余洋 熊飛 董自強(qiáng) 陳曉波 張路生 董傳江

前列腺癌是泌尿生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的腫瘤，研究表明多個(gè)因素與前列腺癌高度相關(guān)[1]。最近，全基因組關(guān)聯(lián)研究(genome-wide association studies, GWASs)發(fā)現(xiàn)多態(tài)性rs6983267與多種類型癌癥的易感性高度相關(guān)[2]。由于8q24染色體與不同種族(高加索人、亞洲人和非洲人)多種類型癌癥的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，有學(xué)者將8q24描述為“基因沙漠”，越來(lái)越多的證據(jù)表明8q24可能在致癌過(guò)程中發(fā)揮積極作用[2]。位于8q24上的多態(tài)性rs6983267表現(xiàn)為G/T單核苷酸多態(tài)性。rs6983267有3種基因型：純合風(fēng)險(xiǎn)等位基因(GG)、純合非風(fēng)險(xiǎn)等位基因(TT)和雜合等位基因(G/T)[3]。研究證明風(fēng)險(xiǎn)等位基因(G等位基因)作為增強(qiáng)蛋白TCF4/LEF1的結(jié)合元件，可以加速體內(nèi)原癌蛋白MYC的轉(zhuǎn)錄[5]。目前，有Meta分析提示rs6983267多態(tài)性與癌癥風(fēng)險(xiǎn)之間可能存在關(guān)聯(lián)[6]。本文旨在納入最新的大樣本研究數(shù)據(jù)，更確切地評(píng)估8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的相關(guān)性。

對(duì)象與方法

一、檢索策略

以8q24、rs6983267、基因多態(tài)性(polymorphism)、前列腺癌(prostate cancer)和腫瘤易感性(cancer susceptibility)為檢索詞在PubMed、Highwire、Cochrane library、Embase、維普、萬(wàn)方醫(yī)學(xué)網(wǎng)、中國(guó)知網(wǎng)和中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索相關(guān)文獻(xiàn)。同時(shí)或單獨(dú)使用以上關(guān)鍵詞及其相應(yīng)的主題詞。

二、文獻(xiàn)的篩選

根據(jù)標(biāo)題和摘要進(jìn)行初步評(píng)估，之后獲取潛在的相關(guān)研究全文并重新評(píng)估。文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)于8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的研究；②以人類為研究對(duì)象；③大樣本的病例-對(duì)照研究；④包含可提取病例組和對(duì)照組各基因型數(shù)據(jù)的研究；⑤符合Hardy-Weinberg平衡(HWE)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無(wú)法提取量化的數(shù)據(jù)用于分析，如病例報(bào)道、綜述和Meta分析等；②研究對(duì)象不是人類或未設(shè)立對(duì)照組;③重復(fù)研究。

三、文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)及資料提取

參考Wang等[6]介紹的方法評(píng)價(jià)文獻(xiàn)質(zhì)量：①是否為大樣本文獻(xiàn)(樣本量大于50例)；②疾病的診斷是否得到病理檢查確認(rèn)；③研究設(shè)計(jì)是否科學(xué)并與同類研究(病例對(duì)照研究)是否具有可比性。兩位研究者獨(dú)立提取數(shù)據(jù)，由另一位研究者核實(shí)數(shù)據(jù)。資料提取內(nèi)容包括：第一作者姓名、文獻(xiàn)發(fā)表時(shí)間、國(guó)家或地區(qū)、研究的疾病、病例組和對(duì)照組各基因型的例數(shù)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用Stata 12.0軟件?？ǚ綑z驗(yàn)評(píng)價(jià)各研究之間的異質(zhì)性，I2衡量異質(zhì)性的大小，P>0.05 時(shí)采用固定效應(yīng)模型，否則判定為異質(zhì)性明顯并采用隨機(jī)效應(yīng)模型。采用OR值和95%CI顯示合并效應(yīng)量，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Egger′s檢驗(yàn)和Begg′s檢驗(yàn)評(píng)估文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚，P<0.10則提示有潛在的發(fā)表偏倚。

結(jié) 果

一、納入文獻(xiàn)的基本情況

經(jīng)檢索得到相關(guān)文獻(xiàn)185篇。依照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選，最后有16篇文獻(xiàn)納入研究，均為英文文獻(xiàn)[3-4,7-20]，其中包括21項(xiàng)研究，涉及139 25例病例和13 398例對(duì)照。納入文獻(xiàn)均為大樣本文獻(xiàn)(最少單一研究樣本量為103例)；所有研究的疾病診斷均得到病理檢查確認(rèn)；所有研究均為病例對(duì)照研究，與同類研究均具有可比性。納入文獻(xiàn)相關(guān)研究的基本情況見(jiàn)表1。

