程?hào)|美，張 蕊，張志祥

(1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院植保系,廣東廣州510225；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)天然農(nóng)藥與化學(xué)生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510642)

異遲眼蕈蚊(BradysiadifformisFrey)，雙翅目(Diptera)，長(zhǎng)角亞目(Nematocera)，眼蕈蚊科(Sciaridae)，遲眼蕈蚊屬(Bradysia)，是食用菌、藥用菌和園林植物的重要害蟲(chóng)，美國(guó)、英國(guó)、日本、俄羅斯、荷蘭、南非等國(guó)家均有報(bào)道[1-5]，我國(guó)于2009年在云南首次報(bào)道其為害蘑菇[6]。該蟲(chóng)在我國(guó)分布較廣，與韭菜遲眼蕈蚊(Bradysiaodoriphaga)形態(tài)相似，普遍混合發(fā)生，是一些地區(qū)韭菜種植區(qū)的優(yōu)勢(shì)種[7]。2009年廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)體系花卉創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，遲眼蕈蚊為害蝴蝶蘭、長(zhǎng)壽花、麗格海棠、虎刺梅、一品紅和花葉萬(wàn)年青，個(gè)別花場(chǎng)受害率達(dá)到100%[8-9]，韓群鑫等[10]研究表明，蝴蝶蘭上危害嚴(yán)重的是異遲眼蕈蚊。

異遲眼蕈蚊以幼蟲(chóng)咬食蝴蝶蘭根、靠近基質(zhì)表面的幼苗葉片，甚至鉆入植株莖部為害，被害幼苗根部變黑、腐爛，嚴(yán)重時(shí)葉片萎蔫，甚至全株枯死[10]。該蟲(chóng)個(gè)體小，為害隱蔽，不易識(shí)別，花卉上的防治主要參照韭菜及蘑菇上方法，以防蟲(chóng)網(wǎng)、粘蟲(chóng)板、誘蟲(chóng)燈配以殺蟲(chóng)劑，其中噴灑殺蟲(chóng)劑是生產(chǎn)中最常用的措施。防治常用藥劑包括辛硫磷、毒死蜱、吡蟲(chóng)啉、丙硫克百威、溴蟲(chóng)腈、敵百蟲(chóng)、丁硫克百威等傳統(tǒng)品種，滅蠅胺、阿維菌素、印楝素、滅幼脲等也逐漸受到市場(chǎng)歡迎[9,11-13]。

植物源農(nóng)藥具有安全、低毒、低殘留及害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，但在花卉害蟲(chóng)防治上應(yīng)用還較少，筆者選擇印楝素和魚(yú)藤酮等4種植物源殺蟲(chóng)劑，測(cè)試了對(duì)蝴蝶蘭異遲眼蕈蚊的活性及生長(zhǎng)發(fā)育的影響，以期為其安全防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

異遲眼蕈蚊由仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院韓群鑫教授提供，在養(yǎng)蟲(chóng)室((27±1)℃，RH(65±5)%以豆渣(Glycinemax)飼養(yǎng)[10]。

供試藥劑：印楝素44.95%原粉、除蟲(chóng)菊素90%原藥、苦參堿86.7%干粉、魚(yú)藤酮44.53%干粉，均由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥工程與安全評(píng)價(jià)中心提供。

1.2 試驗(yàn)方法

4種殺蟲(chóng)劑均先用乙醇溶解，然后用含體積分?jǐn)?shù)2%吐溫80的水溶液將各供試藥劑稀釋至50 mg/L和100 mg/L進(jìn)行活性測(cè)定。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)，各藥劑毒力測(cè)定的系列質(zhì)量濃度分別為：除蟲(chóng)菊素12.5，25，50，100，200 mg/L，印楝素和苦參堿均為25，50，100，200，400 mg/L，魚(yú)藤酮為50，100，200，400，800 mg/L。對(duì)照以含體積分?jǐn)?shù)2%吐溫80的水溶液處理。

1.2.1 浸蟲(chóng)法活性測(cè)定 參照文獻(xiàn)[14]方法并改進(jìn)，挑取20～30頭剛孵化的3齡幼蟲(chóng)放入藥液中30 s，然后吸去多余藥液，將試蟲(chóng)放墊有濾紙保濕的培養(yǎng)皿(d=7 cm)中，加入2～3 g豆渣飼養(yǎng)，處理后培養(yǎng)皿表面蓋上深色濕毛巾進(jìn)行保濕和保持黑暗條件。所有處理重復(fù)3次，調(diào)查時(shí)以毛筆輕觸蟲(chóng)體，不動(dòng)者計(jì)為死亡，計(jì)算死亡率和校正死亡率。

