姚國光 ，馬 亮 ，叢 笑 ，馬 莉 ，姜永瑋 ，李 囡 ，楊 輝 ，楊春峰 ，曹永彤 ?

（1.赤峰寶山醫(yī)院 檢驗科，內蒙古 024076；2.中日友好醫(yī)院 檢驗科；3.婦產科，北京 100029）

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，2012年居全球女性最常見惡性腫瘤的第4位[1]。人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是致使患者出現(xiàn)癌前病變的重要因素之一，HPV存在高度的種屬性，感染宿主后，病毒基因整合至宿主基因，造成宿主細胞增殖紊亂、分化功能喪失，引起宮頸病變，進而引起宮頸癌[2]。相關研究顯示HPV感染長病程（＞10年）者發(fā)生宮頸癌概率約為50%[3]，而宮頸液基薄層細胞學檢測（thinprep cytologic test，TCT）是目前早期篩查宮頸癌前病變的常用手段。TCT聯(lián)合HPV檢測可提高宮頸病變的檢出率，對宮頸癌早期篩查診斷和早期治療具有重要意義。

表1 各年齡段HPV陽性率及TCT陽性率比較 n（%）

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2017年1月～12月間6384例中日友好醫(yī)院婦科門診女性患者標本，同時進行HPV和TCT檢查，患者年齡17～90歲，中位年齡34歲。

1.2 標本采集和檢測方法

TCT標本采集前將研究對象宮頸分泌物擦干凈，用特制的毛刷從受試對象宮頸順時針旋轉5圈后立即放入裝有細胞保存液的小瓶中，TCT標本經離心后分離標本中的黏液、血液和炎性細胞，細胞經自然沉淀轉移到涂有黏附劑的載玻片上，制成直徑為20mm的超薄層細胞。

HPV標本采集方法與TCT相同，HPV DNA（包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、82）檢測采用上海之江生物科技股份有限公司的HPV的基因分型檢測試劑盒。

1.3 結果判讀

HPV的4種混合液在FAM和VIC通道均無Ct值，則判定為陰性：Ct值≤38.0且擴增曲線呈典型的S型，判定為HPV陽性；Ct在38.0～40.0之間，需重復測定.若仍在38.0～40.0之間且擴增曲線呈典型S型，則判定為陽性，反之為陰性。任何一種HPV亞型陽性，即為HPV陽性：2種及以上亞型同時陽性，即為多重感染，多重感染重復計數(shù)。

對患者進行TCT檢測后，其診斷標準采用伯塞斯達系統(tǒng)（TBS）分級系統(tǒng)：無上皮內病變或惡性病變（NILM），不典型鱗狀細胞（ASC）包括ASC不能明確意義（ASC-US）和ASC不除外上皮內高度病變（ASC-H）、鱗狀上皮內低度病變（LSIL）、鱗狀上皮內高度病變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC）和腺癌（AC），結果以出現(xiàn) ASC、LSIL、HSIL 為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 宮頸組織細胞學檢查結果

6384例患者中無宮頸上皮內瘤變者5857例（91.74%）、不典型鱗狀細胞 （ASC）者 273例（4.28%）、低度鱗狀上皮細胞內病變 （low-grades quamous intraepithelial lesion，LSIL）170例（2.66%）、高度鱗狀上皮內病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）84例（1.32%）。

2.2 HPV感染年齡分布及差異

表1示，6384例婦科就診人群中HPV陽性1539例（單一或多重感染），總感染率為24.11%，15種HPV基因型均有檢出。17～30歲年齡組感染率高于其它年齡組（均P＜0.01）。單一感染各年齡組間差異無統(tǒng)計學意義 （P＞0.05），多重感染中17～30歲年齡組陽性率（11.67%）顯著高于其它年齡組（均P＜0.01）。HPV陽性標本中單一型感染占比 （74.14%）顯著高于多重感染 （25.86%）（P＜0.01）。各年齡組間TCT檢測結果陽性率差異無統(tǒng)計學意義（均 P＞0.05）。

2.3 單一感染、多重感染與TCT的相關性

表2示，多重感染組的TCT陽性率31.66%（126/398）顯著高于單一感染組 （24.45%，P＜0.01）。

表2 單一感染與多重感染中TCT陽性數(shù)

2.4 HPV感染亞型分布

1545例HPV陽性標本中，單一亞型感染型別較高的依次分別是 52型 （19.28%）、16型（17.7%）、58型（16.83%），多重感染型別較高的 3種亞型與單一感染一致。

TCT陽性結果中，感染亞型最多的是16型（20.17%）、58型（13.56%）、52型（11.86%）； TCT陰性結果中感染亞型最多的是52型 （19.25%）、58型（15.21%）和 16型（13.53%）。

