■閆冰雪 王煥杰 陳小鴿 黃艷群 陳 文*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)飼料營養(yǎng)河南省工程實驗室，河南鄭州 450002；2.河南神農(nóng)膨化飼料科技有限公司，河南鄭州 450121；3.河南省獸藥飼料監(jiān)察所，河南鄭州 450003）

近年來，殼寡糖在動物生產(chǎn)性能、免疫功能、礦物質(zhì)元素吸收和骨骼健康等方面的研究越來越廣泛。王秀武等[1-2]和李曉晶[3]一致報道，添加殼寡糖可能通過增加免疫力，改善腸道菌群和增加營養(yǎng)物質(zhì)吸收利用率等途徑，可以使肉仔雞體獲得更好的生產(chǎn)性能[2-8]。已有研究表明：殼寡糖能顯著增加肉仔雞胸肌、腿肌中Ca、Zn、Fe元素的含量[1]，仔豬（35 d和70 d）背最長肌中Cu、心肌中Zn及脾臟中Mn的含量[9]。通過構(gòu)建大鼠和兔子的骨質(zhì)疏松或骨缺損模型發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可通過增加骨密度骨強(qiáng)度[10]，降低過高骨轉(zhuǎn)換[11]，促進(jìn)結(jié)締組織再生[12]，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖[13-14]和調(diào)節(jié)骨愈合相關(guān)基因表達(dá)[15-16]等途徑，促進(jìn)骨缺損修復(fù)，緩解骨質(zhì)疏松癥狀。

綜合文獻(xiàn)報道，殼寡糖促生產(chǎn)性能的適宜添加量需進(jìn)一步確定，促進(jìn)礦物質(zhì)元素吸收及骨骼健康方面，未見肉仔雞健康骨骼組織的報道。本試驗旨在研究飼糧中添加不同劑量殼寡糖對肉仔雞生長性能、屠宰性能、骨骼參數(shù)及鈣磷沉積代謝的影響，以探尋殼寡糖的適宜添加量及促骨骼發(fā)育、鈣磷沉積的效果，為生產(chǎn)實踐提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

選取1日齡快大型（AA）白羽肉仔雞公雛90只，隨機(jī)分為3組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)5只。參照我國肉雞營養(yǎng)需要推薦標(biāo)準(zhǔn)（ZNY/T33—2004）進(jìn)行基礎(chǔ)飼糧配制（見表1）。對照組飼喂不添加殼寡糖的基礎(chǔ)飼糧，處理1組和處理2組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加150、300 mg/kg殼寡糖（純度為90.7%）。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗期42 d。1～21 d參考NRC（1994）肉小雞標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)；22～42 d參考NRC（1994）肉中雞標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)。每個重復(fù)單籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水，全天連續(xù)光照。每日觀察雞只精神狀態(tài)、采食和飲水情況等。每周消毒兩次。溫度控制和免疫接種按照按正常程序進(jìn)行。

1.3 檢測指標(biāo)及方法

1.3.1 生長性能指標(biāo)測定

每天定時稱料，記錄每天每個重復(fù)雞只的總采食量。分別于試驗第21 d和第42 d禁食8～12 h后，對每個處理組的雞只進(jìn)行整體空腹稱重。根據(jù)初重、末重、每天采食量，計算各個階段雞只的總采食量、平均日增重、料重比。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3.2 屠宰性能指標(biāo)測定

于試驗第42 d禁食8～12 h后，從每個重復(fù)中隨機(jī)挑選1只進(jìn)行空腹稱重和屠宰取樣。稱取半凈膛重、全凈膛重、左側(cè)胸肌重、左側(cè)腿肌重和腹脂重。計算方法如下：

半凈膛率=半凈膛重/活體重

全凈膛率=全凈膛重/活體重

胸肌率=左側(cè)胸肌重×2/活體重

腿肌率=左側(cè)腿肌重×2/活體重

腹脂率=腹脂重×100/活體重

1.3.3 骨骼參數(shù)指標(biāo)測定

于試驗第21 d和第42 d禁食8～12 h后，從每個重復(fù)中隨機(jī)挑選1只屠宰并分離右側(cè)脛骨股骨，按如下步驟測骨骼的重量、長度、直徑、鈣和磷含量。

