魯 娜， 馬小芬， 馬曉麗， 李琳琳， 王 燁， 王麗鳳， 駱 新， 毛新民，蘭 怡

(新疆醫(yī)科大學(xué)1省部共建中亞高發(fā)病成因與防治國家重點實驗室， 2藥學(xué)院， 3基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院， 4中醫(yī)學(xué)院， 烏魯木齊 830011；5附屬中醫(yī)醫(yī)院， 烏魯木齊 830000)

2017年全球有4.51億糖尿病(DM)病人,其中約有500萬人死于糖尿病[1]。2型糖尿病(T2DM)是一種慢性進行性疾病, 發(fā)病率高,死亡率高[2]。T2DM患者中城鎮(zhèn)居民患病率高于農(nóng)村人口[3]，可能與生活方式和飲食習(xí)慣有關(guān)。人體體液中多種代謝產(chǎn)物及內(nèi)源性物質(zhì)的變化均與T2DM密切相關(guān)[4]。T2DM屬中醫(yī)“消渴”范疇，雖然各醫(yī)家對其診治的方法各有千秋，但公認(rèn)的基本病機還是本虛標(biāo)實，本虛為氣陰兩虛，標(biāo)實為痰濁、水濕、淤血等[5]。檢測血清中空腹血糖和葡萄糖水平能夠預(yù)測T2DM的發(fā)病風(fēng)險[6]，酪氨酸、異亮氨酸、亮氨酸是2型糖尿病氣陰兩虛型的代謝性標(biāo)志物[7]。王家樂等[8]利用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果及技術(shù)進行2型糖尿病氣陰兩虛型的氨基酸與相關(guān)指標(biāo)關(guān)系的研究，發(fā)現(xiàn)氨基酸與體質(zhì)指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯具有顯著的相關(guān)性。本研究旨在探討2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸與生理和生化指標(biāo)的相互聯(lián)系，為T2DM中醫(yī)辨證分型客觀量化提供依據(jù)，并探討它們對T2DM預(yù)測的可行性和價值。

1 資料與方法

1.1研究對象對新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院177例2型糖尿病(T2DM)志愿者進行資料采集，其中氣陰兩虛型89例，男性43例，女性46例。由專業(yè)醫(yī)護人員測量志愿者的身高、體質(zhì)量、腰圍(WC)、臀圍(HC)、腰臀比(WHtR)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)等指標(biāo)。

1.1.1 診斷標(biāo)準(zhǔn) 體質(zhì)指數(shù)(BMI)<18.5 kg/m2為體重過低，24 kg/m2≤BMI <28 kg/m2為超重、BMI≥ 28 kg/m2為肥胖(標(biāo)準(zhǔn)參照《成人體重判斷》)；收縮壓(SBP)≥ 140 mmHg和舒張壓(DBP)≥ 90 mmHg為高血壓(標(biāo)準(zhǔn)參照《中國高血壓防治指南》)；總膽固醇(TC)≥ 6.2 mmol /L、甘油三酯(TG)≥ 2.3 mmol/L，滿足以上1種即判為血脂異常(標(biāo)準(zhǔn)參照《中國成人血脂異常防治指南》)；空腹血糖(FBG)≥7.0 mmol/L或餐后2 h血糖>11.0 mmol/L為糖尿病(參照《中國糖尿病診療標(biāo)準(zhǔn)》)。

1.1.2 中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn) 參照周仲英主編普通高等教育"十五"國家級規(guī)劃教材《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》,進行中醫(yī)辨證分型，氣陰兩虛型：倦怠乏力，自汗盜汗，氣短懶言，口渴喜飲，五心煩熱，心悸失眠，渡赤便秘，舌紅少津，舌體胖大，苔薄或花剝，脈弦細(xì)或細(xì)數(shù)。

1.2方法

1.2.1 實驗試劑及儀器 AQC衍生試劑包(美國Waters公司),乙腈(色譜純，Sigma-Aldricl試劑公司),甲醇(色譜純，Sigma-Aldricl試劑公司),高效液相色譜儀(Waters e2695),熒光檢測器(Waters 2475),全自動生化分析儀(BS-120),離心機(Thermo，LEGEND MICRO21)。

