楊世忠 ，林代俊 ，鄭玉才 ，王 毅 ，張 濤 ，周 瀟 ，陳 益

（1.涼山州畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，四川 西昌 615042；2.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，成都 610041）

建昌馬是中國(guó)山地馬的優(yōu)良地方品種，是西南馬的類群之一，主要分布在四川省木里、鹽源、金陽、西昌、普格等縣市，體型較矮小，對(duì)棲息地的生態(tài)環(huán)境有很好的適應(yīng)性［1］。有關(guān)建昌馬的生理常值迄今為止沒有進(jìn)行過系統(tǒng)的研究，而國(guó)外發(fā)表的馬的血液生理生化常值與建昌馬的實(shí)際情況存在差異［2］。因此，本研究開展了建昌馬血液生理生化指標(biāo)的系統(tǒng)測(cè)定，以期為其遺傳育種、疾病診斷等提供必要的數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集

2015年12月—2016年9月在四川省涼山州隨機(jī)選擇建昌馬的中心產(chǎn)區(qū)3個(gè)有代表性的地點(diǎn)，對(duì)1 063匹成年建昌馬（公馬285匹、母馬778匹）進(jìn)行了體溫、脈搏、呼吸等生理指標(biāo)的測(cè)定；用真空采血管（含抗凝劑和無抗凝劑）采集成年馬血液（公馬15匹，母馬25匹），分別制備抗凝血和血清，用于血液常規(guī)和生化等指標(biāo)的測(cè)定。血清保存于-20℃冰箱至分析。

1.2 血液常規(guī)指標(biāo)的測(cè)定

血液常規(guī)指標(biāo)按常規(guī)臨床檢驗(yàn)的要求測(cè)定。紅細(xì)胞沉降速度：用長(zhǎng)管法（魏斯特格林法）；紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：用鈕巴氏改良血細(xì)胞計(jì)算板，生理鹽水作稀釋液；白細(xì)胞計(jì)數(shù)：計(jì)算板同上，用l%冰醋酸和1%鹽酸混合作稀釋液；血紅蛋白：用薩里氏法；白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：涂片干燥后，用羅曼洛夫-姬姆薩法染色并分類計(jì)數(shù)；血清鉀：用四苯硼鈉比濁法；血清鈉：用焦銻酸鉀法；血清鈣：用乙二胺四乙酸二鈉滴定法；血清磷：用氯化亞楊法；血糖：用福林-吳憲氏法。

1.3 血液生化指標(biāo)的測(cè)定

建昌馬的血液生化指標(biāo)采用AUTOLAB PM4000全自動(dòng)生化分析儀（意大利），按試劑盒提供的說明書要求測(cè)定。使用的14種試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.4 血液電解質(zhì)的分析

電解質(zhì)采用SPOTCHEM EL SE-1520電解質(zhì)分析儀測(cè)定，儀器購自愛科來醫(yī)療電子（上海）有限公司。

2 結(jié)果與分析

2.1 建昌馬的基礎(chǔ)生理指標(biāo)測(cè)定

本研究測(cè)試分析的建昌馬共1 063匹，其中公馬285匹，母馬 778匹，其基礎(chǔ)體溫公馬（37.05±0.76）℃，母馬（37.33±0.72）℃；呼吸頻率依次為每分鐘24.23次±9.96次和23.73次±9.15次；脈搏依次為每分鐘41.42次±5.95次和40.41次±6.89次。這些指標(biāo)在公馬與母馬之間無明顯差別。

2.2 血液常規(guī)測(cè)定

由表1可知，建昌馬血液常規(guī)的性別差異主要體現(xiàn)在紅細(xì)胞及血紅蛋白方面，其中公馬血液中的紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量均顯著或極顯著低于母馬（P＜0.05或P＜0.01），其他指標(biāo)無顯著差異（P＞0.05）。與普通馬相比，血液中紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量、淋巴細(xì)胞數(shù)量及血小板數(shù)量均偏低，而紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量卻是普通馬的1倍。

表1 血液常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)

2.3 血液生化指標(biāo)分析

由表2可知，建昌馬公馬血清中總膽固醇、甘油三酯和總膽紅素含量均顯著或極顯著低于母馬（P＜0.05或P＜0.01），但肌酐和無機(jī)磷含量均顯著或極顯著高于母馬（P＜0.05或P＜0.01），其他指標(biāo)無顯著差異（P＞0.05）。建昌馬血液中堿性磷酸酶、源于肝的轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力存在較大的個(gè)體間差異，但與普通馬較接近；母馬血液甘油三脂含量也存在很大的個(gè)體差異。與普通馬相比，建昌馬血液中尿素氮含量高，而血糖含量偏低。

