牛葉青， 張 芳， 李柳燕， 金奇江， 王彥杰， 徐迎春

(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院， 江蘇 南京 210095)

荷花(NelumbonuciferaGaertn.)隸屬于蓮科(Nelumbonaceae)蓮屬(NelumboAdans.)，又稱(chēng)蓮花、芙蓉、水芙蓉，為多年生大型挺水草本植物，其外形高雅圣潔、花型大、葉片翠綠，觀賞價(jià)值極高，常作為園林景觀植物被廣泛應(yīng)用于濕地公園、觀賞庭院、城市公園和靜態(tài)水景布置[1]。荷花的花和葉具有獨(dú)特的濃香，自古以來(lái)就被稱(chēng)為“熏風(fēng)第一花”。荷花已有1 300余個(gè)品種，涵蓋了紅色、粉色、淡紫堇色、白色、黃色、復(fù)色和灑錦色7種花色，單瓣、半重瓣、重瓣、重臺(tái)和千瓣5種瓣型[1]。目前，荷花的育種目標(biāo)重點(diǎn)集中在花色和瓣型，忽視了對(duì)花香這一性狀的定向選育。隨著荷花鮮切花和盆栽荷花市場(chǎng)的發(fā)展，以及人們對(duì)芳香植物的喜愛(ài)，香型荷花市場(chǎng)需求大，培育不同香型的荷花品種將成為未來(lái)重要的育種方向。

花香被譽(yù)為“花卉的靈魂”，由花朵釋放的一系列低相對(duì)分子質(zhì)量揮發(fā)性成分混合而成[2-3]。對(duì)于花朵而言，花香是重要的觀賞性狀之一，在很大程度上影響著植物的觀賞價(jià)值，也是觀賞植物的育種目標(biāo)之一。從植物花朵中提取的天然香料，不僅在日化、食品和醫(yī)療領(lǐng)域中有應(yīng)用，而且在美容保健、芳香療法、消毒滅菌和空氣清新等方面應(yīng)用廣泛[4]。近年來(lái)花香成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，據(jù)Knudsen等[5]統(tǒng)計(jì)，已鑒定出的花香成分約1 719種，其中12種普遍存在于種子植物中。國(guó)內(nèi)學(xué)者在陸生芳香植物的花香成分組成方面也展開(kāi)了研究，如月季花(RosachinensisJacq.)[6]、杜鵑(RhododendronsimsiiPlanch.)[7]、梅(ArmeniacamumeSieb.)[8]、茉莉花〔Jasminumsambac(Linn.) Ait.〕[9]、百合(Liliumbrowniivar.viridulumBaker)[10]、桂花〔Osmanthusfragrans(Thunb.) Lour.〕[11]、文心蘭(Onicidiumspp.)[12]和刺槐屬(RobiniaLinn.)[13]等，而對(duì)水生花卉花香成分的研究較少，徐雙雙等[14]對(duì)荷花品種‘洪湖紅蓮’(‘Honghuhonglian’)、‘紅萬(wàn)萬(wàn)’(‘Hongwanwan’)、‘紅牡丹’(‘Hongmudan’)、‘白萬(wàn)萬(wàn)’(‘Baiwanwan’)和‘黃牡丹’(‘Huangmudan’)的揮發(fā)性成分進(jìn)行了測(cè)定分析，但側(cè)重于實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化；鄧嬌等[15]測(cè)定了荷花品種‘白鴿’(‘Baige’)、‘白海蓮’(‘Baihailian’)、‘野紅蓮’(‘Yehonglian’)和‘磨山紅’(‘Moshanhong’)，美洲黃蓮(NelumboluteaPters)品種‘晶雀’(‘Jingque’)以及荷花與美洲黃蓮的雜交品種‘黃牡丹’花瓣中揮發(fā)性成分的組成和含量，認(rèn)為揮發(fā)性成分的差異與荷花種源密切相關(guān)。

鑒于前人的研究選取的荷花品種和花色相對(duì)較少，本研究選取20個(gè)典型的觀賞型荷花品種，涵蓋紅色、粉色、白色、黃色和復(fù)色5種花色以及單瓣、重瓣、半重瓣和重臺(tái)4種瓣型，利用頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用(HS-SPME-GC-MS)技術(shù)對(duì)其花瓣中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，檢測(cè)揮發(fā)性成分的種類(lèi)和相對(duì)含量，并分析揮發(fā)性成分的種類(lèi)和相對(duì)含量在不同品種間的異同；在此基礎(chǔ)上，根據(jù)其中的釋香成分，采用聚類(lèi)分析法將荷花20個(gè)品種進(jìn)行分組，分析組內(nèi)荷花品種中揮發(fā)性成分組成的相似性及組間差異，為后續(xù)荷花芳香產(chǎn)品深加工的研究開(kāi)發(fā)提供理論支持，并為培育荷花不同香型品種奠定基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試荷花20個(gè)品種采自南京市藝蓮苑花卉有限公司。于2016年7月25日至7月27日清晨5：30至6：00采集荷花各品種盛花期花瓣，每個(gè)品種采集3朵花。供試荷花20個(gè)品種的花色和瓣型見(jiàn)表1。

