顧軍娟 廖生俊 陳雅文 李一榮

肺癌是發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤，5年生存率僅為16.8%[1-3]。低劑量CT掃描是一種重要的肺癌篩查手段，但因其需要大型CT設(shè)備且具有放射性，推廣進(jìn)行肺癌普遍篩查受到一定限制。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測因其創(chuàng)傷小等優(yōu)勢而廣泛應(yīng)用，但是單一腫瘤標(biāo)志物檢測的靈敏度和特異性均欠佳。研究顯示腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測能提高靈敏度與特異性[4]，但過多的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測會顯著增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此本研究聯(lián)合檢測血清癌胚抗原(CEA)、糖鏈抗原125(CA125)和非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原21-1(CYFRA211)的水平，分析其對肺癌的診斷價值，并探討其與患者性別、病理分型、TNM分期和EGFR基因型等臨床與病理參數(shù)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 對象和分組

回顧性納入2014-10—2017-09在武漢大學(xué)中南醫(yī)院入院治療的139例肺癌患者(肺癌組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)影像學(xué)與組織病理學(xué)檢查確診為肺癌，術(shù)前和放化療治療前行腫瘤標(biāo)志物檢測。其中男103例，女36例，年齡38—88歲，平均年齡63.00±9.92歲；肺腺癌75例，肺鱗癌48例，腺鱗癌4例，大細(xì)胞肺癌2例，小細(xì)胞肺癌10例；依照國際抗癌聯(lián)盟(UICC)第8版肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[25]，將其分為Ⅰ期22例，Ⅱ期12例，Ⅲ期46例，Ⅳ期43例，未分期16例。根據(jù)EGFR基因型結(jié)果將肺癌組劃分為EGFR基因野生型組與EGFR基因突變型組(包括19號外顯子缺失突變、第20號外顯子T790M突變或S768I突變、第21號外顯子L858R突變)，其中EGFR基因野生型組37例，EGFR基因突變型組35例。選擇同期在武漢大學(xué)中南醫(yī)院入院治療的139例肺部良性疾病患者為良性疾病組。良性疾病組納入標(biāo)準(zhǔn)：有明確的肺炎、肺結(jié)核、肺炎性假瘤等肺部良性疾病診斷，不患有其它干擾腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的疾病，均有行腫瘤標(biāo)志物檢測。其中男99例，女40例，年齡31-91歲，平均年齡65.00±12.73歲。同期本院150例健康體檢者為對照組，其中男100例，女50例，年齡42-81歲，平均年齡59.00±9.35歲。以上三組對象性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1血清CA125、CYFRA211和CEA水平檢測：采集受檢者靜脈血3-5ml于無抗凝劑的采血管中，3 000轉(zhuǎn)/min離心10min后分離血清，采用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(Abbott公司，型號i4000)和全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(cobas公司，型號e601)檢測血清CA125、CYFRA211和CEA水平，各指標(biāo)正常參考水平分別為35U/ml、3.3ng/ml和5ng/ml。CA125測定試劑盒：雅培貿(mào)易(上海)有限公司，CEA測定試劑盒：雅培貿(mào)易(上海)有限公司，CYFRA211定量測定試劑盒：羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司。

1.2.2EGFR基因檢測：采集受檢者靜脈血3ml于含抗凝劑的采血管中，采用安捷倫公司Mx3000P實(shí)時熒光定量PCR儀及人類EGFR基因突變檢測試劑盒(熒光PCR法)(廈門艾德生物醫(yī)藥科技股份有限公司)鑒定EGFR基因型，所有操作及結(jié)果判讀均嚴(yán)格按照試劑和儀器說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組血清CA125、CYFRA211和CEA水平

肺癌組、良性疾病組以及對照組CA125、CYFRA211與CEA的水平如表1所示。與對照組比較，肺癌組和良性疾病組CA125水平均升高(Z=-8.862、-6.581，P均<0.01)，肺癌組與良性疾病組CA125水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.239，P>0.05)。與對照組比較，肺癌組和良性疾病組CYFRA211水平均升高(Z=-9.349、-3.029，P均<0.01)，肺癌組CYFRA211水平較良性疾病組升高(Z=-6.256，P<0.01)。與對照組比較，肺癌組和良性疾病組CEA水平均升高(Z=-9.941、-2.718，P均<0.01)，肺癌組CEA水平較良性疾病組升高(Z=-7.089，P<0.01)。

表1 肺癌組、良性疾病組、對照組CA125、CYFRA211和CEA水平[P50(P25，P75)]