2.5 TCT各組HPV感染率比較

根據(jù)TBS分組后，HPV在HSIL組陽性率為91.67%，LSIL組為 77.65% ，ASC組為 71.79%，NILM組為19.36%。ASC組、LSIL組、HSIL組與NILM組HPV感染率具有顯著差異（均P<0.01）。HSIL組HPV感染率顯著高于LSIL組和ASC組（均P＜0.01），ASC組HPV感染率顯著高于NILM組（P＜0.01）。 HSIL 組中，HPV16型占 58.33%，顯著高于本組其他HPV亞型。

3 討論

研究表明，75%以上的性活躍女性在一生中會感染一種或者一種以上類型的HPV[4]，但是其中90%的感染患者在感染后1年左右能夠通過自身的免疫系統(tǒng)將病毒清除，只有10%患者不能清除而成為持續(xù)感染者。由于宮頸癌早期一般發(fā)病較為隱匿，癥狀較不典型[5]，一旦發(fā)生，對患者的心理和生理均造成嚴重的影響，而持續(xù)的高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌的首要病因，95%～99.7%的宮頸癌患者可以檢出HPV[6]。宮頸癌是目前僅有的少數(shù)幾個可以早期發(fā)現(xiàn)、早期治療、并可治愈的惡性腫瘤之一[7]。由于在宮頸癌發(fā)生前會有較長一段時間的癌前病變[8]，此期間只要采取有效的干預措施，就可降低宮頸癌的發(fā)生率，因此對HPV陽性患者及時進行干預可有效預防宮頸癌。

3.1 HPV感染與年齡的關系

本研究中發(fā)現(xiàn)高危型HPV的感染與年齡相關。17～30歲年齡組總感染率（29.83%）及多重感染率（11.67%）最高，可能與此年齡人群性活躍度高并缺少相應的保護措施以及免疫系統(tǒng)未被致敏而導致了感染原因有關，雖然感染率較高，但病毒則易被清除，此階段感染大部分為暫時性[9]。其次是50～60歲組（24.97%），這與本組女性機體內雌激素水平減低和免疫功能減退、機體清除病毒能力下降以及就診時宮頸已發(fā)生病變有關，≥60歲的女性感染率有所下降，與智艷芳等[10]研究報告的年齡段與HPV感染率呈“U”型曲線關系布略有不同，可能與人群分布引起偏差有關。

3.2 HPV亞型感染率

在HPV感染的各亞型中，單一感染與多重感染型別前 3 位均是 HPV52、HPV16、HPV58，與2015年本院統(tǒng)計結果 （單一型別感染率較高的3種依次為HPVl6、52、58；多重感染型別感染率較高的是HPVl6、58、和52型）[11]略有差別，說明HPV52亞型感染例數(shù)已經超過HPV16亞型成為單一感染和多重感染數(shù)量最多的亞型。這也與北京天壇醫(yī)院史從寧等[12]、重慶地區(qū)徐薇等[13]研究結果一致。這也為本地區(qū)HPV流行現(xiàn)狀、相關疫苗的研制提供了數(shù)據(jù)支持。在本研究中，單一感染明顯高于多重感染，但是多重感染患者中TCT陽性率高于單一感染TCT陽性率，符合Harper等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，說明多重感染相對于單一感染對于宮頸細胞學改變具有更大的作用，故多重HPV感染更應該引起臨床重視。

3.3 HPV感染亞型與TCT病變級別的相關性

本研究中HSIL組HPV感染率91.67%，LSIL組77.65% ，ASC組71.79%，NILM組19.36%，說明HPV感染率隨著TCT結果的嚴重程度升高而不斷增加，與傅祝能等[15]研究類似。在2016年美國陰道鏡和宮頸病理學會（ASCCP）新指南提出：對于宮頸細胞學無異常而HPV陽性的30歲以上的婦女，如其為HPV16、18感染者，應立即進行陰道鏡檢查；HPV16是發(fā)生高度上皮內瘤變（HSIL）風險最高的亞型[16]。而在本次研究HSIL組中，HPV16亞型感染率為58.33%，明顯高于本組其他亞型感染率、也高于其他各組HPV16感染率；而在HPV總感染人次中HPV52亞型占17.15%，HPV16亞型占15.41%，HPV58亞型占14.74%，但感染不同型別疾病進展和預后不近相同，HPV16亞型的患者進一步進展為HSIL和宮頸癌的可能性較感染HPV52亞型高，檢出HPV16感染后更應該積極治療，對未感染HPV16女性應積極接種HPV16價疫苗，但有HPV58與HPV52型檢出也不應忽視，與邱峰等[17]研究結果基本一致。本研究結果顯示，HPV檢測結果陰性而TCT細胞學結果陽性病例達122例（23.15%），其中ASC組77例，LISL組38例，HISL組7例，可能與HPV數(shù)量低于檢測范圍下限或存在其它不包含在本研究檢測范圍內的高危亞型有關，也可能與取材等原因有關。綜上所述，本研究對HPV各種亞型感染情況分布及與TCT相關性進行了分析和匯總，為本地區(qū)HPV流行現(xiàn)狀的分析研究、相關疫苗的研制開發(fā)及不同亞型HPV的預防治療提供依據(jù)。

4 參考文獻