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(1.信陽市羊山新區(qū)農業(yè)綜合發(fā)展服務中心，河南 信陽 464000;2.信陽農林學院牧醫(yī)工程學院，河南 信陽 464000)

0 引言

仔豬滲出性皮炎又稱為“豬油皮病”或“仔豬油性皮脂溢”，多發(fā)生于5～6日齡哺乳仔豬及剛斷奶的仔豬[1]。豬源葡萄球菌是引起該病的主要病原之一， 近年來，豬滲出性皮炎的危害雖然未達到嚴重暴發(fā)的程度，但由于各地區(qū)流行菌株對藥物敏感性的差異，造成部分豬場防治效果不理想。本研究通過對河南南部地區(qū)某疑似發(fā)生仔豬滲出性皮炎豬場的病原菌進行分離鑒定、藥物敏感性試驗，為該場防治本病提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集

用10%甘油生理鹽水浸潤無菌棉簽采集病豬皮膚流膿結痂處。

1.1.2 試劑

革蘭氏染色液、Baird-parker 瓊脂培養(yǎng)基、胰酪胨大豆肉湯、葡萄球菌屬微量生化反應管TH-16S、革蘭氏陽性菌藥敏試紙盒(杭州濱和微生物試劑有限公司)、鹽酸頭孢噻呋注射液(湖南加農正和生物技術有限公司)、維爾康圣力斗包(阿莫西林可溶性粉)、 阿莫西林硫酸黏菌素注射液 (北京中農大動物保健品集團湘潭獸藥廠)、注射用青霉素鈉(上海公誼獸藥廠)、注射用硫酸鏈霉素(華北制藥集團動物保健品有限公司)、鹽酸林可霉素注射液(江西雙實藥業(yè)有限公司)、鹽酸卡那霉素注射液(浙江匯特動物藥業(yè)有限公司)7種商品獸藥。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基的制備

按照商品培養(yǎng)基的說明進行制備。

1.2.2 細菌分離培養(yǎng)

將病料接種于已配制好的胰酪胨大豆肉湯，37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24 h，待試管肉湯變渾濁，將培養(yǎng)好的肉湯均勻接種于Baird-parker瓊脂培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)18～24 h。培養(yǎng)基表面菌落多為白色光滑隆起小菌落，約直徑2 mm。用接種環(huán)挑取單菌落進行涂片觀察。

1.2.3 形態(tài)學觀察

挑取純培養(yǎng)后的單菌落革蘭氏染色，顯微鏡鏡檢，觀察其形態(tài)學特征。

1.2.4 生理生化試驗

分離純化過的細菌進行尿素、蔗糖、精氨酸雙水解酶、木糖、乳糖、甘糖、木醇、麥芽糖、蕈糖、甘醇、N-乙酰葡胺、硝酸鹽、蜜二糖、果糖、葡磷胨水、山梨醇16項生化指標測定，并與TH-16S編碼冊對照記錄結果。

1.2.5 藥敏試驗

藥敏試驗采用藥敏紙片擴散法分別以標準藥敏片苯唑西林、青霉素G、紅霉素、大觀霉素、克拉霉素、萬古霉素、克林霉素、氯霉素、四環(huán)素、米諾環(huán)素、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、左氟沙星、多粘菌素B、復方新諾明、呋喃妥因和自制商品獸藥藥敏片進行藥敏試驗，記錄抑菌圈大小進行耐藥性分析。

2 結果與分析

2.1 形態(tài)學結果

在1 000倍顯微鏡下觀察分離菌形態(tài)呈圓形或卵圓形，葡萄串狀排列，革蘭氏染色為陽性菌， 初步診斷為表皮葡萄球菌，如圖1。

圖1 革蘭氏染色后的葡萄球菌(1000x)

2.2 生理生化試驗

將疑似菌株進行生化試驗，具體如表1。

表1 葡萄球菌生理生化試驗鑒定結果

鑒定值331320,檢索葡萄球菌屬細菌生化鑒定編碼冊確定鑒定結果為表皮葡萄球菌

2.3 藥敏試驗

2.3.1 標準藥敏片藥敏試驗結果

表2 標準藥敏片藥敏試驗結果

注：S表示敏感;I表示中敏;R表示耐藥

16種抗生素藥敏試驗結果表明豬源葡萄球菌對苯唑西林、大觀霉素、萬古霉素、左氟沙星、呋喃妥因敏感，對諾氟沙星、環(huán)丙沙星中敏，對其他抗生素都產生了不同程度的耐藥性。

2.3.2 自制商品獸藥藥敏片藥敏試驗結果

表3 自制商品獸藥藥敏片藥敏試驗結果

注：抑菌圈直徑≧17mm為高敏S，在12～16mm內為中敏I，≦11mm為耐藥R[2]

試驗結果表明，分離菌對市場上常用獸藥品種也部分產生了一定的耐藥性。

3 討論與結論

(1)從臨床癥狀，剖檢病理變化及實驗室診斷結果，確定引起該場發(fā)生仔豬滲出性皮炎病的病原體為豬源表皮葡萄球菌。

(2)從藥敏試驗結果分析，分離菌對標準藥敏片苯唑西林、大觀霉素、萬古霉素、左氟沙星、呋喃妥因敏感，對諾氟沙星、環(huán)丙沙星中敏，對其他抗生素都產生了不同程度的耐藥性，同時對市場上在售的部分商品獸藥品種也產生了一定的耐藥性，這反應出臨床上由于細菌的耐藥性問題的存在，是造成豬場防治該病比較困難的原因之一。

(3)由于葡萄球菌是一種常在菌，廣泛存在于自然界和豬體的表面，要徹底根除本病幾乎不可能。為了控制本病的發(fā)生，首先要切斷主要的傳染源，對病豬不但要早發(fā)現(xiàn)、早隔離和及時治療，而且對病豬污染的環(huán)境和用具進行徹底消毒，同時對與病豬有接觸的豬要進行預防性治療。當發(fā)現(xiàn)皮膚有損傷時，應及時用碘酊或酒精等消毒液進行處置，防止感染的發(fā)生。對圈舍及運動場地等也應經(jīng)常清掃，保持清潔，定期消毒，盡量減少環(huán)境中殘存的致病菌。為保證臨床治療效果，建議豬場按照藥敏結果針對性用藥，減少日常容易產生耐藥性的不合理用藥習慣，例如長期依賴某幾種抗生素、不注意藥物的配伍。