①蒸煮并清洗，剔除軟骨、脂肪、肌肉組織。

②乙醇和無水乙醚分別浸泡48 h脫去骨骼中的脂肪。于100℃烘干12 h，稱取脫脂干骨重（g），并用游標(biāo)卡尺測量直徑（mm）和長度（mm）。

③ 灰分測定：灰化法（GB/T 6438—2007）。

④鈣測定：乙二胺四乙酸二鈉絡(luò)合滴定法（GB/T 6436—2002）。

⑤ 磷測定：分光光度法（GB/T 6437—2002）。

1.3.4 血清指標(biāo)測定

于21 d和42 d，每個重復(fù)隨機(jī)抽取1只雞，翅下采血5 ml，2 500 r/min離心分離血清。Ca和P用全自動生化分析儀RA-1000（Bayer公司，美國）檢測。

鈣測定：偶氮胂法；

磷測定：紫外法。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SPSS 17.0（one-way ANOVA）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用Duncan's多重比較進(jìn)行差異顯著性檢驗。P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 殼寡糖對白羽肉雞生長性能的影響(見表2)

表2 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對肉仔雞生長性能的影響

由表2可見，與對照組相比，處理2組的1～42 d體增重、1～21 d和1～42 d耗料量均顯著提高，分別比對照組提高了15.73%（P＜0.05）、15.35%（P＜0.05）和14.19%（P＜0.05）；處理1組各個階段耗料量和體增重較對照組無顯著差異（P＞0.05）；料重比組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 寡糖對42 d白羽肉雞屠宰性能的影響(見表3)

由表3可見，處理1組的腿肌率較對照組提高了5.97%（P＜0.05），半凈膛率、全凈膛率、胸肌率組間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對肉仔雞屠宰性能的影響

2.3 殼寡糖對白羽肉雞骨骼參數(shù)的影響(見表4)

由表4可見，處理2組的42 d肉仔雞的脛骨長度、股骨干重、股骨長度較對照組顯著提高（P＜0.05），各個處理對21 d肉仔雞的骨骼參數(shù)影響均不顯著（P＞0.05）。

2.4 殼寡糖對白羽肉仔雞鈣磷代謝的影響(見表5)

由表5可見，與對照組和處理1組相比，處理2組21 d肉仔雞的血清P、脛骨鈣顯著增加（P＜0.05），血清磷含量分別比對照組和處理1組提高了80.88%和46.36%（P＜0.05）；42 d肉仔雞骨骼參數(shù)組間差異不顯著（P＞0.05）。

表4 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對肉仔雞骨骼參數(shù)的影響

表5 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對肉仔雞鈣磷代謝的影響(%)

3 討論

3.1 殼寡糖對白羽肉雞生長性能的影響

本試驗顯示，基礎(chǔ)飼糧添加適宜劑量殼寡糖可以提高肉仔雞各個階段的耗料量和體增重，對料重比無顯著影響，這與游金明等[5]和Jung W K等[10]的研究結(jié)果一致。由表2得：基礎(chǔ)飼糧中300 mg/kg的殼寡糖添加量的促進(jìn)效果優(yōu)于150 mg/kg添加量，提示殼寡糖對生長性能的促進(jìn)作用具有劑量依賴性，促生長作用隨添加劑量的增加而增加，這與張麗[8]和王秀武等[1]的研究結(jié)果一致，0、5、25 mg/kg和125 mg/kg四個殼寡糖組間1、3、5周齡和7周齡的體重均隨著殼寡糖添加量的增加而增加，125 mg/kg的添加劑量取得了最好的終體重。綜合本試驗數(shù)據(jù)，300 mg/kg殼寡糖添加量獲得了最佳的促生長效果。