1.2.2 混合法活性測(cè)定 將豆渣在供試藥液中浸潤(rùn)，然后置于墊有濾紙的篩網(wǎng)上，擠去多余藥液至豆渣呈松散狀備用。挑取20～30頭剛孵化的3齡幼蟲(chóng)，以處理后的豆渣飼喂，對(duì)照采用對(duì)應(yīng)的助溶劑溶液處理，重復(fù)3次。飼養(yǎng)及檢測(cè)方法同1.2.1。用Excel數(shù)據(jù)表[15]計(jì)算毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、致死中濃度LC50及其置信區(qū)間。

1.2.3 殺蟲(chóng)劑亞致死濃度對(duì)幼蟲(chóng)的影響 根據(jù)1.2.2測(cè)定的毒力方程計(jì)算理論LC20和LC40。試驗(yàn)參照慕衛(wèi)等[12,16]方法，質(zhì)量濃度為各藥劑的LC40與LC20，以混合法處理試蟲(chóng)，每處理約20頭，重復(fù)3次，處理后觀察試蟲(chóng)的存活情況。然后采用同樣方法處理試蟲(chóng)100頭，72 h記錄幼蟲(chóng)存活幼蟲(chóng)數(shù)，并挑出外形健康的幼蟲(chóng)補(bǔ)至每重復(fù)20頭幼蟲(chóng)，正常飼養(yǎng)，連續(xù)觀察并記錄LC40與LC20處理試蟲(chóng)的累積化蛹率、平均雌蛹質(zhì)量、累積羽化率。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)的活性

4種植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)眼蕈蚊6日齡幼蟲(chóng)的活性測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1和表2。由表1可知，浸蟲(chóng)法處理，除蟲(chóng)菊素的活性最高，質(zhì)量濃度100 mg/L處理后24，48，72 h的校正死亡率分別為81.53%、86.84%和90.60%；其次為印楝素和苦參堿，校正死亡率分別為40.08%、57.14%、65.38%和43.19%、55.78%、64.29%，魚(yú)藤酮的效果較差。

表1 4種植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)的活性(浸蟲(chóng)法)

表中數(shù)據(jù)為3個(gè)重復(fù)的平均數(shù)；縱列數(shù)字后小寫(xiě)字母相同者，表示經(jīng)方差分析在5%水平上差異不顯著(下同)

Data in the table was averaged by three repetitions,data with the difference letters in column are significant difference at 5% level (The same as following tables)

混合法測(cè)定結(jié)果(表2)與浸蟲(chóng)法相近，除蟲(chóng)菊素的活性最高，其次為苦參堿和印楝素，魚(yú)藤酮的效果較差。

表2 4種植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)的活性(混合法)

2.2 印楝素、魚(yú)藤酮對(duì)異遲眼蕈蚊不同齡期幼蟲(chóng)的活性

印楝素、魚(yú)藤酮對(duì)眼蕈蚊2齡幼蟲(chóng)的活性高于3齡和4齡幼蟲(chóng)(表3)，200 mg/L印楝素處理48 h后對(duì)各齡幼蟲(chóng)校正死亡率分別為79.32%、70.20%和62.09%。濃度和幼蟲(chóng)齡期一致時(shí)，印楝素的活性高于魚(yú)藤酮，200 mg/L魚(yú)藤酮處理的效果與100 mg/L印楝素的效果差異不顯著。

表3 印楝素、魚(yú)藤酮對(duì)異遲眼蕈蚊不同齡期幼蟲(chóng)的活性

橫行大寫(xiě)字母相同者，表示經(jīng)方差分析(DMRT法)在5%水平上差異不顯著

Data with the difference capital letters in row are significant difference at 5% level

2.3 4種殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)的毒力

4種殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊3齡幼蟲(chóng)毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。由表可見(jiàn)，除蟲(chóng)菊素的毒力最好，LC50為20.39 mg/L；其次為苦參堿、印楝素，LC50分別為132.25 mg/L和151.81 mg/L；魚(yú)藤酮的毒力最差，LC50值為385.91 mg/L。

表4 4種植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊3齡幼蟲(chóng)的毒力

表5 4種植物性殺蟲(chóng)劑亞致死濃度對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)存活的影響

2.4 4種殺蟲(chóng)劑亞致死濃度對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)存活的影響

