,,,,3,*,,,3,*,,

(1.南京農(nóng)業(yè)大學食品科技學院,江蘇南京 210095; 2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,江蘇南京 210014; 3.國家蔬菜加工技術研發(fā)分中心,江蘇南京 210014)

β-胡蘿卜素是一種廣泛存在于果蔬中的脂溶性營養(yǎng)成分[1],是具有VA活性最高的類胡蘿卜素,具有抗癌、抗氧化、預防心血管疾病、防止曬傷等生理功能[2]。β-胡蘿卜素只有被小腸吸收才能發(fā)揮其生物活性,研究發(fā)現(xiàn),食物基質(zhì)中的β-胡蘿卜素在人體中生物利用率較低[3],熱加工的橙色甘薯果肉中β-胡蘿卜素生物利用率僅有0.5%～1.1%[4],機械加工聯(lián)合油脂處理后南瓜中β-胡蘿卜素的生物利用率低于5%[5]。因此,提高β-胡蘿卜素生物利用率對VA缺乏人群具有重要意義。

影響類胡蘿卜素生物利用率的因素主要包括食物基質(zhì)環(huán)境、食品組分間相互作用、主體營養(yǎng)狀況、遺傳因素等[6]。目前,食品組分間相互作用的影響研究主要集中在脂類對β-胡蘿卜素生物利用率的影響[7-8]。食物基質(zhì)中的一些微量物質(zhì),如蔗糖酯、植物固醇類、膳食纖維等已證明可能會影響類胡蘿卜素的生物利用率[9]。此外,不同種類類胡蘿卜素在消化吸收過程中可能發(fā)生競爭性抑制,從而影響其生物利用率[10]。類黃酮是植物來源膳食中重要的微量營養(yǎng)成分[11],以每L柑橘汁為例,其含有橙皮苷約300～700 mg,而類胡蘿卜素量約10～30 mg[12],在日常膳食中類黃酮不可避免地會與類胡蘿卜素相互作用。近年來研究發(fā)現(xiàn),類黃酮會影響類胡蘿卜素吸收和生物利用率。Reboul等[13]發(fā)現(xiàn),柚皮素顯著降低葉黃素的腸道吸收,而槲皮素可以增加β-胡蘿卜素在肝臟中的含量[14]。Marie 等[10]研究發(fā)現(xiàn)，葡萄汁中的柚皮苷降低橙色甘薯中β-胡蘿卜素的生物利用率,但對β-胡蘿卜素的腸道吸收沒有顯著影響。然而 Claudie等[15]研究發(fā)現(xiàn),柑橘果汁中的類黃酮顯著促進β-胡蘿卜素的腸道吸收。以上研究主要集中在類黃酮對類胡蘿卜素吸收影響的宏觀調(diào)控層次上,兩者的相互作用機制尚不明確。

類胡蘿卜素的脂溶性特性使其需要被轉(zhuǎn)化成水溶性的混合膠束才能通過水相,然后隨膠束一起轉(zhuǎn)移到小腸上皮細胞被吸收利用,因此類胡蘿卜素的膠束化特性直接決定其生物利用率[16]。本研究選擇柑橘屬類黃酮中四種常見的黃烷酮,即橙皮素、柚皮素及其對應糖苷橙皮苷、柚皮苷,基于體外模擬研究4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化的影響及調(diào)控機理,可以為其他植物源的類黃酮體外評價作出初步的判斷,亦可為進一步研究β-胡蘿卜素的高效利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

全反式β-胡蘿卜素、來源于柑橘中的橙皮素、柚皮素、柚皮苷、芘 美國Sigma公司;來源于柑橘中的橙皮苷 Santa Cruz Biotechnology;胃蛋白酶(酶活力:3000 U/mg)、胰酶(酶活力:250 U/mg) 南京奧多福尼生物科技有限公司;膽鹽 北京奧博星生物技術有限責任公司;正己烷、丙酮、無水乙醇、三氯甲烷(均為國產(chǎn)分析純) 國藥集團化學試劑有限公司;甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)、甲醇(均為色譜純) 美國Javascript公司;卵磷脂、油酸甘油酯 山東西亞化學股份有限公司;人結(jié)腸腺癌細胞株(Caco-2) 中國科學院上海細胞庫;高糖DMEM培養(yǎng)液、青-鏈霉素雙抗液、胎牛血清、0.25%胰酶-EDTA、磷酸鹽緩沖液(PBS) 賽默飛世爾生物化學制品有限公司;BCA蛋白濃度測定試劑盒 上海碧云天生物公司;細胞培養(yǎng)瓶T25、6孔transwell細胞培養(yǎng)板 美國康寧公司。