1.2 方法

用電子天平(精度0.01 g)分別稱(chēng)取荷花各品種花瓣2.50 g，分別放置在40 mL帶有塑料瓶蓋的棕色進(jìn)樣瓶中，塑料瓶蓋上覆有聚四氟乙烯隔膜。為了使揮發(fā)性成分得到最大的釋放，采樣后將棕色進(jìn)樣瓶置于45 ℃的水浴鍋中水浴1 h，然后以頂空固相微萃取方式對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行萃取收集[16]。

表1供試荷花20個(gè)品種的花色和瓣型

Table1Flowercolorandpetaltypeof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.tested

編號(hào)No.品種Cultivar花色Flower color瓣型Petal type116-A10-1紅色Red單瓣Single2稼先蓮Jiaxianlian紅色Red單瓣Single3中國(guó)紅·北京Zhongguohong Beijing紅色Red單瓣Single416-A10-30紅色Red重瓣Double5子夜Ziye紅色Red重瓣Double6 中國(guó)紅·井岡山Zhongguohong Jinggangshan紅色Red 半重瓣Semidouble 7紅臺(tái)蓮Hongtailian紅色Red重臺(tái)Duplicated816-A10-27粉色Pink單瓣Single927-1粉色Pink重瓣Double1039-1粉色Pink半重瓣Semidouble1116-A9-55白色White單瓣Single12金太陽(yáng)Jintaiyang黃色Yellow重瓣Double13珠峰翠影Zhufengcuiying白色White重臺(tái)Duplicated1416-A9-49白色White重瓣Double15秣陵秋色Molingqiuse黃色Yellow重瓣Double16艾江南Aijiangnan黃色Yellow半重瓣Semidouble17逸仙蓮Yixianlian復(fù)色Multi-color單瓣Single18伯里夫人Bolifuren復(fù)色Multi-color重瓣Double19大灑錦Dasajin復(fù)色Multi-color重瓣Double2016-A9-44復(fù)色Multi-color重臺(tái)Duplicated

采用Agilent GC6890N/MS5973氣質(zhì)聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent公司)進(jìn)行GC-MS分析。HP-5彈性石英纖維毛細(xì)管柱(30 m×0.1 mm×0.33 μm，美國(guó)Agilent公司)，載氣為高純氮?dú)?，流? mL·min-1；升溫程序：初始溫度40 ℃，保持2 min；以4 ℃·min-1升溫至110 ℃，保持2 min；以3 ℃·min-1升溫至150 ℃，保持2 min；以5 ℃·min-1升溫至200 ℃，保持4 min。進(jìn)樣方式：不分流。質(zhì)譜條件：離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；電離方式EI；接口溫度260 ℃；電子能量70 eV；全掃描模式，掃描范圍35～540 amu。進(jìn)樣前需將固相微萃取纖維頭在氣質(zhì)聯(lián)用儀的進(jìn)樣口老化，250 ℃老化1 h，載氣流速0.9 mL·min-1。

1.3 數(shù)據(jù)分析

將GC-MS分析得到的總離子流圖的各峰在標(biāo)準(zhǔn)NIST98譜圖庫(kù)中檢索，并與標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照，對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒定。參考王學(xué)敬等[17]的方法，采用峰面積歸一化法計(jì)算揮發(fā)性成分的相對(duì)含量。

采用EXCEL 2003軟件對(duì)揮發(fā)性成分的數(shù)量和相對(duì)含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用IBM SPSS Statistics 20軟件基于釋香成分對(duì)供試荷花品種進(jìn)行聚類(lèi)分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 荷花不同品種花瓣揮發(fā)性成分的分析

