李克靜 于靜靜 趙鑫 李淑娟

實(shí)驗(yàn)部分

試劑與儀器。Agilent 1200- 6410 QQQ液質(zhì)聯(lián)用儀；CAPCELL PAK C18 MGⅢ色譜柱；氮?dú)獯蹈蓛x103199；PL303電子天平；KS501振蕩器；VORTEX- 2GENIE渦旋混合器；CR21G高速冷凍離心機(jī)；固相萃取裝置；Oasis HLB小柱；Milli- Q型超純水儀；阿莫西林、氨芐西林、青霉素G、青霉素V、鄰氯青霉素、雙氯青霉素均購自德國Dr.公司；分析純Na2PO4；分析純亞鐵氰化鉀；乙酸鋅；色譜純正己烷；乙腈；實(shí)驗(yàn)用水為Milli- Q高純水。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。精確稱取上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各10.0 mg，用水：乙腈（1：9）溶解定容至10 mL，得到濃度為1000.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，- 18 ℃下避光保存；精確量取上述青霉素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各100μL，用色譜純乙腈稀釋至10mL，得到濃度為10.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，0～4℃下避光保存，使用時(shí)以10 %的乙腈水溶液稀釋至所需濃度，現(xiàn)用現(xiàn)配。

高效液相色譜及質(zhì)譜條件。

（1）色譜分離條件

色譜柱：C A P C E L L P A K C 1 8 MGⅢ（2.0*100 mm..id，3μm）；柱溫：35℃；流動(dòng)相：0.1%（v/v） 甲酸水溶液（A） 和乙腈（B）；進(jìn)樣量：10μL；梯度洗脫程序：0.0～1.0 min，保持10% B，1.0～4.0 min，10% B線性增至75%，4.1 min降至10% B并保持至8.0 min；流速：0.3 mL/min。

（2）質(zhì)譜條件

電離模式：ESI+ ；毛細(xì)管電壓：4000v；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè) （MRM）；干燥氣溫度：350 ℃，電噴霧壓力：30psi，干燥氣流量：9 L/min，倍增電壓：300 EMV（+）。

結(jié)果與討論

樣品的提取與凈化條件的選擇。本文直接用磷酸鹽溶液（pH=8.0）做提取液，不僅有利于近中性環(huán)境中水溶性青霉素類抗生素的提取，而且大大縮短了提取時(shí)間，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)過程，有利于大批量樣品的檢測(cè)。

質(zhì)譜條件的優(yōu)化。在正離子掃描模式下，分別對(duì)1.0 mg/L各種藥物的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行母離子全掃描，確定各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分子離子[M+H]+，并優(yōu)化各分子離子的毛細(xì)管出口電壓。分別以選定的分子離子為母離子，進(jìn)行相應(yīng)的子離子全掃描，選擇豐度較強(qiáng)的離子為定量離子，豐度次強(qiáng)的離子為定性離子，優(yōu)化其碰撞能量。

方法的線性范圍及檢出限。6種青霉素類藥物的質(zhì)量濃度在5～100 μg/L的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.9980，說明本方法適用于青霉素類藥物的定量分析。采用空白樣品中添加青霉素類抗生素的方法，分別以S/N≥3、S/N≥10確定檢出限（LOD）和定量下線（LOQ）。

建立了同時(shí)測(cè)定雞肉組織中6種青霉素抗生素殘留的的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，該方法前處理簡(jiǎn)單，同時(shí)具有選擇性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，且方法的回收率和重現(xiàn)性均能滿足國內(nèi)外獸藥殘留的檢測(cè)要求，適用于實(shí)際樣品的分析檢測(cè)。