隗黎麗，何 麗，阮記明，劉 毅，付建平，鐘其旺

（1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南昌 330045；2.江西師范大學(xué)生命學(xué)院，南昌 330022；3.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，南昌 330045）

在自然環(huán)境因子和人類活動的雙重影響下，水體的富營養(yǎng)化問題日趨嚴(yán)重，現(xiàn)已經(jīng)成為全球水生態(tài)系統(tǒng)中所面臨的主要環(huán)境問題之一[1]。富營養(yǎng)化水體可導(dǎo)致藍(lán)藻水華的暴發(fā)，一些有毒藍(lán)藻細(xì)胞破裂后可向水體釋放藻毒素。在已發(fā)現(xiàn)的藻毒素中，由銅綠微囊藻（Microcysis aeruginosa）等產(chǎn)生的微囊藻毒素（Mi?crocystins，MCs）是出現(xiàn)頻率最高、產(chǎn)生量最大、危害最嚴(yán)重的一類藻毒素[2]，其中，微囊藻毒素-LR（MCLR）是目前已知的毒性最強(qiáng)、研究最多的一種MCs。已有的研究表明MC-LR的致毒機(jī)理與抑制絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶1（PP1）和2A（PP2A）有關(guān)[3-5]。除此之外，自從上世紀(jì)90年代有學(xué)者報道MCs可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷以來[6]，大量的研究報道表明氧化應(yīng)激也是MCs的致毒機(jī)制之一[7-10]，但是MCs如何誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生氧化應(yīng)激仍然沒有完全弄清楚[11]。

生物體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)是抵御污染脅迫的第一道屏障，抗氧化因子中的活性成分如超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD），過氧化氫酶（Cata?lase，CAT），谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxi?dase，GPx）和谷胱甘肽還原酶（Glutathione reductase，GR）等可隨污染物脅迫而做出迅速響應(yīng)[12]。生物體內(nèi)的這些抗氧化因子在清除氧自由基和過氧化氫、遏制或減少羥自由基形成、保護(hù)機(jī)體免受自由基損害等方面具有關(guān)鍵作用。目前，國內(nèi)外針對MC-LR對魚類抗氧化酶活性和抗氧化酶基因表達(dá)的影響等方面開展了較多的研究，例如，楊靜東等[13]監(jiān)測了不同時間鰣魚抗氧化酶活性的變化，發(fā)現(xiàn)SOD、CAT、GST和GR活性與組織中MCs的含量呈正相關(guān)；任平等[14]比較了不同濃度MC-LR對斑馬魚（Danio rerio）卵巢抗氧化酶的影響，發(fā)現(xiàn)卵巢中丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽還原酶（GR）活性在不同濃度處理組中均發(fā)生顯著下降，谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）活性和GR酶活性隨著水體毒素濃度的增加而顯著下降；Hou等[9]研究發(fā)現(xiàn)斑馬魚中SOD、CAT、GST、GPx和GSH酶活性以及基因表達(dá)變化與MC-LR劑量相關(guān)。草魚（Ctenopharygodon idella）作為淡水養(yǎng)殖的主要養(yǎng)殖品種，尤其是在池塘集約化養(yǎng)殖的情況下，池塘水體極易被MCs污染，如淮河流域池塘水體MCs濃度達(dá)到了3.69 μg·L-1[15]，超過了世界衛(wèi)生組織（WHO）規(guī)定飲用水中MC-LR含量的安全指導(dǎo)值（1.0 μg·L-1）[16]。但現(xiàn)在還未見有關(guān)草魚幼魚抗氧化系統(tǒng)對MC-LR脅迫響應(yīng)的報道，因此，本文將以淡水養(yǎng)殖常見品種——草魚作為研究對象，從抗氧化酶活性和基因表達(dá)變化來評價MC-LR對草魚幼魚肝胰臟氧化脅迫的響應(yīng)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實驗用草魚為當(dāng)年孵化繁殖的幼魚，平均體重為22.13±2.17 g，購自江西省南昌神龍漁業(yè)公司養(yǎng)殖基地。實驗用MC-LR（純度≥95%），購自Taiwan Algal Science Inc公司，間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽（MS-222）為Sigma公司產(chǎn)品，RNA提取試劑盒TRIzol reagent購自Invitrogen公司，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒Re?vertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit和SYBR Green Real-time PCR Master Mix購自Promega公司，酶活性測定試劑盒購于南京建成生物有限公司。

