馬令法，何淑玲，南吉斌，楊廣環(huán)

（甘肅民族師范學(xué)院，甘肅 合作 747000）

近年來(lái)工廠化栽培食用菌的飛速發(fā)展，加快了杏鮑菇產(chǎn)量的增長(zhǎng)，然而菌絲是食用菌栽培成功的基礎(chǔ)[1]，在適宜的光照、溫度、濕度、pH值等因素影響下，杏鮑菇才能不斷長(zhǎng)好，再配以科學(xué)的管理模式，才能獲得穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)的子實(shí)體。國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者對(duì)工廠化栽培杏鮑菇技術(shù)進(jìn)行了探索，通過(guò)菇房設(shè)計(jì)、菌種制作、栽培袋制作以及栽培管理等措施來(lái)提高產(chǎn)量[2-3]。關(guān)于微量元素對(duì)杏鮑菇生長(zhǎng)影響的研究較少。本研究通過(guò)在培養(yǎng)基中添加不同濃度微量元素（Zn2+、Mg2+、B3+），比較杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)情況，以探明微量元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響，為杏鮑菇生產(chǎn)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

試驗(yàn)所用杏鮑菇的菌株均購(gòu)自安徽省六安市金土地農(nóng)業(yè)科普示范園，分別是：杏鮑菇1號(hào)、川杏鮑菇2號(hào)和川杏鮑菇3號(hào)。

1.1.2 試驗(yàn)藥劑

試驗(yàn)所用藥劑及其來(lái)源具體見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)藥劑及其來(lái)源

1.1.3 培養(yǎng)基

試驗(yàn)用PDA培養(yǎng)基按常規(guī)配制，為促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)，加入產(chǎn)酶改良培養(yǎng)劑，配方如下：（1 L）葡萄糖10.0 g、KH2PO42.0 g、VB110.0 mg。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

分別以0（CK）、10、50、100、500、1 000 μmol/L的ZnSO4或MgSO4或H3BO3作為主處理，以3個(gè)杏鮑菇菌株為副處理，共計(jì)3×6×3=54個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)10次重復(fù)。分別將不同濃度微量元素加入改良后的培養(yǎng)基中，120 ℃高壓滅菌2 h。

1.2.2 接種培養(yǎng)

在超凈工作臺(tái)上將供試菌株分別接種于改良后的培養(yǎng)基（所用培養(yǎng)皿直徑90 mm、培養(yǎng)基定量20 mL），25 ℃恒溫暗培養(yǎng)9 d。然后活化培養(yǎng)菌株，用5 mm打孔器打孔（在菌落周圍打孔），菌絲面朝上，25 ℃恒溫條件下暗培養(yǎng)9 d。

1.2.3 菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定

采用劃線法，菌種接種培養(yǎng)后第3天在培養(yǎng)基上劃初始線，接種后第8天統(tǒng)一劃終止線，第9天結(jié)束試驗(yàn)（經(jīng)前期預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，第9天后菌絲生長(zhǎng)不明顯，以后逐步老化，故結(jié)束試驗(yàn)）。

菌絲長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[4]：綜合比較菌絲，最好的（菌絲稠密、粗壯）為4，其次（菌絲不稠密、不太粗壯）為3，再次（菌絲稀疏、弱）為2，最差的（菌絲極稀疏、極弱）為1。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

采用DPS 7.05軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鋅離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

2.1.1 鋅離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度的影響

不同鋅離子濃度處理下3種杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)速度變化的趨勢(shì)見(jiàn)圖1，在改良后的培養(yǎng)基中添加10～100 μmol/L ZnSO4時(shí)，對(duì)3個(gè)杏鮑菇菌株的菌絲生長(zhǎng)速度都表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用，其中杏鮑菇1號(hào)在添加濃度為50 μmol/L時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度促進(jìn)效果最明顯，菌絲生長(zhǎng)速度0.63 cm/d，比CK提高了85.29%；對(duì)川杏鮑菇2號(hào)的最佳促進(jìn)濃度為100 μmol/L，菌絲生長(zhǎng)速度為0.51 cm/d，比CK提高45.71%；對(duì)川杏鮑菇3號(hào)最佳促進(jìn)濃度也為50 μmol/L，菌絲生長(zhǎng)速度為0.59 cm/d，比CK提高68.57%。