從荷花20個(gè)品種花瓣中共檢測(cè)出揮發(fā)性成分69個(gè)，包括烷烴類(lèi)化合物18個(gè)，烯烴類(lèi)化合物24個(gè)，醇類(lèi)化合物8個(gè)，酯類(lèi)化合物6個(gè)，酮類(lèi)、醛類(lèi)、胺類(lèi)和酸類(lèi)化合物各2個(gè)，其他化合物5個(gè)，其中，烷烴類(lèi)、烯烴類(lèi)、醇類(lèi)和酯類(lèi)化合物及其相對(duì)含量分別見(jiàn)表2、表3、表4和表5。結(jié)果顯示：大多數(shù)荷花品種花瓣中檢出較多的烷烴類(lèi)、烯烴類(lèi)和醇類(lèi)化合物，而酯類(lèi)、酮類(lèi)、醛類(lèi)和胺類(lèi)化合物較少，如酮類(lèi)化合物僅在‘稼先蓮’(‘Jiaxianlian’)、‘39-1’、‘16-A9-49’、‘秣陵秋色’(‘Molingqiuse’)和‘大灑錦’(‘Dasajin’)中檢出，醛類(lèi)化合物僅在‘中國(guó)紅·北京’(‘Zhongguohong Beijing’)、‘紅臺(tái)蓮’(‘Hongtailian’)、‘珠峰翠影’(‘Zhufengcuiying’)和‘秣陵秋色’中檢出，胺類(lèi)化合物僅在‘39-1’和‘大灑錦’中檢出。

荷花不同品種間花瓣中揮發(fā)性成分的數(shù)量和相對(duì)含量存在差異?！鬄㈠\’花瓣中揮發(fā)性成分?jǐn)?shù)量最多(27個(gè))；‘16-A10-1’和‘16-A10-27’花瓣中揮發(fā)性成分?jǐn)?shù)量也較多，分別為21和20種；其他品種花瓣中揮發(fā)性成分?jǐn)?shù)量為11～19。‘大灑錦’花瓣中揮發(fā)性成分的相對(duì)含量最高，為93.58%；‘伯里夫人’(‘Bolifuren’)和‘子夜’(‘Ziye’)花瓣中揮發(fā)性成分的相對(duì)含量也較高，分別為91.92%和91.79%；‘中國(guó)紅·井岡山’(‘Zhongguohong Jinggangshan’)和‘16-A9-55’花瓣中揮發(fā)性成分的相對(duì)含量較低，分別為81.04%和82.16%。

表2荷花20個(gè)品種花瓣中烷烴類(lèi)化合物及其相對(duì)含量1)

Table2Alkanesandtheirrelativecontentsinpetalsof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.1)

化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars12345678910decamethyl cyclopentasiloxane——————————n-tridecane0.290.60—0.87—1.67—1.710.450.29n-hexadecane14.5338.6312.203.0739.7431.39—10.7235.31—n-eicosane1.180.349.643.760.390.63——0.662.436-ethyl-2-methyl decane——————0.34———2-methyl heptadecane——————————dodecamethyl pentasiloxane——————————n-pentadecane3.214.9932.8448.541.478.4716.3925.5612.5642.66heptamethyl nonane——————————n-tetradecane ——————————decamethyl terasiloxane——————————1-acetoxyacetyl nonadecane————————0.23—2,6-dimethyl heptadecane———————0.52——10,10-dimethyl-2,6-bicyclo[7.2.0]hendecane————1.06—————1,3,3-trimethyl-tricyclo[2.2.1.0(2,6)]heptane——————2.15———dodecamethyl cyclohexasiloxane——————————tetracomethyl cyclododecasiloxane——————————octadecamethyl cyclononasiloxane——————————化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars11121314151617181920decamethyl cyclopentasiloxane——0.44—0.92—0.26—0.42—n-tridecane1.08—0.481.71—0.25—0.940.670.60n-hexadecane21.3635.2349.3920.2031.4224.1524.7411.5432.9212.97n-eicosane6.63—2.640.25———3.482.535.386-ethyl-2-methyl decane—0.29————————2-methyl heptadecane————0.20—————dodecamethyl pentasiloxane——0.24—0.52—————n-pentadecane13.723.474.64—23.5210.4034.9131.91—19.78heptamethyl nonane————0.23—————n-tetradecane ——————0.46———decamethyl terasiloxane——————2.75———1-acetoxyacetyl nonadecane——————————2,6-dimethyl heptadecane——————————10,10-dimethyl-2,6-bicyclo[7.2.0]hendecane—————2.08————1,3,3-trimethyl-tricyclo[2.2.1.0(2,6)]heptane————————0.31—dodecamethyl cyclohexasiloxane————————0.98—tetracomethyl cyclododecasiloxane————8.27———0.79—octadecamethyl cyclononasiloxane————————0.91—