1.2 實驗魚的處理及取樣

從養(yǎng)殖場購買的實驗草魚幼魚在實驗室暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)期間每日按照魚體質(zhì)量的2.0%投喂商品飼料，試驗前48 h停止投喂并將草魚隨機(jī)分為實驗組和對照組，每組設(shè)置3個重復(fù)。在先前的研究基礎(chǔ)上，實驗組草魚注射劑量設(shè)為25μg MC-LR·kg-1（低劑量）和100μg MC-LR·kg-1（高劑量）。對草魚進(jìn)行染毒前，根據(jù)說明書用甲醇將MC-LR粉末溶解成1 μg·μL-1的儲備液，注射前用0.8%生理鹽水稀釋成所需濃度，每尾魚注射0.1 mL MC-LR溶液，對照組每尾草魚則注射等量的0.8%的生理鹽水，具體操作方法詳見參考文獻(xiàn)[17]。各實驗組和對照組草魚分別在處理24、48 h和72 h后各取6尾魚，使用MS-222麻醉后，用紗布擦干魚體表面，先迅速分離50 mg左右肝胰臟，置于無RNA酶活性的離心管作為提取RNA的樣品，隨后分離剩余的肝胰臟放入冰冷的PBS（0.01 mol·L-1，pH 7.2）中漂洗兩次除去血液，濾紙擦干后稱重，放入離心管中，用眼科剪刀快速剪碎組織，整個操作在冰水浴中進(jìn)行。隨后將樣品置于液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 酶活性的測定分析

將液氮中保存的作為酶活性分析的肝胰臟樣品按質(zhì)量（g）∶體積（mL）=1∶9的比例加入9倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下勻漿，2500 r·min-1，離心10 min，收集上清液測定酶活性。SOD和CAT活性的測定的具體操作步驟均根據(jù)南京建成生物工程研究所提供的試劑盒說明書進(jìn)行，SOD活性采用黃嘌呤氧化酶法測定，在波長為550 nm處比色測定吸光度值計算其活力，活力單位定義為每毫克組織蛋白在反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)到50%時所對應(yīng)的SOD量為1個SOD活力單位（U·mg-1prot）。CAT活性通過405 nm波長下測定H2O2減少的量測定，活力單位定義為每毫克組織蛋白每秒鐘分解1 μmol的H2O2的量作為1個CAT活力單位（U·mg-1prot）。蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法，以南京建成生物工程研究所提供的試劑盒中蛋白標(biāo)準(zhǔn)液為標(biāo)準(zhǔn)蛋白，同樣按照試劑盒說明書進(jìn)行測定。

1.4 核酸的提取、cDNA模板的合成及qRT-PCR檢測分析

采用Invitrogen公司的Trizol試劑盒提取總RNA，具體提取方法參考試劑盒的說明書進(jìn)行。cDNA按RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit操作手冊進(jìn)行合成。Real-time quantitative PCR（qRT-PCR）反應(yīng)在伯樂公司CFX96 TouchTMReal-time PCR Detec?tion System上完成。反應(yīng)所有引物見表1，其中引物參考了文獻(xiàn)[18]。反應(yīng)體系根據(jù)Promega公司的SYBR Green Real-time PCR Master Mix的說明配制，共20 μL，反應(yīng)條件：94 ℃變性5 min，94 ℃ 10 s，58 ℃15 s，72 ℃ 20 s，45個循環(huán)，72℃延伸5 min。熒光定量PCR的數(shù)據(jù)采用2-△△CT法進(jìn)行計算。