圖1 鋅離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響

2.1.2 鋅離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

供試的菌株在添加不同濃度鋅離子處理下長(zhǎng)勢(shì)不同，其中在添加50 μmol/L時(shí)菌絲的長(zhǎng)勢(shì)差異最大（表2），綜合比較3個(gè)菌株，杏鮑菇1號(hào)的菌絲長(zhǎng)勢(shì)旺盛，菌絲稠密且粗壯；長(zhǎng)勢(shì)較差為川杏鮑菇3號(hào)，菌絲不夠稠密，也不太粗壯；川杏鮑菇2號(hào)處于中間狀態(tài)。從菌絲生長(zhǎng)指數(shù)來(lái)分析，杏鮑菇1號(hào)的菌絲生長(zhǎng)指數(shù)是川杏鮑菇2號(hào)的1.23倍、是川杏鮑菇3號(hào)的1.42倍，與后兩者之間差異顯著。在鋅離子的其他濃度下，菌絲長(zhǎng)勢(shì)差異不顯著（P＞0.05）。

表2 50 μmol/L鋅離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

圖2 鎂離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響

圖3 硼離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響

2.2 鎂離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

2.2.1 鎂離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度的影響

不同鎂離子濃度處理下3種杏鮑菇的菌絲生長(zhǎng)速度見(jiàn)圖2。鎂離子對(duì)3個(gè)菌株的生長(zhǎng)速度影響均表現(xiàn)為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制。在培養(yǎng)基中添加10～50 μmol/L MgSO4時(shí)，杏鮑菇1號(hào)菌絲生長(zhǎng)最好，最佳促進(jìn)生長(zhǎng)濃度為50 μmol/L，菌絲生長(zhǎng)速度達(dá)到0.51 cm/d，比CK提高45.72%，50～1 000 μmol/L則抑制菌絲的生長(zhǎng)速度。同樣，川杏鮑菇2號(hào)和川杏鮑菇3號(hào)在添加10～50 μmol/L MgSO4時(shí)也表現(xiàn)出菌絲生長(zhǎng)速度加快，而在高于50 μmol/L濃度范圍內(nèi)則抑制了菌絲生長(zhǎng)；當(dāng)最佳促進(jìn)濃度為50 μmol/L時(shí)，比對(duì)照分別提高17.14%和43.33%。

2.2.2 鎂離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

供試3個(gè)菌株在添加不同濃度鎂離子處理下生長(zhǎng)趨勢(shì)大致相同（表3），其中杏鮑菇1號(hào)和川杏鮑菇2號(hào)菌絲的長(zhǎng)勢(shì)在50 μmol/L時(shí)差異不大，二者和川杏鮑菇3號(hào)比較表現(xiàn)出顯著差異。杏鮑菇1號(hào)的菌絲長(zhǎng)勢(shì)旺盛，菌絲濃密且粗壯；長(zhǎng)勢(shì)較差的為川杏鮑菇3號(hào)，在菌絲濃密、粗壯程度方面都不如其他兩者；川杏鮑菇2號(hào)處于中間狀態(tài)。從菌絲生長(zhǎng)指數(shù)上分析，川杏鮑菇3號(hào)和杏鮑菇1號(hào)、川杏鮑菇2號(hào)差異顯著，具有生物學(xué)統(tǒng)計(jì)意義，但杏鮑菇1號(hào)和川杏鮑菇2號(hào)之間差異不顯著，說(shuō)明鎂離子對(duì)這2個(gè)菌株的影響不大，但具有促進(jìn)作用。鎂離子50 μmol/L以外的濃度處理下，菌絲長(zhǎng)勢(shì)差異不顯著。

表3 50 μmol/L鎂離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

2.3 硼離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

2.3.1 硼離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度的影響

不同硼離子濃度處理下3種杏鮑菇的菌絲生長(zhǎng)速度趨勢(shì)見(jiàn)圖3。硼離子濃度對(duì)3個(gè)菌株生長(zhǎng)速度的影響表現(xiàn)與鎂離子有相似之處，即為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制。在培養(yǎng)基中添加10～100 μmol/L硼酸時(shí)促進(jìn)了杏鮑菇1號(hào)的菌絲生長(zhǎng)，最佳促進(jìn)濃度為100 μmol/L，生長(zhǎng)速度達(dá)到0.49 cm/d，比對(duì)照提高96.00%，添加濃度高于100 μmol/L時(shí)抑制了菌絲的生長(zhǎng)速度。川杏鮑菇2號(hào)和川杏鮑菇3號(hào)表現(xiàn)在10～50 μmol/L時(shí)促進(jìn)了菌絲生長(zhǎng)速度，在硼離子濃度高于50 μmol/L時(shí)抑制川杏鮑菇2號(hào)和川杏鮑菇3號(hào)的菌絲生長(zhǎng)速度。

