薛 晶
(大連市旅順口區(qū)人民醫(yī)院藥劑科,遼寧 大連 116041)
天麻是一種名貴中藥材,是蘭科植物天麻的塊莖,通常在春、冬兩季成熟[1],擁有良好祛風(fēng)通絡(luò)功效,治療四肢麻木、頭暈頭痛效果顯著,在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中多用于預(yù)防及治療高血壓、癲癇等疾病[2]。天麻中含有較多GA,同時還存在大量PA、PB 等含酸乙酯鍵的化合物,本次研究主要分析天麻在清蒸過程中GA、PA、CA等7種主要成分的變化規(guī)律,為天麻飲片規(guī)范化制作提供依據(jù)。
1.1 材料:天麻藥材均由我省規(guī)范天麻種植基地提供,所有天麻產(chǎn)自同一時期,每個天麻重量均>130 g,并統(tǒng)一由我院鑒定,確為蘭科植物天麻塊莖。
1.2 方法
1.2.1 色譜條件。流動相:甲醇(A)-0.04%磷酸溶液(B)(1∶9);梯度洗脫:0~4 min,3%A,4~15 min,3%~25%A,15~25 min,25%~45%A;檢測波長:210 nm;柱溫:28 ℃;體積流速:1 mL/min;進(jìn)樣量:10 μL;色譜柱:Phenomenex C18(240 mm×4.5 mm,5 μm)。
1.2.2 醇溶性浸出物測定:首先取天麻原藥材3000 g,將其洗凈,切塊,并平均分為分成5份,500克/份,將每份天麻樣品分別放置在專業(yè)蒸爐中進(jìn)行清蒸處理,5份蒸制時間分別為20、40、50、60、70、80 min,隨后取出天麻,切片,并經(jīng)50 ℃烘干,得到6份不同時間天麻樣品粉末。
以乙醇作為溶劑,制作供試品溶液,通過精密稱定,取天麻蒸制粉末2 g(過3號篩),將其置于消毒后的錐形瓶(100 mL)中,隨后加入50 mL乙醇溶液,密封錐形瓶口,稱定錐形瓶整體重量,并將其靜置沉淀60 s,隨后接回流管,進(jìn)行加熱處理,當(dāng)溶液沸騰后,繼續(xù)加熱60 s,關(guān)火。待溶液冷卻后,再對進(jìn)行稱重處理,并加入少量稀乙醇補(bǔ)充損失的重量,在搖勻溶液后,并利用干燥濾器取續(xù)濾液。
1.3 觀察指標(biāo):觀察清蒸不同時間,天麻成分的含量變化。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:研究數(shù)據(jù)納入SPSS17.0軟件分析,計(jì)數(shù)資料用(%)表示,χ2檢驗(yàn),P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
生天麻中含GA:0.139%,PA:2.468%,PB:0.129%,PC:0.541%,PE:0.342%,CA:1.092%,HA:0.101%。
對天麻清蒸20 min時,GA含量:0.181%,PA:2.311%,PB:0.159%,PC:0.539%,PE:0.399%,CA:0.112%,HA:0.098%。
對天麻清蒸40 min,GA:0.328%,PA:1.561%,PB:0.331%,PC:0.534%,PE:0.151%,CA:2.164%,HA:0.105%。
對天麻清蒸50 min,GA:0.462%,PA:0.821%,PB:0.334%,PC:0.540%,PE:0.124%,CA:3.795%,HA:0.101%。
對天麻清蒸60 min,GA:0.505%,PA:0.452%,PB:0.451%,PC:0.541%,PE:0.091%,CA:4.290%,HA:0.097%。
對天麻清蒸70 min,GA:0.533%,PA:0.450%,PB:0.471%,PC:0.543%,PE:0.084%,CA:0.455%,HA:0.104%。
對天麻清蒸80 min,GA:0.536%,PA:0.447%,PB:0.481%,PC:0.539%,PE:0.080%,CA:0.461%,HA:0.099%。
天麻素是天麻中的標(biāo)志產(chǎn)物,含量較高,同時還含有PA、PB、CA等聚合成分,天麻作為名貴中藥材,在醫(yī)藥治療中有著重要作用[3]?,F(xiàn)階段,市面上出現(xiàn)了將生天麻洗凈、切片、烘干后直接飲食的生飲片,該方法與而“清蒸”是天麻傳統(tǒng)炮制加工方式有著極大區(qū)別,根據(jù)“生熟異制”理論[4],本次也正對天麻蒸制中,成分變化進(jìn)行了深入研究。
本次研究以天麻中含有的GA、CA、PA等7種成分為檢測指標(biāo),對其進(jìn)行聚類分析,根據(jù)不蒸制不同時間,天麻成分的變化,最終將其聚為3類。①初期階段:生天麻及蒸制<20 min。蒸制時間較短,各類成分未出現(xiàn)明顯變化;②中期階段:蒸制20~50 min,PA、PE含量降低,GA、CA、PB含量提升;③末期階段:蒸制60~80 min,7種成分趨于穩(wěn)定,并未出現(xiàn)相助變化。因此,在對天麻進(jìn)行清蒸時,蒸制時間控制在50~60 min最宜。其中,PA水解程度最高,其次為PB,二者皆可水解轉(zhuǎn)化為PE、GA及CA,而HA及PC結(jié)構(gòu)相對比較穩(wěn)定,總體含量變化不大。綜上所述,通過分析天麻清蒸過程中成分變化,為天麻飲片中的標(biāo)志物研究奠定了基礎(chǔ),同時為天麻飲片的規(guī)范制作提供了參考依據(jù)。