張霞

隨著人類生存環(huán)境污染的加劇，肺癌已成為我國發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤，且呈逐年升高趨勢，因肺癌致死的人數(shù)占癌癥死亡總?cè)藬?shù)的22%[1]。非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌中最常見的類型(約占80%)，發(fā)病隱匿，多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時腫瘤已進展至中晚期[2]，而中晚期NSCLC的治療以放化療為主[3]。因放化療不良反應(yīng)較多，部分伴發(fā)基礎(chǔ)疾病的患者耐受性較差，預(yù)后不佳。隨著轉(zhuǎn)化醫(yī)學與精準診療的發(fā)展，生物療法逐漸應(yīng)用于臨床，在取得顯著抗腫瘤效果的同時，減輕了不良反應(yīng)。有研究顯示，采用樹突狀細胞誘發(fā)殺傷細胞(Dendritic cell Cytokine induced killer cell, DC-CIK) 的生物療法治療NSCLC效果顯著[4]。為此，本研究試探討化療聯(lián)合DC-CIK細胞生物療法治療中晚期NSCLC的臨床效果。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月—2015年6月我院收治的中晚期NSCLC患者86例。納入標準：年齡18～80歲；不耐受或拒絕手術(shù)者；綜合身體狀況卡氏功能評分≥60分；臨床資料完整，可配合隨訪。排除標準：嚴重肝腎功能不全者；妊娠或哺乳期女性；合并其他重要臟器功能不全或惡性腫瘤者；器官移植，服用免疫抑制劑者；生物制劑過敏者；胸腔大量積液，出現(xiàn)廣泛轉(zhuǎn)移者。86例患者依據(jù)治療方案的不同分為對照組和觀察組各43例。對照組：男23例、女20例；年齡42～74歲，平均(56.58±8.21)歲；臨床分期，ⅢA期13例、ⅢB期16例、Ⅳ期14例；病理類型，腺癌20例、鱗癌14例、大細胞癌5例、其他4例。觀察組：男24例、女19例；年齡45～78歲，平均(57.74±7.86)歲；臨床分期，ⅢA期15例、ⅢB期14例、Ⅳ期14例；病理類型，腺癌18例，鱗癌15例，大細胞癌、其他各5例。兩組年齡、性別、臨床分期、病理類型差異無統(tǒng)計學意義(t值為0.584，χ2值分別為0.047、0.276、0.192，P值均＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽字。

1.2 治療方法

1.2.1 DC-CIK細胞制備 每次化療前取患者外周血50 mL，抗凝處理后收集單核細胞。分離后的單核細胞于RPMI-1640培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，在37 ℃、5% CO2條件下孵育2 h，收集非貼壁細胞用于CIK培養(yǎng)、貼壁細胞用于DC培養(yǎng)。非貼壁細胞提取后，調(diào)節(jié)細胞密度為106個/mL，依次加入干擾素-γ，IL-2和抗CD3抗體進行體外誘導成熟處理。DC主要采用粒細胞集落刺激因子、IL-4以及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)進行體外誘導處理。DC細胞和CIK細胞按1∶5的比例共同培養(yǎng)5～7 d，待細胞數(shù)目達到5×109后采集細胞使用。

1.2.2 治療方案 兩組患者均未接受放療。對照組采用常規(guī)化療方案：順鉑+紫杉醇靜脈滴注，第1天，紫杉醇注射液150 mg/m2加入到500 mL葡萄糖溶液(0.05 g/mL)中靜脈滴注；第1～3天，順鉑75 mg/m2溶于0.9%氯化鈉溶液靜脈滴注。觀察組在對照組化療基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用回輸DC-CIK細胞療法：培養(yǎng)2周的DC-CIK細胞離心收集和洗滌處理，以100 mL 0.9%氯化鈉溶液重懸處理，2 h內(nèi)靜脈滴注回輸。兩組患者在治療期間密切監(jiān)測全身狀態(tài)，28 d為1個療程，連續(xù)治療2個療程。

1.3 觀察指標 觀察并比較兩組的治療效果，以及治療期間患者白細胞減少癥等不良反應(yīng)發(fā)生情況，治療前后TNF-α、CD4+和CD4+/CD8+免疫指標水平。

1.4 療效判定標準 兩組患者療程結(jié)束后判定治療效果，療效評價標準分為完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定及進展4個級別。完全緩解：臨床癥狀和病灶均消失。部分緩解：臨床癥狀有所緩解，腫瘤體積縮小。穩(wěn)定：臨床癥狀和腫瘤大小無變化。進展：腫瘤進展惡化，出現(xiàn)新病灶?？傆行?(完全緩解病例數(shù)+部分緩解病例數(shù))/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件分析和處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差表示，符合正態(tài)分布且方差齊的數(shù)據(jù)比較應(yīng)用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組療效比較 觀察組完全緩解2例、部分緩解21例、穩(wěn)定及進展20例，總有效率53.5%；對照組部分緩解13例、穩(wěn)定及進展30例，總有效率30.2%；兩組總有效率差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=4.778，P＜0.05)。

