徐茂紅，　邵　旭,　牛海軍,　李曉亮,　李光輝

(1.皖西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院 藥學(xué)系，安徽 六安　237000；2.合肥七星醫(yī)藥科技有限公司，安徽 合肥　230088)

牡荊素(Vitexin)為來(lái)源于牡荊葉、牡荊子和山楂葉中黃酮類有效單體，具有鎮(zhèn)痛、抗炎免疫、抗缺血性腦損傷及抗心肌缺血再灌注損傷等多種生物學(xué)活性[1-3]。由于牡荊素注射劑直接進(jìn)入血液，風(fēng)險(xiǎn)較大，其中重金屬檢測(cè)和限量控制對(duì)中藥注射劑用藥安全具有重要意義[4]。本研究采用ICP-MS測(cè)定注射用牡荊素中鉛、鎘、砷、汞、銅含量，并制定限度控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證臨床用藥安全。

1　材料與方法

1.1　藥品與試劑

注射用牡荊素(合肥七星醫(yī)藥科技有限公司，批號(hào)：20161020、20161022、20161024)；鉛、鎘、砷、汞、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL)，購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；硝酸、硫酸、鹽酸優(yōu)級(jí)純，購(gòu)自南京化學(xué)試劑股份有限公司，娃哈哈純化水：經(jīng)Milli-Q濾過(guò)，電阻率達(dá)到18.2MΩ.cm/25 ℃。

1.2　主要儀器與設(shè)備

ELAN DRC-e電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，美國(guó)PE公司；MARS-X微波消解儀，美國(guó)CEM公司；

1.3　試驗(yàn)方法

應(yīng)用ICP-MS測(cè)定法，采用四級(jí)桿碰撞反應(yīng)池技術(shù)，有效減少多原子離子的干擾，保證156CeO/140Ce<1.5%，雙電荷70Ce2+/140Ce<3%。優(yōu)化的ICP-MS工作參數(shù)(表1)。

表1　ICP-MS儀器的工作參數(shù)

1.4　溶液的制備方法

1.4.1供試溶液的制備取供試品0.50 g，精密稱定，置耐壓耐高溫微波消解罐中，加硝酸5 mL，安裝好消解罐置微波消解儀內(nèi)，按表2條件消解。消解完成后溫度顯示低于60 ℃以下取出消解罐，放冷、少量水洗滌消解內(nèi)罐，取出消解液置50 mL容量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL)200 μL，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。除不加金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液外，同法制備試劑空白溶液。

表2　微波消解儀的分析條件參數(shù)

1.4.2標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液的制備分別精密量取鉛、鎘、砷、汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10%硝酸稀釋制成濃度為1 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。另精密量取銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10%硝酸溶液制成濃度為10 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液(塑料瓶?jī)?nèi)密封低溫保存)。

1.4.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密量取鉛、鎘、砷、銅標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 mL含鉛0 ng、1 ng、5 ng、10 ng、20 ng，含鎘0 ng、0.5 ng、2.5 ng、5 ng、10 ng，含砷0 ng、1 ng、5 ng、10 ng、20 ng，含銅0 ng、40 ng、100 ng、200 ng、500 ng的系列濃度混合溶液。另精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含汞0 ng、0.2 ng、0.5 ng、1 ng、2 ng、5 ng的溶液(臨用前配制)。

1.4.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制使用1.0 μg/mL在線內(nèi)標(biāo)溶液，將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)機(jī)測(cè)定，測(cè)得的工作曲線方程(表3)。

表3　標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

1.4.5重復(fù)性試驗(yàn)和加樣回收率檢測(cè)：取供試品(批號(hào)：20161020)約0.5 g，精密稱定，平行6份，按1.4.1制備，供試品(批號(hào)：20161020)約0.5 g，精密稱定，平行6份，分別精密加入相應(yīng)的鉛、鎘、砷、汞、銅標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4.1制備，鉛回收率(%)=(測(cè)得鉛總量-樣品中鉛量)/添加鉛量×100%；鎘回收率(%)=(測(cè)得鎘總量-樣品中鎘量)/添加鎘量×100%；砷回收率(%)=(測(cè)得砷總量-樣品中砷量)/添加砷量×100%A；汞回收率(%)=(測(cè)得汞總量-樣品中汞量)/添加汞量×100%；銅回收率(%)=(測(cè)得銅總量-樣品中銅量)/添加銅量×100%。

2　結(jié)果與分析

2.1　樣品檢測(cè)

2.2　重復(fù)性試驗(yàn)

由表4可知，檢測(cè)結(jié)果顯示重復(fù)性較好。

表4　重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果

2.3　加樣回收率

由表5～9可知,鉛、鎘、砷、汞、銅五種重金屬，其回收率分別為97.8%、97.2%、104.0%、91.2%和92.8%，綜合表明回收率較好，符合要求。

表5　鉛加樣回收率

表6　鎘加樣回收率

表7　砷加樣回收率

表8　汞加樣回收率

表9　銅加樣回收率

按照同樣方法對(duì)3批牡荊素樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見表10。

表10　注射用牡荊素樣品中鉛、鎘、砷、汞、銅測(cè)定結(jié)果

3　結(jié)論與討論

隨著中藥注射劑臨床用藥的廣泛使用，其安全性受到高度關(guān)注[5-6]，鉛、鎘、砷、汞、銅為代表的重金屬是中藥注射劑中最為重要的外源性污染物之一，其毒性主要表現(xiàn)為慢性中毒[7]。所以對(duì)牡荊素注射劑中重金屬進(jìn)行限量檢查具有十分重要的意義。從上述樣品分析結(jié)果看，注射用牡荊素中5種有害重金屬元素的含量均較低，符合2015版《中國(guó)藥典》四部相應(yīng)重金屬元素限量的規(guī)定。

有關(guān)于重金屬檢測(cè)技術(shù)方面，齊景凱等采用微波消解，電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)測(cè)定蒙藥中汞、鉛、鎘、砷、錫和鉻6種重金屬元素的含量[8]；李樂(lè)樂(lè)利用微波消解和ICP-MS技術(shù)對(duì)土壤樣品和節(jié)節(jié)草植株種重金屬元素Cr、Cu、Zn含量進(jìn)行測(cè)定[9]。

本研究探索了電感耦合等離子體質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定注射用牡荊素樣品中鉛、鎘、砷、汞、銅的含量，該方法靈敏度高，檢測(cè)限低，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于注射用牡荊素中重金屬及有害元素的質(zhì)量控制。