338-3p）通過下調(diào)HIF-1A的表達(dá)來抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，并以此提高患者對(duì)新型靶向抗腫瘤藥索拉非尼的敏感性[44]。由此可見，上述通路可能與茵陳抗腫瘤作用有關(guān)，體現(xiàn)了茵陳多靶標(biāo)、多通路、多途徑、多效應(yīng)的作用特點(diǎn)，也符合祖國(guó)醫(yī)學(xué)“同病異治、異病同治”理論的物質(zhì)基礎(chǔ)。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，本研究通過系統(tǒng)藥理學(xué)的研究方法，對(duì)茵陳多成分、多靶標(biāo)、多途徑的復(fù)雜作用機(jī)制進(jìn)行分析，結(jié)果表明茵陳有效化合物槲皮素、β-谷甾醇、異鼠李素等可能通過TNF-α信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、PI3K/Akt信號(hào)通路等作用于PTGS2、HSP90、二肽基肽酶Ⅳ、JUN等靶標(biāo)蛋白進(jìn)而發(fā)揮其抗炎、抗腫瘤等藥理作用。上述分析結(jié)果可為茵陳的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。系統(tǒng)藥理學(xué)結(jié)合系統(tǒng)生物學(xué)、網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)等多學(xué)科技術(shù)和內(nèi)容，借助軟件分析及預(yù)測(cè)中藥基于信號(hào)通路的作用機(jī)制，為中藥研究提供了新的思路。但由于數(shù)據(jù)庫(kù)信息的不全面、化合物篩選的主觀性、忽略了藥物體內(nèi)代謝過程等因素的影響，本研究結(jié)果可能存在一定的片面性和局限性，仍有待后續(xù)研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

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