HZQ-F100全溫度振蕩培養(yǎng)箱 太倉市華美生化儀器廠;TG16-WS臺式高速離心機 湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司;FE20實驗室pH計 梅特勒-托利多儀器上海有限公司;BS224S電子分析天平 北京賽多利斯科學儀器公司;RE52CS旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、D10氮氣吹掃儀 杭州奧盛儀器有限公司;1200高效液相色譜儀 美國安捷倫科技有限公司;DW-86L828型超低溫冰箱 青島海爾股份有限公司;Cary Eclipse分子熒光光譜儀 美國瓦里安公司;MZS90納米粒度測定儀 英國馬爾文儀器有限公司;XD-202倒置顯微鏡 南京江南永新光學有限公司;BHC-1300IIA/B2型生物潔凈安全柜 蘇州凈化設備有限公司;TDL-80-2C低速臺式離心機 上海安亭科學儀器廠;ERS-2上皮跨膜細胞電阻儀 美國密理博公司。

1.2 實驗方法

1.2.1β-胡蘿卜素膠束溶液的制備 參考文獻[10]并作出調(diào)整。取適當體積的β-胡蘿卜素儲備液制成5 μmol/L的工作液(人體正常生理狀態(tài)下β-胡蘿卜素濃度約為5 μmol/L,溶劑為三氯甲烷∶甲醇=2∶1),4種黃烷酮(甲醇)的工作液濃度分別為25 μmol/L[17],在氮氣下吹干大部分有機溶劑,殘余溶劑于真空條件下室溫干燥24 h過夜除去,加入5 mL膽鹽溶液,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中150 r/min 振蕩5 h,5000×g離心10 min得到上清液,上清液過0.22 μm有機濾膜過濾制成膠束。

1.2.2 膽鹽、脂類存在下柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響 按1.2.1方法制備β-胡蘿卜素膠束。膠束中膽鹽濃度分別選擇5、10、15 mmol/L,研究膽鹽存在下柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響。在膽鹽濃度為15 mmol/L膠束中添加油酸甘油酯或卵磷脂,研究脂類存在下柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響。β-胡蘿卜素膠束化率的測定參考1.2.4。

1.2.3 黃烷酮在不同濃度膽鹽溶液中的溶解度 分別稱取一定量的4種黃烷酮純品,加入5 mL 膽鹽溶液,使之最后形成飽和溶液。膽鹽濃度梯度:5、10、15、30 mmol/L,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中150 r/min 振蕩5 h,于5000×g離心10 min得到上清液,上清液過0.22 μm有機濾膜得到黃烷酮-膽鹽溶液。提取黃烷酮方法參考文獻[18],提取后待HPLC分析。

式中:c1為溶液中黃烷酮的摩爾濃度(μmol/L);c0為初始加入黃烷酮的摩爾濃度(μmol/L);v1為溶液體積(mL);v0為初始加入黃烷酮的體積(mL)。

黃烷酮液相色譜條件[19]:色譜柱:Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫30 ℃;進樣體積 10 μL;流速 1.0 mL/min;檢測波長為 287 nm。以乙腈-0.1%甲酸水溶液為流動相。

1.2.4β-胡蘿卜素膠束化率的測定

1.2.4.1β-胡蘿卜素標準曲線的制作 準確稱量10 mgβ-胡蘿卜素溶解定容至10 mL,取適量體積儲備液稀釋制成0.5、1、2、4、8、10、20 μg/mL的標準液,待HPLC分析,以對應的峰面積為縱坐標,制成標準曲線。