1.5 數(shù)據(jù)分析

實驗數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用多因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗（SPSS 16.0），統(tǒng)計學(xué)顯著性水平設(shè)定P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟抗氧化酶活性的影響

多因素方差分析結(jié)果表明，不同MC-LR誘導(dǎo)時間（24、48 h和72 h）對SOD酶活性有顯著影響（F=8.161，P=0.001），不同的誘導(dǎo)劑量對其活性也有顯著影響（F=5.053，P=0.010），作用時間和誘導(dǎo)劑量之間有交互作用（F=3.397，P=0.016）。由圖1A可知，低劑量組草魚幼魚肝胰臟SOD活性在3個時間段變化均不明顯，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。高劑量組草魚幼魚肝胰臟SOD活性在24 h和48 h均顯著上升（P＜0.05），且在 24 h后達(dá)到高峰，為778.97 U·mg-1prot，隨后下降，在72h的活性下降為252.29 U·mg-1prot，差異不顯著（P＞0.05）。

對CAT活性進(jìn)行多因素方差分析表明，MC-LR誘導(dǎo)不同時間后對CAT酶活性有顯著影響（F=19.642，P＜0.001），不同的誘導(dǎo)劑量對其活性影響無顯著差異（F=0.925，P=0.404），作用時間和誘導(dǎo)劑量之間有交互作用（F=5.607，P=0.001）。由圖1B可知，在24 h，高劑量組肝胰臟中CAT活性在24 h升高，達(dá)到43.99 U·mg-1prot，與對照組相比差異顯著（P＜0.05），隨后活性下降；而低劑量組肝胰臟中CAT活性在24 h增強(qiáng)，但與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。然而，低劑量組和高劑量組肝胰臟CAT活性在48 h和72 h均下降，但與對照組相比差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟抗氧化基因的影響

采用qRT-PCR檢測了MC-LR脅迫下草魚幼魚肝胰臟SOD、CAT、GPx和GR基因表達(dá)量的變化（圖2）。多因素方差分析統(tǒng)計結(jié)果表明，MC-LR誘導(dǎo)不同時間（24、48 h和72 h）對SOD基因有顯著影響（F=6.341，P=0.004），不同的誘導(dǎo)劑量對其表達(dá)也有顯著影響（F=1.086E3，P=0.000），但作用時間和誘導(dǎo)劑量之間無交互作用（F=1.314，P=0.279）。LSD分析結(jié)果表明，經(jīng)不同劑量MC-LR脅迫不同時間后，SOD基因的表達(dá)量與對照組相比均顯著下降（P＜0.05），且低劑量組和高劑量組中肝胰臟SOD隨著時間的延長，表達(dá)量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢（圖2A）。

表1 熒光定量PCR擴(kuò)增的引物Table 1 The primers of genes used for quantitative real-time PCR analysis

用多因素方差分析草魚幼魚經(jīng)不同劑量MC-LR脅迫不同時間后肝臟中CAT基因表達(dá)的變化，結(jié)果表明，MC-LR不同誘導(dǎo)時間（24、48 h和72 h）對CAT基因表達(dá)無顯著影響（F=1.095，P=0.343），而不同的誘導(dǎo)劑量對其表達(dá)有顯著影響（F=52.069，P=0.000），作用時間和誘導(dǎo)劑量之間無交互作用（F=1.132，P=0.354）。LSD分析結(jié)果表明，CAT基因的表達(dá)量在MC-LR脅迫的第24、48 h和72 h，兩個劑量組草魚幼魚肝胰臟CAT的表達(dá)量均顯著低于對照組（P＜0.05）。低劑量組CAT表達(dá)量呈現(xiàn)先下降后升高趨勢，高劑量組CAT表達(dá)量呈現(xiàn)逐漸下降趨勢，在72 h后，高劑量組草魚幼魚肝胰臟中CAT基因的相對表達(dá)量僅為0.02（圖2B）。

