韓雪 郭偉
摘要:近些年我國動物醫(yī)學、科學專業(yè)發(fā)展突飛猛進,已經(jīng)不再是原來傳統(tǒng)思想中認為的鄉(xiāng)村獸醫(yī),越來越多大學生及相關從業(yè)人員選擇動物醫(yī)學、科學行業(yè),不斷壯大該學科的科研隊伍。而動物細胞培養(yǎng)不僅在動物醫(yī)學、科學領域得到廣泛的應用,而且在生物制品、轉(zhuǎn)基因動物的培養(yǎng)、檢測有毒物質(zhì)以及醫(yī)學研究等領域也都占有非常重要的位置,相比較植物組織培養(yǎng)的應用范圍更加的廣泛并受到專業(yè)人員的歡迎。
關鍵詞:動物細胞;培養(yǎng);應用
中圖分類號:S81
文獻標識碼:B
文章編號:2095-9737(2018)06-0020-01
1 細胞培養(yǎng)概述
實際生產(chǎn)中所說的動物細胞培養(yǎng),其實是指基于體外人工的條件之下,離散的動物活細胞生長和增殖的過程,而在這個生長和增值的過程當中細胞是不會再繼續(xù)有組織形成的。益處主要是對于調(diào)控和觀察具有很大的方便,所以應用在動物物質(zhì)代謝過程、染色體的形態(tài)變化、遺傳物質(zhì)的表達調(diào)控等相關難度比較大的科學領域,屬于便利性和有效性都比較突出的新技術(shù)。但是實際運用時細胞培養(yǎng)還是屬于比較新的學科,所以在發(fā)展的最初階段應該避免將其與動物組織培養(yǎng)相混淆,進一步的加以區(qū)別和應用。
細胞培養(yǎng)主要是將組織碎塊分離成單個細胞的狀態(tài),實際采用的是消化酶法。細胞懸液一般都是用培養(yǎng)基制作,選擇比較適宜的體外條件以保證細胞可以進行生長和繁殖,并且還能夠?qū)⒁欢ǖ慕Y(jié)構(gòu)和功能特性進行相應的保留。在生命科學領域常常會采取細胞培養(yǎng)技術(shù)展開相應的科學研究,可以將神經(jīng)體液因素對肝、腎解毒功能的干擾性消除掉,進一步可以針對性的觀察某些因素或藥物對培養(yǎng)細胞而產(chǎn)生的直接作用。
2 動物細胞培養(yǎng)實驗的要求
實驗前準備:要求研究人員在實驗之前按類別制定相應的操作卡片,而且要求分別在卡片上將此次實驗用器材的名稱、規(guī)格、數(shù)量、操作要領和實驗注意事項等逐一的標注清楚。
消毒處理:對于實驗的無菌室都應該進行相應的消毒處理措施,通常是每周1~2次,主要采用乳酸蒸氣或者是過氧乙酸加紫外線進行消毒處理。還要將超凈臺內(nèi)空氣保證凈化的狀態(tài),并且要求與超凈臺面構(gòu)成相對無菌的環(huán)境。
無菌操作:對于實驗器材的使用應該盡量避免直接用手與其進行接觸,應該盡量用手指對器械進行實驗的所有操作。不同的細胞如果在同一個時間進行操作應該保證專管專用,并且做到吸管可以勤換,這樣做的目的是避免污染范圍擴大和交叉污染的情況出現(xiàn)。
實驗過程中的操作要求:實驗人員的洗手、著裝要求都與醫(yī)學中外科臨床的要求一致。實驗過程中研究人員在講話或咳嗽時應該避開操作臺,否則唾沫會帶著微生物進入超凈臺內(nèi)從而將空氣加以污染。在實驗操作者離開超凈臺時應該用肘關節(jié)將側(cè)窗口關閉,這樣能夠避免無菌室內(nèi)存在的細菌隨著空氣的流動而進入凈化操作區(qū),造成相應的污染。
實驗后的相關要求:實驗完畢之后要按照相關規(guī)定關閉超凈臺風機和電源,對于實驗中沒有使用的器材置于飯盒中,而對于用過的玻璃器材可以浸泡在清水中,并且將包裝紙呈疊卷的狀態(tài)放置,而將繩成束加以分類歸放。將對超凈臺面進行相應的消毒處理。
3 細胞培養(yǎng)的應用
生物學基礎研究。在細胞生物學專業(yè)上,可采用動物細胞培養(yǎng)的技術(shù)研究動物的正?;蛘呤遣±砑毎男螒B(tài)、生長發(fā)育狀態(tài)、細胞的營養(yǎng)水平、機體的代謝以及病變等過程。在遺傳學研究中,可以將培養(yǎng)的動物細胞針對染色體展開相應的分析,還可以將細胞融合技術(shù)與細胞培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合,從而建立細胞遺傳學,可以對動物的遺傳進行分析,在動物的雜交育種方面也適宜展開相應的研究。在胚胎工程中可以體外培養(yǎng)卵母細胞,并且進行體外受精、胚胎分割和移植,并且在這方面已經(jīng)有了比較成熟的技術(shù),得以應用在家畜的繁殖生產(chǎn)研究工作過程當中。
動物臨床醫(yī)學。第一,動物細胞培養(yǎng)技術(shù)在動物的遺傳病和先天畸型的產(chǎn)前診斷方面具有比較良好的應用。第二,有相關更加深入的科學研究,通過對染色體的對比分析,可以對于易患癌癥的病畜加以檢測,便于及早介入,以更好的進行防治,但是目前在生產(chǎn)中很少的應用。第三,細胞培養(yǎng)還可在動物的臨床治療中加以應用。除此之外還可以在生物大分子制品的相關領域加以應用,而針對畜禽臨床中常見的某些代謝缺陷疾病具有一定的應用價值。
動物育種。細胞培養(yǎng)、細胞融合、細胞雜交以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的創(chuàng)建與相互結(jié)合,已經(jīng)在研究領域通過細胞水平操作并且將動物的基因進行相應的更改,并且進行遺傳物質(zhì)的重組。有了這項技術(shù),就可以按照需要將生物的遺傳組成進行不同程度的更改,達到在實驗室中完成新品種的培育工作,很大程度上將育種的進程縮短,增加育種工作的經(jīng)濟效益。
大分子生物制品。早在20世紀的60年代就已經(jīng)開始用動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)以生產(chǎn)大分子生物制品,但是伴隨大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的逐漸成熟,以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)不斷的發(fā)展和應用研究,在實際生產(chǎn)過程中,通過利用動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)大分子藥用蛋白比原核細胞表達系統(tǒng)具有更好的優(yōu)越性。