1.2.4.2β-胡蘿卜素的萃取 避光條件下,在膠束中加入等體積萃取劑(正己烷∶乙醇∶丙酮=2∶1∶1,V/V/V),輕微振蕩,靜置分層;反復萃取至下層無色,合并萃取液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),氮氣吹干,用正己烷溶解,待HPLC分析。

1.2.4.3 HPLC條件 色譜柱為YMC-C30(4.6 mm×250 mm,5 μm)色譜柱;柱溫:25 ℃;檢測器DAD,波長450 nm,流動相:A:V(水∶MTBE∶甲醇)=5∶2 5∶70;B:V(水∶MTBE∶甲醇)=5∶85∶10;進樣量 20 μL;線性梯度洗脫,流速為0.6 mL/min,梯度洗脫程序:0～4.5 min 95%～80% A;4.5～12.5 min 80%～50% A;12.5～18 min 50%～25% A;18～24 min 25%～5% A;24～30 min 5% A;30～35 min 5%～95% A。

1.2.4.4β-胡蘿卜素膠束化率的計算

式中:ρ1為膠束中β-胡蘿卜素的質(zhì)量濃度(μg/mL);ρ2為初始加入β-胡蘿卜素濃度(μmol/L);V1為膠束體積(mL);V2為β-胡蘿卜素工作液體積(mL)。

1.2.5 膠束溶液物化性質(zhì)的測定

1.2.5.1 膠束溶液極性的測定 參考文獻[20],取制備的膠束溶液,加入適量芘溶液(無水乙醇),芘最終濃度為8×10-7mol/L,充分振蕩均勻,靜置3 h 后進行熒光掃描,記錄芘的發(fā)射光譜中第1、3個峰的熒光強度:I1和I3值。熒光光譜測定條件:熒光激發(fā)波長 334 nm,激發(fā)狹縫寬度為5 nm,發(fā)射狹縫寬度為1 nm,發(fā)射波長范圍為350～450 nm,測定在室溫下進行。

1.2.5.2 膠束溶液粒徑、電位的測定 取制備的膠束溶液,利用納米粒度測定儀室溫條件下進行粒徑分布測定,結(jié)果以平均粒徑(nm)表示,同時進行ζ-電位測定。

1.2.6β-胡蘿卜素生物可利用率的測定 該方法參考文獻[16,21],并作出調(diào)整。胃消化法:加入10 mL胃液(50 mmol/L NaCl、3.60 mmol/L MgCl2·6H2O、10 mmol/L CaCl2·2H2O、3.50 mmol/L KH2PO4、14 mmol/L KCl),用1 mol/L HCl調(diào)節(jié)pH至2.0,加入2 mL胃蛋白酶液(50.25 mg/mL,胃蛋白酶溶于0.1 mol/L HCl)保鮮膜封口放入搖床,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中120 r/min消化1 h。

腸消化法:取出錐形瓶,用1 mol/L NaHCO3調(diào)節(jié)pH至6.90±0.01,加入9 mL膽鹽-胰酶液(膽鹽終濃度為15 mmol/L(見2.1.1)、胰酶終濃度2.4 mg/mL;膽鹽、胰酶溶于0.1 mol/L NaHCO3),封口放入搖床,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中120 r/min消化2 h。

上述消化過程結(jié)束后于5 000×g離心10 min得到上清液,上清液過0.22 μm有機濾膜得到膠束,用于分析β-胡蘿卜素生物可利用率。

式中:c1為上清液過濾后膠束中β-胡蘿卜素的質(zhì)量濃度(μg/mL);c2為初始加入β-胡蘿卜素濃度(μmol/L);V1為上清液過濾后膠束體積(mL);V2為β-胡蘿卜素工作液體積(mL。)

