刁 歡,朱夢情
(安徽新華學院藥學院,安徽合肥 230088)
我國是一個農(nóng)業(yè)大國,尤其是近年來隨著科技的不斷進步,我國在農(nóng)作物再加工產(chǎn)量大幅提高的同時產(chǎn)生了大量下腳料資源,諸如酒糟、醋渣、餅粕等。這些資源并沒有得到充分利用和妥善處理,既造成了浪費又污染了環(huán)境。與此同時,蛋白質(zhì)飼料資源嚴重短缺,嚴重影響了我國養(yǎng)殖業(yè)和飼料工業(yè)的發(fā)展(梁海軍等,2014)。采用微生物固態(tài)發(fā)酵技術,以植物糟渣類原料生產(chǎn)發(fā)酵飼料,可以降低其纖維素含量、抗營養(yǎng)因子、提高蛋白質(zhì)含量,能夠增加其飼用消化率、吸收率、降低毒性,而且在發(fā)酵過程可產(chǎn)生出能夠增強動物免疫力、促進新陳代謝的物質(zhì),如抗生素、維生素、有機酸等(葉丙奎,2009)。發(fā)酵飼料具有適口性好、消化率高、可提高動物機體免疫力、無農(nóng)藥殘留等優(yōu)點,因此備受關注(劉華南等,2015)。
固態(tài)發(fā)酵是指一類使用不溶性固體基質(zhì)進行微生物發(fā)酵的過程,包括將固態(tài)懸浮在液體中的深層發(fā)酵和在沒有游離水的濕固體材料上進行微生物發(fā)酵(葛龍等,2010)。同液態(tài)發(fā)酵技術相比,固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基簡單、原料取材范圍廣;發(fā)酵過程中無菌要求較液態(tài)發(fā)酵低;水分活度低,基質(zhì)水不溶性高,微生物易生長,酶活力高,酶系豐富;設備結(jié)構(gòu)簡單、投資少、耗能低、易操作;后處理簡便,基本無廢水排放對環(huán)境污染較?。ǜ瘕埖?,2010)。
1.1 固態(tài)發(fā)酵設備工藝 目前,應用于固態(tài)發(fā)酵生物反應器種類繁多,大致包括轉(zhuǎn)鼓式發(fā)酵器、旋轉(zhuǎn)圓盤式發(fā)酵機、攪拌式發(fā)酵反應器、壓力脈沖固態(tài)發(fā)酵反應器、滾筒式固體發(fā)酵機等幾種不同形式的固態(tài)發(fā)酵設備(李浪等,2011)。在固態(tài)發(fā)酵反應過程中所選用的發(fā)酵設備主要有盤式、攪拌式和轉(zhuǎn)鼓式反應器。其中,盤式發(fā)酵機屬于靜態(tài)發(fā)酵設備,是最簡單、應用最普遍的一種固態(tài)發(fā)酵設備,使用時可通過增減托盤數(shù)來控制投料量,但體積大、散熱慢、操作費力;轉(zhuǎn)鼓式發(fā)酵器屬于動態(tài)發(fā)酵設備,可充分滿足通風和控溫調(diào)節(jié),但在生產(chǎn)過程中可能會出現(xiàn)基質(zhì)聚結(jié)成塊的現(xiàn)象,當轉(zhuǎn)動過快時還會對菌絲的生長造成不良影響;攪拌式發(fā)酵反應器的原理是利用機械攪拌,使空氣和基質(zhì)能夠充分混合,為微生物的生長繁殖、發(fā)酵提供充足的氧氣,其實用性能好、適應性強,有通用型發(fā)酵罐之稱,但機械攪拌產(chǎn)生的剪切力易對耐剪切力差的菌體造成損傷,影響菌體的生長和代謝(沈桂宇,2015)。
1.2 發(fā)酵過程控制參數(shù) 固態(tài)發(fā)酵與深層液態(tài)發(fā)酵不同,它的發(fā)酵過程更接近于自然狀態(tài),最顯著特征是發(fā)酵過程的不均勻性以及發(fā)酵基質(zhì)水分活度極低。發(fā)酵過程中,菌體的生長、物質(zhì)在固、液、氣三相之間的傳遞不均勻,使得在固態(tài)發(fā)酵反應過程中的參數(shù)檢測、控制都較為困難。目前,在固態(tài)發(fā)酵反應中可以檢測或調(diào)控的參數(shù)主要有:培養(yǎng)基的含水量、CO2的含量、pH、溫度和溶氧等(嚴勇,2010)。