圖1 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟SOD和CAT活性的影響Figure 1 The effects of MC-LR on the enzymatic activities of SOD and CAT in the hepatopancreas of grass carp

圖2 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟中抗氧化基因表達(dá)水平的影響Figure 2 The effects of MC-LR on the expression of antioxidative genes in hepatopancreas of grass carp

多因素方差分析統(tǒng)計草魚幼魚肝胰臟中GPx基因表達(dá)變化的結(jié)果表明，MC-LR誘導(dǎo)不同時間（24、48 h和72 h）對GPx基因表達(dá)無顯著影響（F=2.676，P=0.080），不同的誘導(dǎo)劑量對其活性有顯著影響（F=401.271，P＜0.001），作用時間和誘導(dǎo)劑量之間無交互作用（F=1.248，P=0.304）。LSD分析結(jié)果表明，GPx基因表達(dá)量的變化如圖2C所示，在兩個劑量組中，GPx在MC-LR脅迫不同時間后，表達(dá)量均顯著下降（P＜0.05）。低劑量組中草魚幼魚肝胰臟GPx的表達(dá)變化呈現(xiàn)先降低后升高趨勢，表達(dá)量在脅迫48 h時，抑制程度最低，相對表達(dá)量為0.13；高劑量組中GPx的表達(dá)變化呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，在72 h時，其相對表達(dá)量為0.07（圖2C）。

草魚幼魚肝胰臟中GR基因表達(dá)量變化的統(tǒng)計分析結(jié)果表明，MC-LR誘導(dǎo)不同時間（24、48 h和72 h）對GR基因表達(dá)無顯著影響（F=2.787，P=0.072），不同的誘導(dǎo)劑量對其表達(dá)有顯著影響（F=7.707，P=0.001），作用時間和誘導(dǎo)劑量之間無交互作用（F=2.192，P=0.085）。GR基因表達(dá)量的變化如圖2D所示，GR基因的表達(dá)量在低劑量組呈現(xiàn)先升高，后降低再升高的趨勢，在24 h，其表達(dá)量上調(diào)至2.46倍，存在顯著差異（P＜0.05），隨后下降，但在72 h，其表達(dá)量又上調(diào)至1.95倍，與對照組相比，差異不顯著（P＞0.05）；而高劑量組草魚幼魚肝胰臟GR基因呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，但在72 h，其相對表達(dá)量仍被抑制，GR基因在3個時間段的相對表達(dá)量差異均顯著（P＞0.05）。

2.3 MC-LR對草魚幼魚肝臟抗氧化酶活性與基因表達(dá)的相關(guān)性分析

對抗氧化酶活性與基因表達(dá)相關(guān)性進(jìn)行分析，結(jié)果表明，不同處理組中，SOD活性與其基因表達(dá)的相關(guān)系數(shù)r=-0.261（P=0.056），在α=0.01下線性關(guān)系不顯著；CAT活性與其基因表達(dá)的相關(guān)系數(shù)r=-0.085（P=0.541），在α=0.01下線性關(guān)系也不顯著（表2）。