1)1： ‘16-A10-1’； 2： ‘稼先蓮’‘Jiaxianlian’； 3： ‘中國(guó)紅·北京’‘Zhongguohong Beijing’； 4： ‘16-A10-30’； 5： ‘子夜’‘Ziye’； 6： ‘中國(guó)紅·井岡山’‘Zhongguohong Jinggangshan’； 7： ‘紅臺(tái)蓮’‘Hongtailian’； 8： ‘16-A10-27’； 9： ‘27-1’； 10： ‘39-1’； 11： ‘16-A9-55’； 12： ‘金太陽(yáng)’‘Jintaiyang’； 13： ‘珠峰翠影’‘Zhufengcuiying’； 14： ‘16-A9-49’； 15： ‘秣陵秋色’‘Molingqiuse’； 16： ‘艾江南’‘Aijiangnan’； 17： ‘逸仙蓮’‘Yixianlian’； 18： ‘伯里夫人’‘Bolifuren’； 19： ‘大灑錦’‘Dasajin’； 20： ‘16-A9-44’. —： 未檢出Undetected.

荷花20個(gè)品種中，‘稼先蓮’、‘子夜’、‘中國(guó)紅·井岡山’、‘27-1’、‘16-A9-55’、‘金太陽(yáng)’(‘Jintaiyang’)、‘珠峰翠影’、‘16-A9-49’、‘秣陵秋色’和‘大灑錦’花瓣中正十六烷的相對(duì)含量最高，為這些品種的主要揮發(fā)性成分，相對(duì)含量分別為38.63%、39.74%、31.39%、35.31%、21.36%、35.23%、49.39%、20.20%、31.42%和32.92%；‘中國(guó)紅·北京’、‘16-A10-30’、‘16-A10-27’、‘39-1’、‘逸仙蓮’(‘Yixianlian’)、‘伯里夫人’和‘16-A9-44’花瓣中正十五烷的相對(duì)含量最高，為這些品種的主要揮發(fā)性成分，相對(duì)含量分別為32.84%、48.54%、25.56%、42.66%、34.91%、31.91%和19.78%；‘16-A10-1’花瓣中1-十六烯的相對(duì)含量最高，為30.09%；‘紅臺(tái)蓮’花瓣中α-石竹烯的相對(duì)含量最高，為32.85%；‘艾江南’(‘Aijiangnan’)花瓣中1-石竹烯的相對(duì)含量最高，為26.24%。

表3荷花20個(gè)品種花瓣中烯烴類(lèi)化合物及其相對(duì)含量1)

Table3Alkenesandtheirrelativecontentsinpetalsof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.1)

化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars123456789104-isopropylidene-1-methyl cyclohexene0.17—————————pinene0.29————3.293.15———sabinene4.090.383.96—4.365.973.680.49—2.21myrcene0.532.14——0.642.190.266.330.52—α-terpinene0.56—0.67—1.08—0.690.42—0.411-caryophyllene—0.610.30—16.720.724.489.012.29—β-pinene———————0.33——D-limonene————0.85—0.442.910.34—3,6,6-trimethylbicyclo[3.1.1]hept-2-ene——0.82———————γ-terpinene0.35—————————1-hexadecene30.09—————————2-pinene—————4.29————cinene—0.69————————α-caryophyllene0.22———2.27—32.851.06——squalane-(E,E,E,E)——————————7-hexadecylene-(E)5.258.895.849.595.406.846.423.8411.87—5-octadecylene-(Z)10.7210.702.288.94—2.91—1.012.646.779-octadecylene-(Z)——————————4,11,11-trimethyl-8-methylidenebicyclo[7.2.0]undec-4-ene-[1R-(1R?,4Z,9S?)]1.44 — — 0.31 — — — — — — cubebene——————————8-heptadecene——————5.331.20—0.952-methyl-7-hexadecylene-(Z)————————0.12—3,6-dihydro-4-(4-methyl-3-phenyl)-1,1-thiophene————0.642.190.26———4-methyl-3-(1-methylethylidene)cyclohexene———————0.49——化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars111213141516171819204-isopropylidene-1-methylcyclohexene———0.73————1.110.53pinene0.49——2.81—0.55——1.750.53sabinene4.213.17—6.76————7.085.42myrcene0.356.65—0.93————1.120.40α-terpinene1.450.411.300.770.86—10.51—0.980.631-caryophyllene———0.784.5526.24———0.51β-pinene——————————D-limonene—2.40————————3,6,6-trimethylbicyclo[3.1.1]hept-2-ene——————————γ-terpinene——————————1-hexadecene——————————2-pinene——————————cinene——————————α-caryophyllene0.33—0.30—0.325.502.03———

