段茜 石國(guó)林 陳張華 李福泉

摘要：豬肺炎支原體（Mhp）是引起豬支氣管肺炎的主要病原，嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬事業(yè)的發(fā)展。對(duì)豬支原體肺炎的病原學(xué)特征、診斷、疫苗及綜合防制等進(jìn)行了介紹，以期避免或減少該病發(fā)生，保障養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。

關(guān)鍵詞：豬肺炎支原體;診斷;防制

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.28? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B? ? ? ? 文章編號(hào)：1007-273X（2019）01-0021-02

豬支原體肺炎又稱(chēng)豬霉形體肺炎，是由豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae，MHP）引起的一種以感染豬表現(xiàn)咳嗽、喘氣、生長(zhǎng)不良等癥狀為特征的接觸性、慢性傳染病。

豬支原體肺炎多為地方流行性，世界各地均有發(fā)生，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展造成了嚴(yán)重的影響。由于豬感染MhP后，其呼吸道纖毛的清除能力被損壞，致病微生物很容易定植和侵襲;同時(shí)MhP的感染會(huì)降低巨噬細(xì)胞的吞噬力，損害機(jī)體免疫功能，從而使MhP持續(xù)存在，導(dǎo)致二次感染，引起豬呼吸系統(tǒng)疾病綜合征的發(fā)生，增大了當(dāng)前豬病診斷、預(yù)防控制的難度[1]。MhP一旦感染豬群，傳播速度快，如不及時(shí)采取措施很難將其根除，被喻為全球養(yǎng)豬業(yè)的“隱形殺手”。

1? 病原學(xué)特征

MhP屬柔膜體綱支原體目支原體科支原體屬，呈高度多形性，如環(huán)狀、球狀、點(diǎn)狀等。革蘭氏染色陰性，但不易著色;姬姆薩染色或瑞氏染色為淡紫色，著色良好。MhP對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較弱，存活不超過(guò)24 h。由于缺乏細(xì)胞壁，MhP的耐藥性廣泛，對(duì)青霉素、鏈霉素和磺胺類(lèi)等藥物均不敏感。

2? 診斷

2.1? 病原分離培養(yǎng)鑒定

分離培養(yǎng)常用于檢測(cè)和鑒定大多數(shù)細(xì)菌性微生物，而分離培養(yǎng)被認(rèn)為是檢測(cè)MhP的“金標(biāo)準(zhǔn)”。由于MhP的培養(yǎng)需要特殊的培養(yǎng)基且生長(zhǎng)十分緩慢，通常需要4～8周的生長(zhǎng)才能被檢測(cè)到，在分離培養(yǎng)過(guò)程中也容易被其他支原體或細(xì)菌覆蓋生長(zhǎng)，因此要成功分離培養(yǎng)MhP比較困難。

2.2? 血清學(xué)檢測(cè)

血清學(xué)試驗(yàn)是檢測(cè)豬群是否感染MhP最常用的方法，現(xiàn)有凝集試驗(yàn)（AT）、間接血凝反應(yīng)試驗(yàn)（IHA）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等技術(shù)已用于MhP抗體的檢測(cè)。其中，ELISA是相對(duì)敏感且使用較多的檢測(cè)方法，其測(cè)定的抗體效價(jià)比IHA和CF的結(jié)果高10～20倍。即使在感染后期，ELISA法的敏感性仍很高，可檢測(cè)到感染后1年的抗體[2]。

2.3? 分子檢測(cè)

2.3.1? 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)? PCR檢測(cè)方法具有敏感性高、特異性好、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)單和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)克服了分離培養(yǎng)困難、血清學(xué)檢測(cè)時(shí)易發(fā)生交叉反應(yīng)等缺點(diǎn)。因此PCR檢測(cè)技術(shù)在MhP的檢測(cè)中發(fā)展迅速。隨著科技的發(fā)展，科學(xué)家們相繼建立了多重PCR、巢氏PCR、熒光定量PCR等技術(shù)。

2.3.2? 原位雜交技術(shù)? 原位雜交技術(shù)（ISH）可用于檢測(cè)福爾馬林固定、石蠟包埋的肺組織以及試驗(yàn)感染豬肺組織中MhP DNA，其缺點(diǎn)是操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，在生產(chǎn)上的應(yīng)用受到很大限制。Ruiz等[3]采用原位雜交技術(shù)對(duì)福爾馬林固定組織切片中的豬肺炎支原體、豬滑液支原體和豬鼻支原體進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)該方法能將3種支原體很好地區(qū)分開(kāi)來(lái)。