4種植物性殺蟲(chóng)劑亞致死濃度對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)存活的影響結(jié)果見(jiàn)表5。由表可見(jiàn)，在亞致死濃度下，試蟲(chóng)的死亡率和理論計(jì)算有差異，處理后48 h，印楝素在34 mg/L(理論LC20)時(shí)下，校正蟲(chóng)口減退率僅為1.67%，另3種藥劑的結(jié)果相似；理論LC40濃度處理時(shí)，除蟲(chóng)菊素的蟲(chóng)口減退率接近40%。所有處理的校正死亡率均隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)而提高。

2.5 4種殺蟲(chóng)劑對(duì)異遲眼蕈蚊化蛹和羽化的影響

4種殺蟲(chóng)劑在亞致死濃度下對(duì)異遲眼蕈蚊化蛹、羽化的影響見(jiàn)表6。由表可見(jiàn)，除蟲(chóng)菊素在6.3 mg/L(LC20)時(shí)幼蟲(chóng)化蛹率較高(72.41%)，但仍明顯低于對(duì)照(87.10%)；在供試條件下，另3種殺蟲(chóng)劑處理的幼蟲(chóng)化蛹率均明顯低于對(duì)照。

表6 4種植物性殺蟲(chóng)劑亞致死濃度對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

印楝素和魚(yú)藤藤處理幼蟲(chóng)后，異遲眼蕈蚊蛹質(zhì)量明顯低于對(duì)照；苦參堿和除蟲(chóng)菊素的處理與對(duì)照差異不顯著。印楝素處理對(duì)蛹羽化也有抑制作用，34.1 mg/L和96.7 mg/L(LC20和LC40)處理后的羽化率為72.73%和76.19%，與對(duì)照差異顯著，其他3種植物源農(nóng)藥處理的羽化率與對(duì)照差異不顯著。

3 結(jié)論與討論

植物源殺蟲(chóng)劑來(lái)源于天然植物，具有選擇性強(qiáng)，安全性高，在環(huán)境中易降解等優(yōu)點(diǎn)，符合農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的需要。魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素、印楝素、苦參堿是廣泛應(yīng)用的植物源農(nóng)藥，對(duì)多種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)具有較好的防治效果[17]。植物源殺蟲(chóng)劑防治眼蕈蚊的研究和應(yīng)用也逐年增加，印楝素、莨菪堿、煙堿和苦參堿對(duì)韭菜遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)的毒力與阿維菌素相近，亞致死劑量的苦參堿和印楝素能夠降低試蟲(chóng)的存活率和成蟲(chóng)產(chǎn)卵率，延長(zhǎng)幼蟲(chóng)發(fā)育歷期[18]。除蟲(chóng)菊素、苦參堿對(duì)平菇厲眼蕈蚊(Lycoriellapleuroti)幼蟲(chóng)具有較高毒力，LC50值分別為10.42 mg/L、20.10 mg/L[19]。每667 m2用1.1%苦參堿粉劑2 kg可有效防治韭蛆，防效在90%以上，持效期30 d 以上，與 48%樂(lè)斯本乳油的防治效果相當(dāng)[20]。1%苦皮藤素乳油和0.6%印楝素乳油對(duì)食用菌異遲眼蕈蚊(24 h)的LD50分別為16.77 mg/L和19.92 mg/L，50 mg/L濃度處理幼蟲(chóng)，校正死亡率均達(dá)80%以上[21]。本文研究結(jié)果也表明，除蟲(chóng)菊素對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)具有良好的生物活性，但印楝素和苦參堿的活性和毒力均與文獻(xiàn)報(bào)道有差異，致死濃度明顯高于已有的文獻(xiàn)，原因還有待于進(jìn)一步研究。

印楝素等植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)的抑制效果慢，綜合效應(yīng)好，具有持續(xù)控制作用。采用LC20和LC40濃度處理供試幼蟲(chóng)，具有速效殺蟲(chóng)作用的除蟲(chóng)菊素的實(shí)測(cè)死亡率與理論死亡率相近，印楝素的實(shí)測(cè)死亡率明顯低于理論死亡率，但降低了存活幼蟲(chóng)的化蛹率、雌蛹質(zhì)量及蛹的羽化率，推遲羽化了時(shí)間，表明印楝素的影響是綜合性的，具有持續(xù)控制效應(yīng)。因此植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)種群控制的綜合作用較強(qiáng)，在異遲眼蕈蚊的防治中具有廣闊的應(yīng)用前景。