2.2 ROC曲線分析血清CA125、CYFRA211和CEA水平對肺癌的診斷價值

ROC曲線分析顯示，單項(xiàng)指標(biāo)檢測中，CEA對肺癌診斷的準(zhǔn)確性最高(AUC最大)，而CA125對肺癌診斷的準(zhǔn)確性最低；聯(lián)合檢測CA125、CYFRA211和CEA能明顯提高肺癌診斷的準(zhǔn)確性。見圖1、表2。

表2 血清CA125、CYFRA211和CEA檢測對肺癌的診斷性能評價

圖1 血清CA125、CYFRA211和CEA單項(xiàng)與聯(lián)合檢測診斷肺癌的ROC曲線

2.3 不同臨床病理參數(shù)患者CA125、CYFRA211和CEA水平比較

2.3.1年齡：不同年齡肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA的水平如表3所示。不同年齡組CA125、CYFRA211和CEA水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.3.2性別：不同性別肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA的水平如表4所示。肺癌男性組血清CYFRA211水平高于女性組(Z=-5.690，P<0.01)；兩組CA125和CEA水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.063、-0.687，P>0.05)。

表4 不同性別肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA水平[P50(P25，P75)]

2.3.3病理類型：肺腺癌組、肺鱗狀細(xì)胞癌組(由于只有10例小細(xì)胞肺癌、2例大細(xì)胞肺癌、4例腺鱗癌，例數(shù)較少統(tǒng)計(jì)學(xué)意義不大，故未將以上三種病理類型納入比較)CA125、CYFRA211和CEA的水平見表5。肺鱗狀細(xì)胞癌組CYFRA211水平高于肺腺癌組(Z=3.815，P=0.000<0.050)；肺腺癌組CEA水平高于肺鱗狀細(xì)胞癌組(Z=-2.509，P=0.012<0.050)；肺腺癌組與肺鱗狀細(xì)胞癌組CA125水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.739，P=0.460>0.050)。

表5 肺腺癌組與肺鱗狀細(xì)胞癌組肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA水平[P50(P25，P75)]

2.3.4TNM分期：肺癌組不同TNM分期CA125、CYFRA211與CEA的水平見表6。Ⅳ期CA125水平高于Ⅰ、Ⅱ期組(Z=-3.333，P<0.01)；Ⅲ期組CEA水平高于Ⅰ、Ⅱ期組(Z=-2.505，P<0.050)；CYFRA211在TNM分期比較中無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=2.530，P>0.05)。

2.3.5EGFR基因型：不同EGFR基因型組CA125、CYFRA211和CEA的水平見表7。EGFR基因野生型組CA125水平高于EGFR基因突變型組(Z=-2.017，P<0.05)；EGFR基因野生型組CYFRA211水平高于EGFR基因突變型組(Z=-2.104，P<0.05)；不同EGFR基因型組CEA比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Z=-1.324，P>0.05)。

表6 不同TNM分期肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA水平[P50(P25，P75)]

表7 不同EGFR基因型組CA125、CYFRA211和CEA水平[P50(P25，P75)]

2.4 不同臨床病理參數(shù)患者CA125、CYFRA211和CEA陽性率比較

2.4.1病理類型：肺腺癌組、肺鱗狀細(xì)胞癌組CA125、CYFRA211和CEA陽性率見表8。肺鱗癌組CYFRA211陽性率高于肺腺癌組(χ2=12.309，P<0.01)；肺腺癌組與肺鱗狀細(xì)胞癌組CEA陽性率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.319，P>0.05)；兩組CA125陰性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.077，P>0.05)。

表8 肺腺癌組與肺鱗狀細(xì)胞癌組CYFRA211、CEA陽性率(n，%)

2.4.2TNM分期：不同TNM分期CA125、CYFRA211和CEA陽性率如表9所示。Ⅲ期、Ⅳ期組CA125陽性率高于Ⅰ、Ⅱ期組(χ2=6.318，P<0.05；χ2=15.212，P<0.01)，Ⅲ期組與Ⅳ期組CA125陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.883，P>0.050)。Ⅲ期CEA陽性率高于Ⅰ、Ⅱ期組和Ⅳ期組(χ2=4.523，P<0.05；χ2=4.403，P<0.05)，Ⅰ、Ⅱ期與Ⅳ期CEA陽性率比較不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.019，P>0.05)；各組間CYFRA21陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.147，P>0.05)。

表9 不同TNM分期肺癌患者CA125、CYFRA211和CEA陽性率(n，%)

2.4.3EGFR基因型：不同EGFR基因型組CA125、CYFRA211和CEA的陽性率見表10。不同EGFR基因型組CA125、CYFRA211和CEA的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.191、1.331、0.834，P>0.05)。

表10 不同EGFR基因型組CA125、CYFRA211陽性率(n，%)

3 討 論

本研究通過回顧性分析肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物CA125、CYFRA211和CEA水平，探討腫瘤標(biāo)志物的水平在肺癌的診斷、分期、病理分型及治療中的價值。