注：PLCO (prostate, lung, colon and ovarian trial); ACS (American cancer society prevention study II); ATBC (alpha-tocopherol, beta-carotene prevention study); FPCC (CeRePP French prostate case-control study); HPFS (health professionals follow-up study); PHS (physicians' health study); FHCRC (fred hutchinson cancer research center king county case-control studies)

二、 Meta分析結(jié)果

將提取的數(shù)據(jù)在各遺傳模型中進(jìn)行分析，結(jié)果超顯性遺傳模型(GG+TT vs GT:OR=1.02, 95%CI: 0.97～1.07,P=0.48) 顯示8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)(圖1)；顯性遺傳模型(GG vs GT+TT:OR=1.26, 95%CI: 1.19～1.33,P<0.001) (圖2)、隱性遺傳模型(GG+GT vs TT:OR=1.26, 95%CI: 1.15～1.38,P<0.001) (圖3)與純合子對(duì)比模型(GG vs TT:OR=1.46, 95%CI: 1.31～1.62,P<0.001) (圖4) 顯示8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖1 8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的超顯性遺傳模型Meta分析森林圖

圖2 8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的顯性遺傳模型Meta分析森林圖

三、敏感性及發(fā)表偏倚分析

將各單個(gè)研究逐一剔除，結(jié)果顯示其他研究合并的95%CI和OR值在研究總體中并未受到明顯影響，可以判定最終的合并效應(yīng)量較穩(wěn)定。應(yīng)用Egger′s線性回歸模型進(jìn)行定量分析，結(jié)果表明無(wú)顯著的發(fā)表偏倚，提示結(jié)論可信度較高。通過(guò)Begg′s檢驗(yàn)分別繪制前列腺癌的3種遺傳模型的漏斗圖，結(jié)果顯示隱性遺傳模型和純合子遺傳模型的漏斗圖基本對(duì)稱，無(wú)顯著的發(fā)表偏倚。

圖3 8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的隱性遺傳模型Meta分析森林圖

圖4 8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的純合子對(duì)比遺傳模型Meta分析森林圖

討 論

在前列腺癌易感性中尋找遺傳因素具有非常大的挑戰(zhàn)性。不同研究之間的標(biāo)準(zhǔn)不一，結(jié)果也不一致，對(duì)研究者造成了很大的困擾。此外，由于早期研究的樣本量小以及計(jì)算和生物信息學(xué)工具不能滿足要求，基因組研究的進(jìn)展受到阻礙。令人欣喜的是上述困境在過(guò)去的十年中得到了改善。人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展及計(jì)算和生物信息學(xué)技術(shù)的進(jìn)步使大規(guī)模GWASs成為可能[21]。新開(kāi)展的GWASs為在前列腺癌病因?qū)W中尋找相關(guān)突變鋪平了道路。

8q24突變影響前列腺癌易感性的具體機(jī)制目前還不清楚，這些突變并不存在于已知的基因中[20]。 因此，需要?jiǎng)?chuàng)新性研究來(lái)解決潛在的遺傳效應(yīng)，確定這些變異是否影響其他染色體(反式調(diào)控元件)上的相鄰基因或基因的功能。盡管早期有研究探索了前列腺癌與rs6983267的相關(guān)性，但該研究?jī)H分析了病例和對(duì)照數(shù)目，并未區(qū)分具體的rs6983267基因亞型[5]。早期的Meta分析顯示歐洲人群中前列腺癌患者rs6983267多態(tài)性的頻率高于對(duì)照者，而在亞洲人群中未檢測(cè)到顯著差異。目前的研究則顯示，歐洲和亞洲的前列腺癌患者其rs6983267基因型GG+GT、基因型GG和等位基因G的頻率顯著增加[22]。本研究中顯性遺傳模型、隱性遺傳模型與純合子對(duì)比模型均顯示8q24 rs6983267基因多態(tài)性與前列腺癌的易感性呈正相關(guān)，rs6983267基因變異的人群患前列腺癌的風(fēng)險(xiǎn)增加。因此，rs6983267多態(tài)性可以作為篩選前列腺癌高風(fēng)險(xiǎn)人群的指標(biāo)，如果有臨床研究支持，可以進(jìn)一步將rs6983267多態(tài)性作為前列腺癌治療的靶點(diǎn)。

盡管經(jīng)過(guò)了精心設(shè)計(jì)，但本研究還是存在很多局限。癌癥的發(fā)生與發(fā)展涉及基因-基因以及基因-環(huán)境的交互作用，而本研究納入分析的文獻(xiàn)缺乏這方面的數(shù)據(jù)。此外，由于納入的研究對(duì)人種的界定沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，納入分析的數(shù)據(jù)不足以進(jìn)行有效的種族、年齡等分層分析。