3? 豬支原體肺炎疫苗

由于MhP沒(méi)有細(xì)胞壁，對(duì)常規(guī)抗生素不敏感，以及耐藥性和MhP免疫保護(hù)的特殊性等問(wèn)題，使得科學(xué)家們致力于尋求通過(guò)免疫來(lái)對(duì)MhP進(jìn)行預(yù)防和控制。目前國(guó)內(nèi)外用于預(yù)防MhP感染常用的商品化疫苗有常規(guī)滅活疫苗、弱毒疫苗及佐劑全細(xì)胞苗，一些新型的疫苗如活載體疫苗、DNA疫苗、亞單位疫苗及口服微球苗等正處于實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段。

3.1? 滅活疫苗

目前國(guó)內(nèi)使用的滅活苗主要依賴(lài)于進(jìn)口，如法國(guó)的“豬克喘”滅活疫苗、美國(guó)的“瑞倍適”滅活疫苗、德國(guó)的“茵格發(fā)”滅活疫苗，以及西班牙的“喜可舒”滅活疫苗等。以往研究認(rèn)為在疫苗免疫過(guò)程中，細(xì)胞免疫和黏膜免疫起主要作用。最新研究發(fā)現(xiàn)滅活疫苗主要激發(fā)機(jī)體的體液免疫應(yīng)答，幾乎不會(huì)激發(fā)細(xì)胞免疫應(yīng)答，因此滅活疫苗抵抗MhP感染的能力要比活疫苗低[4]。

3.2? 弱毒疫苗

弱毒疫苗能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的細(xì)胞免疫及黏膜免疫，免疫效果較滅活疫苗好。中國(guó)獸藥監(jiān)察所將MhP菌株在乳兔體內(nèi)連續(xù)傳代700多次，獲得了一株保持較好免疫原性的兔化弱毒株，用該弱毒株制備的疫苗安全有效，對(duì)豬無(wú)副作用[5]。但該疫苗采用胸腔注射的免疫途徑，且產(chǎn)量低、成本高，使其在基層動(dòng)物防疫中難以廣泛應(yīng)用。

3.3? 新型疫苗

一些新型疫苗如活載體疫苗、DNA疫苗、亞單位疫苗以及口服微球苗等正處于實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段。蘇國(guó)東等[6]制備了MhP重組P42蛋白的亞單位疫苗，采用油性佐劑免疫感染豬，結(jié)果表明該亞單位疫苗能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)。

4? 綜合防制

僅僅通過(guò)疫苗防控豬支原體肺炎效果不佳，因此需加強(qiáng)綜合防制措施。第一，注意引種，采取全進(jìn)全出制度;第二，對(duì)仔豬進(jìn)行早期免疫，合理用藥;第三，加強(qiáng)生產(chǎn)管理，有計(jì)劃地進(jìn)行衛(wèi)生消毒;第四，避免懷孕母豬的隱性感染，及時(shí)檢疫、隔離發(fā)病豬。

為控制豬支原體肺炎的發(fā)生，全世界已投入大量的人力物力。但由于MhP培養(yǎng)難度大、對(duì)抗生素不敏感等因素，使豬支原體肺炎的發(fā)病率仍較高。因此需要采取一系列綜合措施控制該病的發(fā)生，包括引種、優(yōu)化管理、監(jiān)測(cè)發(fā)病范圍、應(yīng)用分離株的分子分型等技術(shù)以分析感染的傳播模式以及研制有效的疫苗和設(shè)計(jì)合適的免疫接種方案。

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳溥言.家畜傳染病學(xué)（第五版）[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006.

[2] SHEN Y，HU W，WEI Y，et al. Effects of mycoplasma hyopneumoniae on porcine nasal cavity dendritic cells[J].Vet Microbiol，2017，198：1-8.

[3] RUIZ A，GALINA L，PIJOAN C. Mycoplasma hyopneumoniae colonization of pigs sired by different boars[J].Can J Vet Res， 2002，66（2）：79-85.

[4] 張? 旭，白方方，武昱孜，等.PCR技術(shù)檢測(cè)豬肺炎支原體的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)通報(bào)，2012（5）：54-60.

[5] 肖國(guó)生，曹三杰，黃小波，等.豬肺炎支原體檢測(cè)芯片的研制及初步應(yīng)用[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008（1）：57-63.

[6] 蘇國(guó)東，劉茂軍，周勇岐，等.豬支原體肺炎活疫苗（168株）的免疫效力研究[J].中國(guó)獸藥雜志，2012，46（9）：4-6，14.