CEA是一類酸性糖蛋白，為人類胚胎抗原，臨床常應(yīng)用CEA監(jiān)測結(jié)、直腸癌[4]，對肺癌診斷同樣存在臨床價值[5-8]，Nakamura等[9]研究表明CEA是肺癌有效的診斷指標(biāo)，且術(shù)前CEA水平可評估非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者預(yù)后。本研究顯示，CEA在肺癌患者水平明顯高于體檢健康者和肺部良性疾病患者，肺腺癌患者血清CEA水平高于肺鱗狀細(xì)胞癌患者，因此，CEA是肺癌尤其是肺腺癌的有效篩檢指標(biāo)。

CYFRA211是由CK19角蛋白的可溶性片段組成，大量研究表明，血清CYFRA211在NSCLC患者尤其是鱗狀細(xì)胞癌患者中異常升高，且高水平CYFRA211表示有疾病進(jìn)展或預(yù)后不良可能[9-13]。本研究顯示，男性肺癌患者血清CYFRA211水平顯著高于女性患者，且肺癌患者血清CYFRA211水平高于健康體檢者和肺部良性疾病患者，肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清CYFRA211水平與陽性率均顯著高于肺腺癌患者，本文結(jié)果與前人研究結(jié)論一致。

CA125是卵巢癌相關(guān)抗原[14]，有研究顯示CA125是肺癌的有效篩查指標(biāo)[15-17]，本研究中肺癌患者血清CA125水平顯著高于體檢健康人群，可用于肺癌篩查。

血清CEA、CYFRA211和CA125單項(xiàng)檢測可檢出肺癌，但ROC曲線顯示靈敏度均較低，診斷準(zhǔn)確性有限，而聯(lián)合檢測這三項(xiàng)指標(biāo)ROC曲線下面積升至0.866，靈敏度也由單項(xiàng)最高0.603升至0.769，明顯提高了肺癌檢出的靈敏度與診斷準(zhǔn)確性，有助于肺癌的早發(fā)現(xiàn)和早治療。

本研究顯示Ⅲ期肺癌患者血清CEA水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者，并且Ⅲ期肺癌患者血清CEA陽性率高于Ⅰ、Ⅱ期和Ⅳ期患者，故晚期肺癌患者血清CEA水平陽性率較高。Ⅳ期肺癌患者血清CA125水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者，且隨著TNM分期增長，CA125陽性率也隨之升高。Pollan 等[18]的研究顯示NSCLC患者術(shù)前血清CA125水平與預(yù)后相關(guān)，認(rèn)為血清CA125與肺癌轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性，隨著肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵犯范圍擴(kuò)大，血清CA125陽性率提高，其水平也隨之上升，對臨床監(jiān)測肺癌病情進(jìn)展、轉(zhuǎn)移有一定價值。Liang等[19]關(guān)于CA125與胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的研究認(rèn)為血清CA125水平升高與胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因遺傳改變一致，提示CA125很可能是轉(zhuǎn)移相關(guān)生物標(biāo)志物，與本研究結(jié)果一致。

肺癌患者EGFR基因型分為野生型與突變型，許多腫瘤中有突變型EGFR存在，EGFR基因編碼區(qū)的突變主要發(fā)生在外顯子18-21上，研究發(fā)現(xiàn)肺癌組織中存在EGFR的過表達(dá)，肺癌EGFR基因是否突變關(guān)乎患者治療方案的制定[20-23]。本研究顯示EGFR基因野生型患者CA125和CYFRA211水平均顯著高于EGFR基因突變型患者，即CA125和CYFRA211水平偏低的肺癌患者其EGFR基因?yàn)橥蛔冃偷目赡苄愿?。NSCLC約占所有肺癌病理類型的85%，而其中70%以上的患者確診時已處晚期，傳統(tǒng)療效不佳，肺癌患者若CA125和CYFRA211血清水平偏低建議進(jìn)行EGFR基因檢測，進(jìn)而使用TKI療法靶向治療以期提高肺癌患者生活質(zhì)量。

綜上所述，血清CYFRA211水平在男性肺癌患者中顯著高于女性肺癌患者；聯(lián)合檢測CEA、CYFRA211和CA125相較于各指標(biāo)單項(xiàng)檢測更有利于肺癌的早期檢出和準(zhǔn)確診斷；高水平CEA提示肺腺癌可能性，而高水平CYFRA211提示肺鱗癌可能性；CA125和CEA水平與肺癌TNM分期有關(guān)，可應(yīng)用于肺癌病情進(jìn)展監(jiān)測、判斷轉(zhuǎn)移情況；肺癌患者血清CA125和CYFRA211水平偏低建議進(jìn)行EGFR基因檢測后使用TKI療法。