3 討論

3.1 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟SOD和CAT活性的影響

從抗氧化防御系統(tǒng)的角度來研究微囊藻毒素對魚類的毒性作用機(jī)制是一個備受關(guān)注的科學(xué)問題。在正常情況下，生物體內(nèi)SOD和CAT等可以及時清除受環(huán)境脅迫時產(chǎn)生的過量活性氧，從而使活性氧的產(chǎn)生和清除保持一種動態(tài)平衡[13]。本實驗研究發(fā)現(xiàn)，低劑量的MC-LR對草魚幼魚肝胰臟SOD活性沒有影響，高劑量的MC-LR使草魚幼魚肝胰臟SOD活性明顯升高；而草魚幼魚肝胰臟CAT活性僅在高劑量MC-LR脅迫24 h后，其活性顯著升高，其他變化均不顯著。本實驗中酶活性的這種變化趨勢與其他學(xué)者的報道有一定相似性，如Pavagadhi等[8]發(fā)現(xiàn)低濃度MC-LR（＜5.0 μg·L-1）可誘導(dǎo)SOD活性上升，而高濃度（＞5.0 μg·L-1）使SOD活性降低。Yuan 等[19]研究報道低濃度（0.1、1 μg·L-1）的MC-LR對克氏原螯蝦（Pro?cambarus clarkii）SOD和CAT活性沒有影響，然而高濃度（10、100 μg·L-1）的MC-LR可誘導(dǎo)其SOD和CAT活性在暴露早期升高，而隨著暴露時間的延長，則降低了SOD和CAT的活性。SOD和CAT均為細(xì)胞內(nèi)重要的抗氧化酶，SOD能將超氧化物陰離子自由基（O-2·）轉(zhuǎn)化成過氧化氫（H2O2），然后在CAT的作用下轉(zhuǎn)變成H2O，當(dāng)毒素量較高時，可能會引起SOD和CAT活性的消耗過快，從而導(dǎo)致其活性下降[20]。除了濃度的影響之外，朱楓等[21]認(rèn)為暴露時間的差異也可引起SOD活性的變化，短時間誘導(dǎo)后，SOD為清除過多的ROS而活性快速上升，隨著時間的延長，SOD快速消耗又使其活性下降；CAT的活性同樣隨著誘導(dǎo)時間的延長，其活性下降。另外，也有學(xué)者認(rèn)為在暴露的早期階段，MC-LR可促使機(jī)體抗氧化初級防御系統(tǒng)迅速做出反應(yīng)出現(xiàn)應(yīng)激性的保護(hù)，隨著MC-LR的持續(xù)作用，抗氧化酶消耗直到耗竭，從而細(xì)胞抗氧化防御系統(tǒng)功能減弱或喪失[22]。根據(jù)以上分析可知，本實驗中SOD和CAT酶活性的這種變化是機(jī)體抵御氧化損傷的一種保護(hù)機(jī)制。

表2 MC-LR脅迫后抗氧化酶活性和基因表達(dá)的相關(guān)性分析Table 2 Correlation analysis of oxidative enzymatic activities and gene expression under MC-LR stress

3.2 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟抗氧化基因表達(dá)的影響

生物體在基因水平的響應(yīng)是生物應(yīng)對環(huán)境變化的早期響應(yīng)之一，抗氧化基因表達(dá)的改變可能在抵御MCs誘導(dǎo)的氧化毒性中起著重要的作用[23]。本研究發(fā)現(xiàn)抗氧化基因SOD、CAT和GPx在低劑量組和高劑量組中脅迫不同時間后，相對表達(dá)量均顯著下降，這與其他學(xué)者的報道比較相似，如Jayaraj等[7]研究發(fā)現(xiàn)小鼠（Mus musculus）暴露在高劑量MC-LR（76.62 μg·kg-1）中GPx基因表達(dá)被抑制，但更多研究表明，不同劑量MCs誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激可使抗氧化基因表達(dá)趨勢不一致，如 Hou 等[9]報道低劑量的MC-LR（50 μg·kg-1）在暴露早期可誘導(dǎo)基因表達(dá)增加，然而高劑量MC-LR（200 μg·kg-1）可使斑馬魚肝臟中SOD和GPx基因表達(dá)下降。在鯽魚（Carassius aumtus）暴露實驗中，發(fā)現(xiàn)MC-LR可使GPx和GR基因表達(dá)下調(diào)，CAT和SOD基因表達(dá)明顯上升[24]。另外，本文對GR基因的表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，GR表達(dá)量的變化則與誘導(dǎo)時間和劑量有關(guān)，低劑量在暴露早期（24 h），其相對表達(dá)量顯著上調(diào)，而高劑量誘導(dǎo)早期（24 h和48 h），其表達(dá)量則下降，但差異不顯著，這與其他學(xué)者的報道不太一致，如小鼠暴露在MC-LR（38.31 μg·kg-1）中，GR基因表現(xiàn)為顯著下調(diào)，而暴露在較高濃度（76.62 μg·kg-1）MC-LR中卻明顯上調(diào)[7]。根據(jù)以上研究報道可推測抗氧化酶相關(guān)基因的表達(dá)變化與MC-LR的濃度和時間均有一定關(guān)系，此外，基因表達(dá)下降或許與MCs直接損傷抗氧化相關(guān)基因的蛋白結(jié)構(gòu)有關(guān)[25]。