2.3.2 硼離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

3個(gè)菌株在不同的硼離子濃度下生長(zhǎng)趨勢(shì)相似（表4），在50 μmol/L時(shí)，杏鮑菇1號(hào)和川杏鮑菇3號(hào)菌絲的長(zhǎng)勢(shì)差異不大，川杏鮑菇3號(hào)的菌絲長(zhǎng)勢(shì)較旺盛，菌絲不稠密但不太粗壯，表現(xiàn)出較佳的特性；長(zhǎng)勢(shì)最差的為川杏鮑菇2號(hào)，在菌絲濃密、粗壯程度方面都不如其他二者。通過(guò)對(duì)三者的菌絲生長(zhǎng)指數(shù)結(jié)果分析，結(jié)果表明：川杏鮑菇2號(hào)最小，與其他菌株之間差異顯著。50 μmol/L以外的濃度處理同樣差異不顯著。

表4 50 μmol/L硼離子對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)的影響

3 結(jié)論與討論

應(yīng)用杏鮑菇3個(gè)菌株（杏鮑菇1號(hào)、川杏鮑菇2號(hào)、川杏鮑菇3號(hào)）在改良后培養(yǎng)基上添加鋅、鎂、硼離子研究其對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中添加10～100 μmol/L的ZnSO4時(shí)，對(duì)杏鮑菇3個(gè)菌株的菌絲生長(zhǎng)速度都有促進(jìn)作用，最佳促進(jìn)濃度為50 μmol/L，菌絲生長(zhǎng)速度比對(duì)照分別提高85.29%、45.71%和68.57%；在培養(yǎng)基中添加10～50 μmol/L MgSO4時(shí)，杏鮑菇1號(hào)菌絲生長(zhǎng)最好，最佳促進(jìn)生長(zhǎng)濃度為50 μmo/L，50～1 000 μmol/L處理則抑制了菌絲的生長(zhǎng)速度。硼離子濃度對(duì)3個(gè)菌株生長(zhǎng)速度的影響表現(xiàn)與鎂離子有相似之處，即為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制?？赡茉蚴遣煌男吁U菇菌株對(duì)鋅、鎂的敏感性不同。

鋅、鎂、硼能促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)速度的原因可能是促進(jìn)了相關(guān)酶的活性[5]，如過(guò)氧化物酶和漆酶；但是濃度過(guò)大，會(huì)對(duì)菌絲細(xì)胞造成毒害。雖然本研究在驗(yàn)證鋅離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響時(shí)并沒(méi)有觀察到對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度抑制的現(xiàn)象，可能的原因是杏鮑菇對(duì)鋅離子的耐性比較強(qiáng)，而本研究所采用的濃度梯度還沒(méi)有對(duì)杏鮑菇菌絲造成傷害。而鋅離子濃度大于500 μmol/L時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度有所下降，說(shuō)明鋅離子大于此濃度時(shí)，對(duì)杏鮑菇菌絲已經(jīng)造成傷害。

Niess等[6]的研究發(fā)現(xiàn)，鎂可以促進(jìn)糙皮側(cè)耳菌絲生長(zhǎng)速度。本研究結(jié)果表明，低濃度的鎂離子對(duì)菌絲生長(zhǎng)都起促進(jìn)作用，高濃度則抑制菌絲生長(zhǎng)速度，與Hammel[7]關(guān)于香菇的研究結(jié)果相似，在淀粉-麥芽糖培養(yǎng)基中添加1.3 μmol/L MgSO4時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度降低了50%，MgSO4濃度達(dá)到1.5 μmol/L時(shí)菌絲幾乎不生長(zhǎng)。謝必峰等[8]通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鋅對(duì)香菇、金針菇、風(fēng)尾菇菌絲生長(zhǎng)都表現(xiàn)出促進(jìn)作用，但是鎂對(duì)不同的菌株菌絲生長(zhǎng)速度影響不一樣，發(fā)現(xiàn)20、100、200 mg/L MgSO4處理對(duì)3個(gè)菌株的生長(zhǎng)速度都表現(xiàn)促進(jìn)作用，而有的菌株則在低濃度時(shí)表現(xiàn)出促進(jìn)作用，高濃度時(shí)則抑制菌絲生長(zhǎng)速度，這與本研究結(jié)果相似。

關(guān)于在栽培料中添加微量元素對(duì)杏鮑菇子實(shí)體生長(zhǎng)影響的研究，有待于在下一步工作中開(kāi)展。