新城疫(Newcastle disease,ND)是由ND 病毒(NDV)引起的一種禽類急性、高度傳染性疾病,疫苗免疫是預(yù)防該病的主要手段。我國應(yīng)用最廣泛的疫苗株是基因II 型的La Sota 株,而我國家禽中目前流行的強(qiáng)毒株屬于基因VII 型。傳統(tǒng)疫苗毒株雖然能夠?qū)α餍卸局晏峁┡R床保護(hù),但是不能有效的阻止病毒在體內(nèi)的復(fù)制和排毒。另外,傳統(tǒng)的弱毒活疫苗在使用時能夠誘導(dǎo)粘膜和體液免疫,但其誘導(dǎo)的免疫力會受到母源抗體的干擾。而滅活疫苗能誘導(dǎo)產(chǎn)生較高水平的抗體,但不能刺激機(jī)體產(chǎn)生有效的黏膜和細(xì)胞免疫。目前,養(yǎng)禽業(yè)對開發(fā)安全有效的針對流行基因VII 型的新型NDV 疫苗的需求非常迫切。
雞傳染性喉氣管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是由ILT 病毒(ILTV)引起的嚴(yán)重威脅養(yǎng)雞業(yè)的重要呼吸道傳染病之一,弱毒活疫苗被廣泛應(yīng)用于該病的預(yù)防,但該類型疫苗存在潛伏感染以及可能發(fā)生毒力返強(qiáng)的潛在危險。通過基因工程操作缺失毒力相關(guān)基因的致弱毒株是研制ILTV 疫苗的新方向。此外,ILTV 能夠有效的在呼吸道增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞免疫,基因缺失的ILTV 可以作為載體表達(dá)其他呼吸道病原體的保護(hù)性抗原從而作為二聯(lián)活疫苗。
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所禽呼吸道病創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)近期發(fā)表于《Vaccine》 的一項(xiàng)研究工作報道了一種能夠?qū)ξ覈餍蠳DV 和ILTV 提供有效保護(hù)的新型疫苗。該團(tuán)隊(duì)研究人員在針對我國雞群的禽呼吸道病流行病學(xué)調(diào)查中分離鑒定了一株ILTV,致病性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該毒病株為弱毒株,并且能夠?qū)LTV 強(qiáng)毒株的攻擊提供完全保護(hù),表明該病毒株有作為ILTV 的疫苗株的潛力。為進(jìn)一步探索該病毒株是否可作為病毒載體表達(dá)其他病原體的保護(hù)性抗原作為活載體疫苗,該團(tuán)隊(duì)通過基因工程技術(shù)缺失了其復(fù)制非必須基因US9,并證實(shí)該基因的缺失不影響病毒的復(fù)制能力。在US9 基因缺失毒株的基礎(chǔ)上構(gòu)建獲得了表達(dá)我國流行基因VII 型NDV 融合蛋白(Fsuion,F(xiàn))的重組雞傳染性喉氣管炎病毒株ILTV-△US9-F。重組病毒ILTV-△US9-F 與親本病毒具有相似的復(fù)制能力和毒力特征,F(xiàn) 基因能夠穩(wěn)定存在于ILTV-△US9-F 的基因組中并穩(wěn)定表達(dá)。動物感染試驗(yàn)結(jié)果顯示ILTV-△US9-F 對SPF 雞無致病性,并且單次免疫后即可對ILTV 強(qiáng)毒株和我國流行的基因VII 型以及經(jīng)典的基因IX 型NDV 強(qiáng)毒株的攻擊提供有效的保護(hù)。并且,與現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的NDV 商品化活疫苗相比,ILTV-△US9-F 能夠更好的抑制基因VII 型NDV 感染后的復(fù)制和排毒。
該研究報道的重組病毒帶有基因缺失的遺傳標(biāo)記,能夠區(qū)別于現(xiàn)地流行病毒株,有利于免疫監(jiān)測和現(xiàn)地病毒的檢測及診斷,尤其適用于我國的國家中長期動物疫病防治規(guī)劃中NDV 的控制和凈化。此外,ILTV 宿主范圍窄,自然條件下僅感染雞,該疫苗的應(yīng)用不會造成病毒向其他物種的擴(kuò)散。另外,ILTV 載體疫苗可通過氣霧和飲水免疫,適合大規(guī)模的應(yīng)用。該疫苗的研制具有重大的科學(xué)意義和應(yīng)用價值,能夠?yàn)檠兄漆槍ξ覈鳬LTV 和NDV 流行病毒株的活載體疫苗奠定基礎(chǔ)。