2.2 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 觀察組有17例出現(xiàn)不良反應(yīng)，其中白細胞減少癥3例，胃腸道反應(yīng)和骨髓抑制各2例，肝腎功能損傷10例，不良反應(yīng)發(fā)生率39.53%；對照組有15例出現(xiàn)不良反應(yīng)，其中白細胞減少癥7例，胃腸道反應(yīng)4例，周圍神經(jīng)毒性、骨髓抑制各2例，不良反應(yīng)發(fā)生率34.88%；觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率略高于對照組但差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.199，P＞0.05)。

表1 對照組與觀察組治療前后各項免疫指標水平比較

2.3 兩組治療前后各項免疫指標水平比較 治療前兩組患者TNF-α、CD4+、CD4+/CD8+水平差異無統(tǒng)計學意義(t值分別為1.364、0.173和1.297，P值均＞0.05。治療后兩組患者各項免疫指標均得到改善，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。治療后觀察組各項免疫指標改善程度均優(yōu)于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義(t值分別為4.378、5.095和4.336，P值均＜0.05)。見表1。

3 討論

近年來，肺癌的發(fā)病率和病死率已躍居世界惡性腫瘤的第1位，NSCLC是肺癌最常見的組織類型，由于NSCLC的發(fā)病比較隱匿性，多數(shù)NSCLC患者確診時已進展到Ⅲ期或Ⅳ期，預(yù)后多不佳[5]，中晚期NSCLC的治療以化療為主。臨床上用于治療NSCLC的化療方案和化療藥物較多，如紫杉類、順鉑、多西他賽、吉西他濱等是一線常用藥物，在延長患者生存時間、提高生活質(zhì)量等方面均取得了較為理想的效果[6]。

中晚期NSCLC患者身體各項機能較差，多合并營養(yǎng)不良，加之化療帶來的胃腸反應(yīng)等因素影響，患者免疫機能相對較差，無法耐受長時間、大劑量的放化療[7]。生物治療中的細胞治療主要通過向患者體內(nèi)回輸免疫活性細胞，達到增強機體免疫功能，從而實現(xiàn)抗腫瘤的目的。針對肺癌的免疫療法多采用淋巴因子激活的殺傷細胞、腫瘤浸潤淋巴細胞及DC-CIK細胞。目前，生物治療已受到越來越多腫瘤界研究者的重視，越來越多的生物治療新技術(shù)逐漸應(yīng)用于臨床抗腫瘤治療中[8]。DC細胞可從非免疫組織轉(zhuǎn)移到淋巴器官，刺激初始T細胞活化增殖，此外DC細胞可參與抗原呈遞，促進輔助T細胞和殺傷性T細胞(CTL)增殖。CIK對臨床上多種腫瘤細胞具有殺傷作用，可促進腫瘤患者免疫重建，清除放化療后殘余癌細胞或微小病灶。相關(guān)研究顯示，DC與CIK聯(lián)合培養(yǎng)，DC可激活CIK的活性、促進CIK成熟，有利于緩解腫瘤患者的T細胞免疫缺陷，發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)[9]。本研究采用順鉑聯(lián)合紫杉醇化療方案，順鉑是一類廣譜抗癌藥物，作用于核酸嘧啶以及嘌呤堿基，抑制DNA的復制，加快腫瘤細胞凋亡；紫杉醇屬于細胞周期特異性抗腫瘤藥物，可抑制細胞有絲分裂，促進細胞凋亡，抑制細胞增殖與侵襲。臨床研究顯示，順鉑聯(lián)合紫杉醇不易產(chǎn)生交叉耐藥現(xiàn)象，在不增加藥物毒性的前提下，提高了抗腫瘤效果[10]。

本研究的對照組NSCLC患者接受常規(guī)化療方案，觀察組NSCLC患者在對照組化療方案基礎(chǔ)上聯(lián)合DC-CIK治療，兩組接受相同療程治療后，結(jié)果顯示：觀察組治療總有效率高于對照組，且觀察組治療后各項免疫指標改善程度優(yōu)于對照組，而兩組在治療期間的不良反應(yīng)發(fā)生率無差異，上述結(jié)果提示化療聯(lián)合DC-CIK治療中晚期NSCLC，能夠改善患者免疫功能、提高治療效果，且未見不良反應(yīng)增加。綜上，對于中晚期NSCLC患者，如不能耐受或不接受手術(shù)治療，可以考慮在常規(guī)化療方案基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用DC-CIK細胞療法。