3.2 殼寡糖對42 d白羽肉雞屠宰性能的影響

本試驗添加殼寡糖對42 d肉仔雞的半凈膛率、全凈膛率，胸肌率均無顯著影響的結(jié)果與黎秋平等[17]的報道一致，然而黎秋平等報道顯示0.75%殼寡糖能降低麒麟雞腿肌率，而本試驗卻得出了150 mg/kg殼寡糖組顯著提高42 d肉仔雞腿肌率而300 mg/kg殼寡糖組不影響42 d肉仔雞腿肌率的結(jié)論，由此推測殼寡糖對腿肌率的影響具有劑量依賴性且呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。本試驗中，150 mg/kg和300 mg/kg殼寡糖對42 d肉仔雞腹脂率的影響均不顯著，不符合之前報道的殼寡糖能有效的降低動物體脂沉積的結(jié)論[18-22]，其機(jī)理值得進(jìn)一步研究。

3.3 殼寡糖對白羽肉雞骨骼參數(shù)的影響

本試驗結(jié)果顯示，基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg殼寡糖，兩個日齡的脛骨參數(shù)均提高，其中42 d脛骨長度顯著增加；對股骨參數(shù)，添加300 mg/kg殼寡糖顯著增加42 d肉仔雞的股骨重和長度、股骨直徑和灰分含量也有增加趨勢；添加不同水平的殼寡糖對前期（1～21 d）股骨參數(shù)影響不顯著。綜合本試驗的數(shù)據(jù)可以推測：①殼寡糖具有促進(jìn)骨骼生長的作用且具有劑量依賴性，效果較好的為300 mg/kg殼寡糖組；②殼寡糖對骨骼生長的促進(jìn)作用具有組織差異性，本試驗中添加殼寡糖對脛骨的促進(jìn)作用優(yōu)于股骨。③殼寡糖對骨骼的促進(jìn)作用具有日齡差異性，對脛骨的促進(jìn)作用體現(xiàn)在全期（1～21 d、22～42 d），對股骨的促進(jìn)作用主要是后期（22～42 d）。本試驗的結(jié)論部分符合了關(guān)于非消化寡糖對骨骼健康的促進(jìn)效果與其添加劑量、動物年齡、絕經(jīng)情況、鈣質(zhì)吸收能力相關(guān)的報道[23-24]。推測本試驗中殼寡糖促進(jìn)骨骼生長的途徑可能是促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖[13-14]、影響骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）形成[15]、調(diào)節(jié)RUNX2mRNA[16]和胞骨鈣素mRNA等基因的表達(dá)等。

3.4 殼寡糖對白羽肉雞鈣磷代謝的影響

添加益生素如非消化寡糖對機(jī)體鈣質(zhì)沉積的促進(jìn)作用受動物年齡因素影響較大[23]，對幼齡動物影響相對明顯，而對青年或成年動物影響較小。本試驗中，21 d肉仔雞的的脛骨磷含量、股骨鈣磷含量變化趨勢與血清鈣磷的變化趨勢一致，吻合了金黎明和揚(yáng)志宏等的報道[25-26]，42 d的骨骼鈣磷含量與血清鈣磷含量沒有一定的對應(yīng)性。1～21 d肉仔雞骨骼正處于生長發(fā)育時期，屬于鈣磷缺乏期，需要獲取大量鈣磷以滿足骨骼生長發(fā)育的需要，所以其主要來源血清鈣磷含量的變化會直接影響骨骼中鈣磷含量；22～42 d肉仔雞的骨骼發(fā)育已經(jīng)成熟，鈣庫處于飽和狀態(tài)，其鈣磷含量處于動態(tài)平衡中，血清鈣磷的變化對骨骼鈣磷的影響較小，所以本試驗42 d血清鈣磷含量和42 d骨骼中鈣磷含量的變化趨勢沒有較好的關(guān)聯(lián)性。

4 結(jié)論

①殼寡糖對生長性能的促進(jìn)作用與添加劑量呈正相關(guān)，300 mg/kg添加量效果較好。

②添加殼寡糖可改善42 d肉仔雞的屠宰性狀。

③殼寡糖對骨骼生長的促進(jìn)作用具有劑量、骨骼類型和日齡差異性，300 mg/kg添加量效果較好。

④殼寡糖可以促進(jìn)機(jī)體鈣磷沉積，其促進(jìn)作用具有日齡差異性。

基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg殼寡糖可以顯著提高肉仔雞生長性能，對骨骼發(fā)育和鈣磷沉積代謝也有一定促進(jìn)作用。