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分子技術(shù)在臨床微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用探討

2019-02-20 06:57:44任曉東劉昌亞
關(guān)鍵詞:基因芯片熒光分子

任曉東,劉昌亞

(云南省昭通衛(wèi)生學(xué)校,云南 昭通 657000)

為了分析針對病癥,本次臨床觀察實(shí)驗(yàn)研究選取我校附屬醫(yī)院所收治的病患120例作為本次臨床觀察基本研究對象,以下為本次臨床觀察研究的相關(guān)內(nèi)容?,F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月~2018年3月我校附屬醫(yī)院采用分子生物科學(xué)技術(shù)檢驗(yàn)常見的病原微生物臨床基線資料,作為本次臨床實(shí)踐研究對象。

1.2 研究方法

運(yùn)用回顧性分析法,對我校附屬醫(yī)院2017年2月~2018年3月采用分子生物科學(xué)技術(shù)檢驗(yàn)常見的病原微生物臨床基線資料,進(jìn)行臨床分析與研究,評(píng)價(jià)在微生物的檢驗(yàn)工作方面分子生物科學(xué)技術(shù)的臨床應(yīng)用意義及價(jià)值。

1.3 觀察指標(biāo)

在本次臨床實(shí)踐研究當(dāng)中,對常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實(shí)際檢驗(yàn)效果進(jìn)行實(shí)時(shí)化的比較分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用Excel 2007軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,再利用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述及推斷分析,計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

在本次臨床實(shí)踐研究中,從常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實(shí)際檢驗(yàn)結(jié)果所作出的對比分析中可發(fā)現(xiàn):相比較于常規(guī)的RT-PCR(55.83%),熒光定量的RT-PCR陽性檢出率(76.67%)相對較高,略占據(jù)一定臨床應(yīng)用優(yōu)勢,組間對比數(shù)據(jù);差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實(shí)際檢驗(yàn)結(jié)果對比 [n(%)]

3 討 論

伴隨著生物科學(xué)技術(shù)不斷的進(jìn)步發(fā)展,在微生物臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域中已經(jīng)研究出了聚合酶鏈反應(yīng)、生物傳感器、基因芯片等技術(shù),這些技術(shù)均具有著較高敏感性、特異性、精密度、自動(dòng)化等優(yōu)勢,在微生物臨床檢驗(yàn)工作當(dāng)中均發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,能夠最大限度地滿足臨床診療的基本需求[1]。聚合酶鏈反應(yīng)在生命工程科學(xué)領(lǐng)域中屬于常見性分子技術(shù),主要是由變性、延伸及退火等步驟所構(gòu)成,以實(shí)現(xiàn)迅速擴(kuò)增DNA指數(shù)級(jí)效果[2]。經(jīng)過大量的臨床實(shí)踐研究證明,PCR反應(yīng)基本原理類似于DNA的天然復(fù)制,其整個(gè)循環(huán)過程如下:首先是變性步驟,處于93~95℃高溫環(huán)境時(shí),雙鏈DNA逐漸解離成單鏈;其次是退火步驟,處于最適溫度時(shí),引物配對結(jié)合于單鏈DNA模板特定的區(qū)域;最后是延伸步驟,處于72℃溫度環(huán)境時(shí),DNA聚合酶TaqDNA以引物的3'末端為起始點(diǎn),以dNTP為底物,堅(jiān)持堿基互補(bǔ)配對的原則,最終合成了DNA模板鏈,并將其當(dāng)成互補(bǔ)的新鏈。在微生物臨床檢驗(yàn)方面,相比較于常規(guī)分子技術(shù),其具有較高的靈敏度,細(xì)菌最低檢出率可達(dá)3個(gè)。生物傳感器技術(shù)主要是把分子生物的診斷技術(shù)及傳感技術(shù)有效融合,進(jìn)而形成一種新型分析技術(shù)在微生物臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域當(dāng)中有效應(yīng)用,為臨床診療提供最具精準(zhǔn)度的檢驗(yàn)依據(jù)?;蛐酒夹g(shù)是以人類基因組計(jì)劃為基礎(chǔ),逐漸形成的一種新型分子技術(shù),是高通量的檢驗(yàn)技術(shù),主要包含芯片實(shí)驗(yàn)室、蛋白質(zhì)及基因芯片等,是目前微生物臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域當(dāng)中應(yīng)用最為廣泛的一類分子技術(shù)。在一定程度上,這種分子技術(shù)在微生物臨床檢驗(yàn)工作中具有較為明顯的自動(dòng)化優(yōu)勢,檢驗(yàn)效果較為理想,可作為微生物臨床檢驗(yàn)工作最佳的分析技術(shù)。綜上所述,在微生物臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域,聚合酶鏈反應(yīng)、生物傳感器、基因芯片等技術(shù)在微生物臨床檢驗(yàn)工作當(dāng)中均具有不同的技術(shù)特征及優(yōu)勢,均具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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