2.4 血液電解質(zhì)測(cè)定

表3結(jié)果表明，血清中的Na、K、Cl含量在建昌馬公馬與母馬之間均無顯著差異（P＞0.05），且與普通馬的參考值接近。

表2 建昌馬血液生化指標(biāo)

表3 建昌馬血清電解質(zhì)的含量mEq/L

3 討論

血液生理生化指標(biāo)是反映動(dòng)物內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的核心參數(shù)，包括血細(xì)胞數(shù)量和比例、血清蛋白含量和組成、血脂含量和組成、酶活力、血糖含量等，與機(jī)體的物質(zhì)代謝和能量代謝水平直接相關(guān)，并在一定程度上受物種、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、疾病等因素的影響。

本研究測(cè)定的建昌馬基礎(chǔ)體溫與李詩洪等［6］分析的建昌馬數(shù)值十分接近，但呼吸頻率介于12～28次/分鐘之間，脈搏次數(shù)也存在一定差異。這可能與試驗(yàn)馬生活的地區(qū)海拔差異或活動(dòng)狀態(tài)不同有關(guān)。

本研究顯示，建昌馬公馬血液中的紅細(xì)胞數(shù)量低于母馬（表 1）。這與李詩洪等［4］報(bào)道的較高海拔（2 600 m）地區(qū)的建昌馬結(jié)果類似，但血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積與報(bào)道的不同。這可能與地區(qū)間差異或試驗(yàn)馬的數(shù)量不同有關(guān)。建昌馬的血紅蛋白含量與肖開進(jìn)等［5］對(duì)云南矮馬和安寧果下馬的測(cè)定結(jié)果接近，但紅細(xì)胞數(shù)量明顯低很多。這可能與分析方法、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇有關(guān)。建昌馬棲息的環(huán)境與安寧果下馬類似，二者血紅蛋白水平接近，反映了它們對(duì)環(huán)境海拔高度的適應(yīng)性。建昌馬的紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量母馬高于公馬，與朱輝清等［6］的報(bào)道結(jié)果類似，可能與建昌馬的血液生理生化組成特性有關(guān)。建昌馬紅細(xì)胞數(shù)量低于普通馬，但紅細(xì)胞平均血紅蛋白量高，導(dǎo)致血液中的血紅蛋白含量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度與普通馬的差異減小。該結(jié)果表明，高濃度的血紅蛋白仍可有效地運(yùn)送氧氣到組織中。建昌馬的血小板數(shù)量明顯低于普通馬，這是否提示其血液凝固特性有改變尚不清楚。至于淋巴細(xì)胞數(shù)量的差異，推測(cè)可能與馬的品種有關(guān)［2］。

血液生化指標(biāo)種類多，反映了機(jī)體在肝、肌肉等組織中的物質(zhì)和能量代謝狀況，并受品種、性別、年齡、訓(xùn)練狀態(tài)等多種因素影響［2，7-8］。因此，針對(duì)不同品種以及不同生態(tài)環(huán)境等，測(cè)定馬的血液生理生化值是十分必要的。建昌馬血液生化值存在性別差異，其中公馬血清中總膽紅素含量低于母馬，可能與其紅細(xì)胞數(shù)量少有直接關(guān)系。因?yàn)槟懠t素來自紅細(xì)胞降解［9］；而肌酐含量高于母馬，有助于其在肌肉中作為底物合成磷酸肌酸，作為能量?jī)?chǔ)備［9］，符合其性別特征。推測(cè)血液肌酐水平的差異或許與不同性別、不同年齡馬的運(yùn)動(dòng)多少有關(guān)。另外，建昌馬血液中尿素氮含量明顯高于普通馬、蒙古馬和英純血馬［10］，可能與品種差異有關(guān)，或許還與建昌馬血糖含量偏低有關(guān)［5］，這需要進(jìn)一步研究比較。不同性別建昌馬血液中Na+、K+和Cl-離子的含量相似，且Na+和Cl-離子的含量與普通馬接近（表3），也與Kiso馬與普通馬的結(jié)果十分接近［2］。提示Na+和Cl-兩種細(xì)胞外液的主要陽離子和陰離子的含量對(duì)機(jī)體的正常功能和穩(wěn)態(tài)十分重要。

總之，建昌馬是優(yōu)質(zhì)的西南馬品種，本研究通過對(duì)建昌馬血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定，為建昌馬的選育、開發(fā)利用和健康狀況監(jiān)測(cè)、疾病防治、臨床診斷等提供更全面、科學(xué)的依據(jù)，對(duì)建昌馬遺傳資源保護(hù)與利用有直接的參考價(jià)值［11］。