2.1 發(fā)酵原料的應用 糟渣類產(chǎn)品主要包括在發(fā)酵工業(yè)中產(chǎn)生的酒糟、醋渣,同時也包括工業(yè)生產(chǎn)中產(chǎn)生的茶渣、馬鈴薯渣、餅粕副產(chǎn)物以及一些取出果肉后剩余的外皮,如柑桔皮、蘋果皮等。我國作為農(nóng)業(yè)大國,農(nóng)作物產(chǎn)量大且品種豐富,故經(jīng)加工后產(chǎn)生的糟渣類副產(chǎn)品同樣數(shù)量巨大、種類繁多。這類物質(zhì)不僅具有較高營養(yǎng)價值而且還含有豐富的膳食纖維,可作為飼料資源(謝普軍等,2014;Ibrahimet等,2012;Leiet等,2012)。 但是,此類產(chǎn)品也存在理化性質(zhì)差異大、含有毒素、水分和纖維素含量高等問題,直接用作飼料使用適口性差、消化率低,而且易發(fā)霉變質(zhì),不易貯存(劉策等,2013)。因此,應尋求適當?shù)姆椒▉硗貙捚淅猛緩?。張軒等?012)研究發(fā)現(xiàn),通過固態(tài)發(fā)酵對于降低糟渣類產(chǎn)品中纖維素類以及降低抗營養(yǎng)因子含量具有顯著效果。
2.1.1 酒糟 酒糟是指釀酒過程中產(chǎn)生的殘渣,常見的利用方式有鮮酒糟飼料、青貯酒糟飼料、烘干飼料、烘干脫殼飼料、生產(chǎn)粗酶制劑、用作飼料添加劑和發(fā)酵生產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料等。王曉力(2013)研究表明,利用酒糟為原料生產(chǎn)高蛋白飼料是提高酒糟綜合利用率的重要途徑之一。徐建等(2012)報道指出,酒糟具有豐富營養(yǎng)價值,富含蛋白質(zhì)、脂肪、鈣、磷等常見營養(yǎng)成分,還含有酵母及大量活性因子等。盡管酒糟的營養(yǎng)價值較高,但在釀酒過程加入了稻殼等疏松物質(zhì),導致酒糟中的粗纖維含量大,作為飼料直接飼喂動物可能會使動物出現(xiàn)便秘、流產(chǎn)等不適狀況;除此之外,未經(jīng)處理的酒糟中還含有大量酒精,長期飼喂會導致慢性酒精中毒(吳道義等,2012)。因此,通過固態(tài)發(fā)酵法對酒糟進行發(fā)酵,成為近年來酒糟利用研究的主要趨勢。利用酒糟作為發(fā)酵原料通過固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)飼料不僅變廢為寶、生產(chǎn)成本低,而且適口性好,具有良好發(fā)展前景。
喬家運等(2013)以40%的比例添加固態(tài)發(fā)酵后的白酒糟到麥麩中,混合后再以10%的比例添加到育肥豬日糧中,與對照組相比試驗組具有增重快、瘦肉率高、成本低等優(yōu)點;魏來(2015)研究表明,在動物體外消化條件下,經(jīng)固態(tài)發(fā)酵后的白酒糟干物質(zhì)消化率、蛋白質(zhì)消化率、粗纖維消化率分別都比鮮白酒糟至少提高11個百分點。
2.1.2 茶渣 鄭淑娟(2009)研究表明,全球多個國家有種植和消費茶葉的習慣。在我國,茶文化來源久遠,茶產(chǎn)業(yè)己經(jīng)成為我國重要的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟支柱產(chǎn)業(yè)之一(王志嵐等,2009)。我國茶葉資源豐富,茶葉深加工產(chǎn)業(yè)發(fā)展繁榮,諸如茶飲料廠、茶葉提取物生產(chǎn)廠以及速溶茶廠等,而在加工過程中會產(chǎn)生大量茶葉殘渣(傅志民等,2011)。這些茶渣若得不到合理利用,是資源的嚴重浪費,而且處理不當還會造成環(huán)境污染。據(jù)研究表明,茶渣中含有粗蛋白質(zhì)、粗纖維、茶多酚、咖啡堿等多種成分,茶渣中的幾種主要成分的含量見表1(單圣曄,2010)。
