楊 光,雷海霞,喬 利*
(1.信陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,河南 信陽(yáng) 464000;2.信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院)
稻瘟病(Magnaporthe grisea)是全世界危害較為嚴(yán)重、波及范圍較廣的水稻病害,俗稱“水稻癌癥”。稻瘟病在我國(guó)各水稻產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生,主要為葉瘟和穗頸瘟,可致水稻減產(chǎn)10%~20%,嚴(yán)重時(shí)減產(chǎn)40%~60%, 甚至顆粒無(wú)收。施用化學(xué)農(nóng)藥是防治稻瘟病較為直接、有效的手段,但隨著農(nóng)藥品種和施用量不斷增加,農(nóng)藥殘留問(wèn)題日益突出,嚴(yán)重影響了人們的身體健康。采用抗稻瘟病的水稻品種控制稻瘟病的發(fā)生和危害是經(jīng)濟(jì)且可持續(xù)的防治措施,不但可以減少化學(xué)農(nóng)藥的使用,減少稻米中農(nóng)藥殘留量, 提升稻米的食用品質(zhì),同時(shí)也解決了因抗藥性導(dǎo)致病害防治效果下降的問(wèn)題。
河南省信陽(yáng)市位于中國(guó)南北地區(qū)過(guò)渡帶,水稻種植面積30萬(wàn)hm2以上,在全省水稻生產(chǎn)中具有舉足輕重的作用,有效防治稻瘟病是信陽(yáng)市植保工作的重中之重。通過(guò)室內(nèi)培養(yǎng)稻瘟病孢子液噴施幼苗、注射待抽穗水稻植株,篩選抗稻瘟的水稻品種,對(duì)稻瘟病的防治具有重要意義。
供試品種:原豐早、9優(yōu)418、信香糯1號(hào)、荃銀。
2018年在信陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院湖東試驗(yàn)基地選取水稻品種特糯2072上的穗頸瘟病原菌,保濕培養(yǎng)后分離純化,接種到試管中待用。
配方:100 g健康稻稈、40 g玉米粉、15 g瓊脂粉,定容至1 L,調(diào)節(jié)pH值7左右。制作方法:把稻稈剪成10 cm左右,放入鍋中煮沸30~40 min,將煮好的稻稈水用紗布充分過(guò)濾后待用。把玉米粉和瓊脂粉加入稻稈水中,邊倒邊攪拌,待充分沸騰溶解后倒入錐形瓶,封口滅菌后待用。
將試管中的菌株用接種針取下放入倒好的PDA平板中,放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中5~7 d。用1 cm打孔器取平板菌株放入稻稈玉米粉產(chǎn)孢培養(yǎng)基中,置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中,光暗交替培養(yǎng)8 d。待菌絲基本全覆蓋住培養(yǎng)皿后,置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中連續(xù)光照培養(yǎng)48 h后待用。在培養(yǎng)皿中倒入少量無(wú)菌水,有軟毛刷輕輕地把平板表面菌絲刷下、融入水中,刷兩遍后倒入三角瓶,把刷過(guò)的平板用封口膠封好置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。刷下的孢子液進(jìn)行鏡檢,在一個(gè)視野中大概有30~50個(gè)孢子,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算孢子量,調(diào)節(jié)孢子懸浮液濃度,使最終濃度為3×105~4×105個(gè)/mL。
接種時(shí)期為水稻倒2葉前后至抽穗前,采用注射接種法接種。用醫(yī)用注射器吸取孢子液,在倒3葉葉腋下2~3 cm處注射1 mL。每個(gè)品種接種30穗。2018年7月31日接種后掛牌標(biāo)記。
病級(jí)記錄采用全國(guó)統(tǒng)一方法及標(biāo)準(zhǔn),在黃熟期觀察記載穗頸瘟的發(fā)生情況,只要有頸瘟和粒瘟發(fā)生就定為感?。⊿),全部未發(fā)病就定為抗?。≧)。感病株超過(guò)25%就定為感性品種,低于或等于25%就定為抗感分離品種,全部未發(fā)病就定為抗性品種。
由表1可以看出,原豐早和荃銀為感性品種,接種稻穗幾乎全部發(fā)病,荃銀發(fā)病情況更為嚴(yán)重。9優(yōu)418和信香糯1號(hào)發(fā)病的植株較少,感病率低于或等于25%,為抗感分離品種。
表1 稻瘟病病級(jí)記錄結(jié)果
9優(yōu)418、信香糯1號(hào)對(duì)稻瘟病有一定的抗病性,原豐早和荃銀對(duì)稻瘟病基本沒有抗病性。