3.3 MC-LR對草魚幼魚肝胰臟抗氧化酶活性和基因表達(dá)的相關(guān)性影響

一般來說，在相同的環(huán)境毒物刺激下，SOD和CAT酶活性的變化是一致的[26]，但本研究發(fā)現(xiàn)草魚幼魚經(jīng)MC-LR誘導(dǎo)后，草魚幼魚肝胰臟中SOD和CAT酶活性變化沒有相關(guān)性，如本實驗中高劑量組肝臟中SOD在染毒48 h相對于對照組顯著上升，而CAT在染毒48 h卻顯著下降了，兩個酶活性的變化趨勢不一致，這與Shi等的報道比較相似[27]。另外，有研究報道抗氧化酶相關(guān)基因的表達(dá)與酶活性變化的相關(guān)性不大[7]，本研究也發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象，分析發(fā)現(xiàn)草魚幼魚經(jīng)MC-LR誘導(dǎo)后，肝胰臟中SOD和CAT酶活性與其基因表達(dá)的變化沒有相關(guān)性，然而，Xiong等[23]和Galan?ti等[28]均表明MCs誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激可使抗氧化酶活性和基因表達(dá)增加，并且抗氧化酶活性和基因表達(dá)之間呈現(xiàn)正相關(guān)。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)抗氧化酶相關(guān)基因表達(dá)水平的改變會直接導(dǎo)致細(xì)胞抗氧化防御體系中抗氧化酶活性的變化，從而影響到抗氧化防御體系的效果，進(jìn)一步放大了MCs引起的機(jī)體抗氧化還原系統(tǒng)的不平衡[21]。不同的試驗所用的MC-LR劑量以及脅迫時間的不同，從而導(dǎo)致抗氧化酶活性和基因表達(dá)的變化曲線呈現(xiàn)多樣性。本研究發(fā)現(xiàn)SOD和CAT活性在早期階段都是上升的，隨著脅迫時間的延長，又呈現(xiàn)下降的趨勢，而SOD、CAT和GPx基因表達(dá)在早期就被抑制了，其原因可能是MC-LR脅迫導(dǎo)致ROS過量產(chǎn)生[29]，破壞了細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能，導(dǎo)致基因表達(dá)持續(xù)下降，也有可能是轉(zhuǎn)錄反應(yīng)比酶活性更敏感，另外，基因表達(dá)量與酶活性表現(xiàn)并不完全一致也可能與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控事件有關(guān)。綜上所述，MC-LR脅迫下草魚幼魚肝胰臟抗氧化防御酶活性及其基因表達(dá)會發(fā)生改變，但MC-LR對機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的影響是一個復(fù)雜的過程，尤其是MC-LR對機(jī)體抗氧化酶活性與基因編碼調(diào)控之間的相互作用機(jī)制還有待更深入的研究。

4 結(jié)論

（1）在MC-LR脅迫草魚幼魚早期階段可誘導(dǎo)其肝胰臟抗氧化酶SOD和CAT活性升高，隨后活性下降，但兩者之間沒有相關(guān)性。

（2）MC-LR脅迫下，低劑量組和高劑量組草魚幼魚肝胰臟中SOD、CAT和GPx基因表達(dá)均被抑制，說明抗氧化基因?qū)ν饨绛h(huán)境較敏感，即使低劑量的MCLR也影響機(jī)體的轉(zhuǎn)錄水平。在今后進(jìn)行生物標(biāo)記物篩選時，尤其是在MC-LR脅迫早期階段，可從基因水平預(yù)警MC-LR的生態(tài)風(fēng)險。