表1 茶渣中幾種主要成分的含量
李煜(2015)研究表明,茶渣中特有的營養(yǎng)成分,可用于動物生產(chǎn),且無毒副作用,還能有效調(diào)節(jié)動物機體生理功能,也符合環(huán)保需要。然而,不經(jīng)處理的茶渣中的粗纖維含量較高,直接作為飼料喂食動物不利于吸收。經(jīng)微生物發(fā)酵能提高飼料利用率,使動物育肥期提前,所以可通過固態(tài)發(fā)酵的方式來降低茶渣中纖維素類物質(zhì)含量、提高蛋白質(zhì)含量,以此提高其適口性和營養(yǎng)價值,使動物采食后更易消化、吸收。倪星虹(2011)研究表明,茶渣經(jīng)混菌發(fā)酵組蛋白質(zhì)含量比未經(jīng)過發(fā)酵組蛋白質(zhì)含量提高了60.78%。由此可見,利用微生物固態(tài)發(fā)酵法將茶渣制成發(fā)酵飼料,可以提高茶葉資源廢棄物利用率、豐富飼料資源、減少環(huán)境污染、提高經(jīng)濟效益。
2.1.3 柑桔皮渣 隨著人們對柑桔類果汁、罐頭等產(chǎn)品需求量的不斷增加,生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)生大量柑桔皮渣。統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明,柑桔即食與經(jīng)深加工所產(chǎn)生下腳料的柑桔皮重量約占柑桔總產(chǎn)量的五成。國外對桔皮渣的處理主要是通過利用提取設備對其香精油、a-1-8-萜二烯、黃酮類、果膠等物質(zhì)進行提取,并將剩余部分經(jīng)烘干粉碎作飼料添加劑或者加入工程菌通過發(fā)酵后生產(chǎn)工業(yè)用乙醇 (李群,2010)。但是,目前我國僅有將柑桔皮渣制成中藥陳皮生產(chǎn)工藝,絕大多數(shù)的柑桔皮渣被當成垃圾處理,不但污染環(huán)境而且還造成資源浪費,因此,應尋求新型柑桔皮渣的綜合利用途徑,從根本上解決這些問題。
柑桔皮渣中營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富,可直接粉碎成柑桔皮粉添加到畜禽日糧中作為營養(yǎng)性飼料添加劑使用,且因其含有揮發(fā)油、黃酮類等藥物成分,在飼料中可用作抗氧化劑。其中以黃烷酮的抗氧化作用為主,較傳統(tǒng)抗氧化劑如叔丁基對苯酚更加安全可靠;作為著色劑,柑桔中還富含黃色素,將柑桔皮粉添加到畜禽日糧中,可以改善畜禽產(chǎn)品的色澤;柑桔皮渣雖富含碳水化合物、脂肪、維生素等營養(yǎng)成分,但其味苦,直接喂食的適口性差,而且其中的蛋白質(zhì)含量較低,畜禽的消化吸收率不高,因此,通過微生物固態(tài)發(fā)酵將其制成發(fā)酵飼料,既能提高其中的蛋白質(zhì)含量,也能提高動物的消化率和吸收率 (郭育銘等,2009;殷鐘意等,2009)。王帥(2014)研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵柑橘皮渣可以提高仔豬生產(chǎn)性能,并能促進仔豬腸絨毛的生長發(fā)育,提高其消化吸收能力;程錦(2016)研究表明,經(jīng)黑曲霉和酵母菌混菌發(fā)酵后的柑桔皮渣中粗蛋白質(zhì)含量較發(fā)酵前提高了33.93%。
2.1.4 油茶籽粕 油茶是世界四大木本食用油源樹種之一(王建楓等,2015)。我國共有油茶林面積約302萬公頃,年消耗油茶籽量約106.55萬t,年產(chǎn)茶油量約26.25萬t;油茶籽粕是油茶籽經(jīng)榨油過后產(chǎn)生的下腳料,年產(chǎn)茶籽粕量約68.39萬t(王斌等,2011)。油茶籽粕中不但含有茶皂素和單寧等抗營養(yǎng)因子,而且味苦,故一般不直接作為飼料使用。然而,油茶籽粕營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富,是一種潛在的飼料資源,極具開發(fā)利用價值,油茶籽粕中幾種營養(yǎng)物質(zhì)的含量見表2(任仙娥等,2012)。