1.2.7β-胡蘿卜素體外吸收率的測定 Caco-2細胞培養(yǎng)在含10%胎牛血清、1%青-鏈霉素雙抗液的高糖DMEM完全培養(yǎng)基中,置于5% CO2濃度,37 ℃恒溫培養(yǎng)箱條件下生長。用含0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化成單個細胞懸液后以2×105個/mL接種transwell的聚碳酸酯膜上,培養(yǎng)21 d使用[15]。通過測量各孔跨膜電阻來檢測細胞單層膜的完整性,當teer值>500 Ω·cm2可用于β-胡蘿卜素吸收實驗。實驗前,細胞單層膜先用PBS清洗兩遍,向頂側(cè)加入1 mL體外消化后形成的混合膠束,底側(cè)加入2 mL 無血清培養(yǎng)基,于5% CO2濃度,37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)時間結(jié)束,收集兩側(cè)培養(yǎng)液。β-胡蘿卜素的吸收量為底側(cè)和刮取的細胞總量。細胞吸收以每毫克蛋白中皮摩爾(pmol/mg prot)β-胡蘿卜素量表達,采用BCA試劑盒法檢測蛋白濃度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有實驗重復3次。用SPSS 17.0數(shù)據(jù)分析軟件,對實驗結(jié)果進行單因素試驗統(tǒng)計分析及組間差異的Duncan’s多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 膽鹽存在下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響

2.1.1 不同膽鹽濃度下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響 膽鹽是影響類胡蘿卜素膠束化率的主要因素之一。人體在禁食、進食狀態(tài)下由膽汁分泌的膽鹽濃度分別為4～6、10～15 mmol/L[22-23]。本實驗研究4種柑橘黃烷酮在膽鹽濃度為5、10、15 mmol/L條件下對β-胡蘿卜素膠束化率的影響,研究結(jié)果如圖1所示。β-胡蘿卜素的膠束化率隨膽鹽濃度升高而增加,由β-胡蘿卜素標準曲線方程式:y=410.68x-409.34(R2=0.9996)計算,當膽鹽濃度達到15 mmol/L 時,β-胡蘿卜素的膠束化率為16.23%,分別是膽鹽濃度為5、10 mmol/L的2.50、1.70倍,這是因為，膽鹽的乳化特性加快溶解了處于顆粒內(nèi)及界面的β-胡蘿卜素,從而提高其膠束化率[24]。當膽鹽濃度為5、10 mmol/L時,4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率無顯著影響(p>0.05)。當膽鹽濃度達到15 mmol/L 時,膠束中4種柑橘黃烷酮的加入使β-胡蘿卜素膠束化率顯著升高(p<0.05),其中橙皮素、橙皮苷、柚皮素加入后β-胡蘿卜素膠束化率比單一β-胡蘿卜素膠束化率分別顯著提高了25.00%、48.55%、18.97%(p<0.05),而柚皮苷對β-胡蘿卜素的膠束化率促進作用不顯著(p>0.05)。

圖1 不同膽鹽濃度下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響Fig.1 Effect of 4 citrus flavanones on the micellization rate of β-carotene under different bile salts concentrations注:不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05);bc:β-胡蘿卜素;Hes:橙皮素;Hes-G:橙皮苷;Nar:柚皮素;Nar-G:柚皮苷;圖3～圖4同。

2.1.2 不同膽鹽濃度下4種柑橘黃烷酮的溶解度 4種柑橘黃烷酮在不同濃度膽鹽溶液中溶解度的研究結(jié)果如圖2所示。結(jié)果表明,橙皮素、橙皮苷、柚皮素在不同濃度膽鹽溶液中的溶解度變化不明顯,而柚皮苷的溶解度與膽鹽濃度呈線性關系(R2=0.9935),在膽鹽濃度5 mmol/L時,膠束中的柚皮苷的溶解度為56.42%,15 mmol/L時達到68.45%,30 mmol/L時達到75.56%。對比圖1的研究結(jié)果表明,柚皮苷溶解到膠束中可能競爭性地消耗了膽鹽,從而抑制了β-胡蘿卜素的膠束化率。這與Marie等的研究觀點一致[10]。同時發(fā)現(xiàn),橙皮苷在膽鹽膠束中幾乎不溶,而圖1研究發(fā)現(xiàn)，橙皮苷對β-胡蘿卜素膠束化率促進作用最顯著(p<0.05),這表明，橙皮苷的加入可能改變了β-胡蘿卜素膽鹽膠束的理化性質(zhì),從而促進了β-胡蘿卜素膠束化率。