1.2.2 氨基酸代謝性標(biāo)志物 采用HPLC法檢測尿液中17種氨基酸含量，找到氨基酸代謝性標(biāo)志物，2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中氨基酸的特征性代謝物是胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)和亮氨酸(Leu)。

1.2.3 血樣處理 采用靜脈穿刺抽取志愿者的空腹血液，用于測定血清中的客觀指標(biāo)。

1.2.4 生化指標(biāo)的檢測 運用全自動生化分析儀檢測血清中空腹血糖(FBG)、葡萄糖、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)、血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，運用Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

Pearson相關(guān)性分析顯示，2型糖尿病氣陰兩虛型患者中，Cys與BMI呈顯著性正相關(guān)，與WC呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)，Tyr與TG呈顯著性正相關(guān)，與BMI、TC呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)，Leu與BMI呈顯著性正相關(guān)，與HDL、HC呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)(表1)。

表1 2型糖尿病氣陰兩虛型Cys、Tyr、Leu與客觀指標(biāo)的相關(guān)性

注:*P<0.05,**P<0.01。

3 討論

DM是由于細(xì)胞代謝作用缺陷引起的葡萄糖、氨基酸及脂質(zhì)代謝紊亂的一種綜合征[9]。Wang等[10]研究表明，芳香族氨基酸參與體內(nèi)兒茶酚胺類激素的合成，支鏈氨基酸主要在肌肉分解供能，精氨酸與尿素循環(huán)、免疫功能有密切關(guān)系，因此，血清中這些氨基酸水平的改變必然會改變相應(yīng)的生化代謝和生理功能。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，T2DM屬于“消渴”范疇，主要病變部位在腎、胃、肺等部位，病機關(guān)鍵為虧耗陰津，燥熱偏盛[11]。中醫(yī)辨證分型是辨證施治的具體表現(xiàn)，由于辨證分型主觀性差異較大，缺乏客觀指標(biāo)(BMI、TG、TC、FBG等)，嚴(yán)重影響了中醫(yī)醫(yī)治T2DM的治療水平和可信度[12]。本課題組前期工作研究[13]發(fā)現(xiàn)2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中氨基酸的特征性代謝物是胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)和亮氨酸(Leu)。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中的Cys與BMI呈正相關(guān)，與WC呈負(fù)相關(guān)，Tyr與TG呈正相關(guān)，與BMI、TC呈負(fù)相關(guān)，Leu與BMI呈正相關(guān)，與HDL、HC呈負(fù)相關(guān)。高貝貝[4]研究發(fā)現(xiàn)，T2DM組血清中的Tyr與TG具有顯著正相關(guān)，Leu、Val與FBG、DBP、BMI具有顯著正相關(guān)，本研究結(jié)果與之類似。造成這些差異的原因可能是Cys是一種含硫氨基酸，是人體非必需氨基酸的一種，也屬于脂肪族氨基酸，同時又是生酮氨基酸，Cys既有促進機體細(xì)胞氧化和還原機能，參與蛋白質(zhì)的合成，也有參與糖異生，促進內(nèi)源性糖原的生成的作用，對BMI有很大影響[14]，Cys水平越高，氣陰兩虛T2DM的BMI水平也增高，Tyr屬于芳香族氨基酸代謝途徑中的全局性調(diào)控蛋白性調(diào)控功能的DNA結(jié)合蛋白，在轉(zhuǎn)錄水平上控制與Phe合成及運輸相關(guān)的多種關(guān)鍵酶和運輸?shù)鞍椎谋磉_(dá)，且高濃度的Tyr抑制生理狀態(tài)，故Tyr水平越高，其BMI、TC水平被抑制，而TG水平被促進。

綜上所述，2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中的Cys、Tyr、Leu與BMI具有顯著的相關(guān)性，且Cys、Leu和Tyr與BMI的相關(guān)性在2型糖尿病氣陰兩虛型患者血清中的表達(dá)水平具有差異性，究其原因可能與飲食和蛋白質(zhì)代謝途徑不同有關(guān)，這將為T2DM中醫(yī)證候本質(zhì)研究作出有益的探索。