表2 油茶籽粕中幾種營養(yǎng)物質(zhì)的含量
衛(wèi)洋洋(2013)研究表明,經(jīng)脫毒后的油茶籽粕的營養(yǎng)價值可以與優(yōu)質(zhì)米糠相媲美,同時所含有的生物活性成分如茶多酚、茶籽多糖等對動物的消化吸收、免疫調(diào)節(jié)都具有一定的作用,并且經(jīng)發(fā)酵后的油茶籽粕用于飼喂奶牛能夠顯著改善奶牛的瘤胃內(nèi)環(huán)境,提高飼料消化吸收率,提高奶牛產(chǎn)奶量。周浩宇等(2010)通過混菌發(fā)酵發(fā)酵油茶籽粕使發(fā)酵后的油茶籽粕中茶皂素含量降低15.20%,粗纖維含量降低7.56%,粗蛋白質(zhì)含量提高8.65%。
2.2 菌種應用現(xiàn)狀 江成英等(2015)報道指出,發(fā)酵飼料能降低纖維素含量、提高蛋白質(zhì)含量,促進飼喂動物消化吸收,且發(fā)酵效率與菌種的選擇和發(fā)酵條件息息相關。葛若梅等(2010)研究表明,用于飼料發(fā)酵生產(chǎn)的微生物需具備以下特征:能充分吸收與利用基質(zhì)中碳源、氮源等能源物質(zhì);能夠快速生長繁殖,以縮短發(fā)酵周期;無毒性及致病性;菌種生產(chǎn)性能穩(wěn)定。目前,在固態(tài)發(fā)酵過程中多采用混菌進行發(fā)酵,這樣可以使不同微生物菌種間進行優(yōu)勢互補,更好的實現(xiàn)預期發(fā)酵目的、得到預期發(fā)酵產(chǎn)物。我國規(guī)定的可用于飼用微生物菌種大致有16種,其中包括11種乳酸菌、2種芽抱桿菌、2種酵母菌和1種光合細菌。目前,飼料工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)中用于發(fā)酵飼料的常用菌種主要有:放線菌、芽孢桿菌、酵母菌和霉菌(趙志偉等,2012),選用不同的發(fā)酵菌種會產(chǎn)生不同的發(fā)酵效果。近年來農(nóng)副產(chǎn)品采用的固態(tài)發(fā)酵菌種應用見表3。
表3 近幾年來農(nóng)副產(chǎn)品的固態(tài)發(fā)酵菌種應用舉例
由此可見,在制作植物性發(fā)酵飼料中常將黑曲霉、酵母菌用以生產(chǎn)蛋白飼料;將木霉和芽孢桿菌等用以降解纖維、改善適口性;將熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌、乳酸菌等用以降解抗營養(yǎng)因子以達到脫毒的目的,以此來實現(xiàn)或提高這些植物資源副產(chǎn)物的飼用價值。
養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速,飼料供給短缺,以大量的植物糟渣為原料,利用固態(tài)發(fā)酵技術生產(chǎn)發(fā)酵飼料,既能夠增加飼料的供給,又能充分利用資源,變廢為寶,降低環(huán)境污染,同時還能夠提高生產(chǎn)企業(yè)的經(jīng)濟效益。固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的飼料主要是蛋白質(zhì)飼料,添加到傳統(tǒng)飼料可補充蛋白資源。未來可以擴大發(fā)酵原料取材范圍的研究,如餐飲廢料、中草藥藥渣、芒果廢渣等;可以發(fā)酵出更多適合于水產(chǎn)類生物飼料,如魚、蝦等(Jian 等,2013)。 因此,固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)植物糟渣類飼料的發(fā)展空間大、發(fā)展?jié)摿ψ悖哂袕V闊開發(fā)途徑。