圖2 不同膽鹽濃度溶液中4種柑橘黃烷酮的溶解度Fig.2 Solubilization of 4 citrus flavanones in different bile salt concentration solutions

2.2 脂類存在下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響

類胡蘿卜素在被人體吸收前,其混合膠束的形成取決于腸內(nèi)脂類的含量和性質(zhì)。不同研究得出的類胡蘿卜素生物利用率差別很大,很有可能是模擬消化過程中所用脂類的種類和含量不同引起的[9]。

本實驗根據(jù)人體正常生理狀態(tài)下的情況,選擇油酸甘油酯(1.5 mmol/L)和卵磷脂(3 mmol/L),研究添加不同脂類條件下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響,研究結(jié)果如圖3所示。在膽鹽濃度選用15 mmol/L時,在β-胡蘿卜素對照組加入卵磷脂比不加卵磷脂(圖1)增加了β-胡蘿卜素的膠束化率,此時β-胡蘿卜素的膠束化率達到20.18%,比不加卵磷脂增加了24%。在添加卵磷脂條件下,4種柑橘黃烷酮均促進了β-胡蘿卜素膠束化,其中橙皮苷促進作用顯著(p<0.05),β-胡蘿卜素膠束化率可達25.17%,與單一β-胡蘿卜素膠束相比,增加了25%。當膠束相中添加油酸甘油酯時,β-胡蘿卜素對照組的膠束化率僅為9.23%,但4種柑橘黃烷酮均促進β-胡蘿卜素膠束化率,其中橙皮苷、柚皮素、柚皮苷顯著促進其膠束化率(p<0.05)。類胡蘿卜素生物利用度與膠束溶解能力及膠束膨脹能力有關,高濃度膽鹽的作用是增加膠束的溶解性,而脂類的作用是影響膠束的膨脹能力。本實驗中添加的油酸甘油酯可能在水解過程中僅引起較小的程度的膠束溶脹,從而導致β-胡蘿卜素膠束化率增加不明顯。

圖3 脂類存在下4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束化率的影響Fig.3 Effect of 4 citrus flavanones on the micellization rate of β-carotene in the presence of lipids

2.3 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束物化性質(zhì)的影響

膠束的物化性質(zhì)包括溶液極性(反應親/疏水性)、粒徑(反應顆粒大小)、電位(ζ-電位、反應粒子表面的電荷)等。本實驗探究了4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束溶液物化性質(zhì)的影響,結(jié)果如表1所示。芘是熒光探針中最常用的一種,根據(jù)芘的發(fā)射光譜中第1、3個發(fā)射峰的強度之比 I1/I3 的相對變化可以判斷環(huán)境極性的變化,極性越大則比值越大,反之則比值越小[25]。研究發(fā)現(xiàn),與單一β-胡蘿卜素膠束溶液相比,膠束體系中加入柑橘黃烷酮后溶液的I1/I3比值均增大,即4種黃烷酮顯著增加了膠束溶液的極性(p<0.05),其中橙皮苷加入的β-胡蘿卜素膠束溶液I1/I3比值最大,表明橙皮苷最顯著增加了β-胡蘿卜素膠束溶液的極性(p<0.05),而且4種柑橘黃烷酮的加入均使β-胡蘿卜素膠束溶液的粒徑減小,橙皮素沒有顯著降低膠束粒徑(p>0.05),而橙皮苷、柚皮素、柚皮苷顯著降低膠束粒子的直徑(p<0.05)。這可能是因為，柑橘黃烷酮吸附于油水表面,使β-胡蘿卜素脂滴之間產(chǎn)生排斥力,這就避免了β-胡蘿卜素脂滴的聚集,從而使膠束粒徑減小[26]。此外,4種柑橘黃烷酮的加入均使β-胡蘿卜素膠束溶液ζ-電位的絕對值顯著增大(p<0.05)。ζ-電位的絕對值較高,表明液滴表面的同種電荷含量較高,彼此間的靜電斥力保證溶液在儲存期間發(fā)生液滴擾動,因此穩(wěn)定性較強[27],表明4種柑橘黃烷酮的加入提高了β-胡蘿卜素膠束溶液的穩(wěn)定性[28]。

表1 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素膠束物化性質(zhì)的影響Table 1 Effect of 4 citrus flavanones on β-carotene micellar properties

2.4 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素生物可利用率的影響

本實驗通過體外消化法研究4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素生物可利用率的影響,結(jié)果如圖4顯示。4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素的生物可利用率均起促進作用,其中橙皮苷顯著促進β-胡蘿卜素的生物可利用率(p<0.05),達11.39%,對β-胡蘿卜素的生物可利用率提高了42%。本研究在膠束體系中加入的黃烷酮,可能競爭了β-胡蘿卜素在膠束的核心區(qū)域,但4種柑橘黃烷酮的加入使得β-胡蘿卜素膠束溶液極性增大,粒子極性越大,越有利于進入消化液體系[29],從而提高了β-胡蘿卜素的生物可利用率。此外,4種柑橘黃烷酮的加入使得體系中顆粒直徑減小,從而導致顆粒表面積增大,顆粒表面積越大,越有利于胰脂肪酶的結(jié)合,從而有利于脂酶高效水解脂類,促進β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)移進水相,提高生物可利用率[30]。

圖4 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素的生物可利用率的影響Fig.4 Effect of 4 citrus flavanones on the bioaccessibility of β-carotene

2.5 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素體外腸道吸收的影響

將消化過程形成的膠束加入到分化的Caco-2細胞單層膜,研究4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素腸道吸收的影響,研究結(jié)果如表2所示。4種柑橘黃烷酮均促進了β-胡蘿卜素的細胞吸收。對照組β-胡蘿卜素的細胞吸收為1420.00 pmol/mg prot,加入橙皮苷的膠束中β-胡蘿卜素細胞吸收為2629.27 pmol/mg prot,比對照組顯著提高了85%(p<0.05),而橙皮素顯著提高了16%(p<0.05),柚皮苷對β-胡蘿卜素的細胞吸收促進作用不顯著(p>0.05)。這可能由于橙皮苷的糖苷基(7號位蕓香糖苷),使橙皮苷結(jié)合于脂質(zhì)膜的極性頭部區(qū)域[31],橙皮苷強的膜親和力改變了膜雙分子層的屏障功能,促進β-胡蘿卜素的細胞吸收,此外柑橘黃烷酮的加入使β-胡蘿卜素膠束粒徑變小,粒徑越小,越有利于顆粒的乳化[32]、包裹及吸收[21,33],使β-胡蘿卜素膠束更容易被細胞吸收。而柚皮苷由于包埋到膠束中,抑制了脂肪酸的水解及β-胡蘿卜素從膠束中向外轉(zhuǎn)移,所以對β-胡蘿卜素細胞吸收促進作用不顯著。

表2 4種柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素腸道吸收的影響Table 2 Effect of 4 citrus flavanones on the cellular uptake of β-carotene

3 結(jié)論

在模擬人體生理狀態(tài)下,隨膽鹽濃度升高,4種柑橘黃烷酮顯著增加β-胡蘿卜素的膠束化(p<0.05);其中橙皮苷對β-胡蘿卜素膠束化的促進作用顯著(p<0.05),橙皮素、柚皮素次之,柚皮苷作用不顯著(p>0.05)。4種柑橘黃烷酮通過增加膠束溶液的極性、降低顆粒直徑、調(diào)節(jié)膠束表面的電荷促進了β-胡蘿卜素生物可利用率,進而促進β-胡蘿卜素腸道吸收,其中橙皮苷顯著促進β-胡蘿卜素生物可利用率(p<0.05),相比于對照組提高了42%,并且顯著促進腸道吸收(p<0.05)。由此可見,膳食中類黃酮的攝入一定程度上會促進β-胡蘿卜素生物利用率。柑橘黃烷酮對β-胡蘿卜素生物利用率及細胞吸收的影響受多種因素控制,因此具體的調(diào)控機制還需要進一步研究。