續(xù)表3 Table 3 (Continued)squalane-(E,E,E,E)——3.90———————7-hexadecylene-(E)13.8813.54—14.48—2.56—21.955.8716.065-octadecylene-(Z)3.53—4.478.09—0.51—6.264.518.189-octadecylene-(Z)————————4.36—4,11,11-trimethyl-8-methylidenebicyclo[7.2.0]undec-4-ene-[1R-(1R?,4Z,9S?)]2.85 0.08 4.83 — — — — — — — cubebene——————0.32———8-heptadecene————0.650.850.702.62——2-methyl-7-hexadecylene-(Z)——————————3,6-dihydro-4-(4-methyl-3-phenyl)-1,1-thiophene0.35—————————4-methyl-3-(1-methylethylidene)cyclohexene——————————

1)1： ‘16-A10-1’； 2： ‘稼先蓮’‘Jiaxianlian’； 3： ‘中國(guó)紅·北京’‘Zhongguohong Beijing’； 4： ‘16-A10-30’； 5： ‘子夜’‘Ziye’； 6： ‘中國(guó)紅·井岡山’‘Zhongguohong Jinggangshan’； 7： ‘紅臺(tái)蓮’‘Hongtailian’； 8： ‘16-A10-27’； 9： ‘27-1’； 10： ‘39-1’； 11： ‘16-A9-55’； 12： ‘金太陽(yáng)’‘Jintaiyang’； 13： ‘珠峰翠影’‘Zhufengcuiying’； 14： ‘16-A9-49’； 15： ‘秣陵秋色’‘Molingqiuse’； 16： ‘艾江南’‘Aijiangnan’； 17： ‘逸仙蓮’‘Yixianlian’； 18： ‘伯里夫人’‘Bolifuren’； 19： ‘大灑錦’‘Dasajin’； 20： ‘16-A9-44’. —： 未檢出Undetected.

表4荷花20個(gè)品種花瓣中醇類(lèi)化合物及其相對(duì)含量1)

Table4Alcoholsandtheirrelativecontentsinpetalsof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.1)

化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars123456789101,8-cineole4.43—3.880.54—————1.40linalool—1.040.59—————2.34—4-terpineol0.73—0.30—1.670.390.850.56—0.75α-terpineol0.425.43——4.011.601.2913.425.720.29linolenyl alcohol—0.09————————9-octadecenyl tetradecalcohol-(Z)8.9912.15———7.614.001.48——8-dodecene-1-ol-(Z)————0.75—————9-hexadecenoic-1-ol-(E)——————————化合物Compound不同品種花瓣中各化合物的相對(duì)含量/% Relative content of each compound in petals of different cultivars111213141516171819201,8-cineole3.10——6.020.900.55—0.406.165.37linalool—0.16——————3.14—4-terpineol0.330.75—1.322.14———3.051.07α-terpineol0.210.044.546.080.36———6.100.47linolenyl alcohol———————0.07——9-octadecenyl tetradecalcohol-(Z)———11.59—3.16—8.00——8-dodecene-1-ol-(Z)——————————9-hexadecenoic-1-ol-(E)——————0.31———

1)1： ‘16-A10-1’； 2： ‘稼先蓮’‘Jiaxianlian’； 3： ‘中國(guó)紅·北京’‘Zhongguohong Beijing’； 4： ‘16-A10-30’； 5： ‘子夜’‘Ziye’； 6： ‘中國(guó)紅·井岡山’‘Zhongguohong Jinggangshan’； 7： ‘紅臺(tái)蓮’‘Hongtailian’； 8： ‘16-A10-27’； 9： ‘27-1’； 10： ‘39-1’； 11： ‘16-A9-55’； 12： ‘金太陽(yáng)’‘Jintaiyang’； 13： ‘珠峰翠影’‘Zhufengcuiying’； 14： ‘16-A9-49’； 15： ‘秣陵秋色’‘Molingqiuse’； 16： ‘艾江南’‘Aijiangnan’； 17： ‘逸仙蓮’‘Yixianlian’； 18： ‘伯里夫人’‘Bolifuren’； 19： ‘大灑錦’‘Dasajin’； 20： ‘16-A9-44’. —： 未檢出Undetected.

表5荷花20個(gè)品種花瓣中酯類(lèi)化合物及其相對(duì)含量1)

Table5Estersandtheirrelativecontentsinpetalsof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.1)

1)1： ‘16-A10-1’； 2： ‘稼先蓮’‘Jiaxianlian’； 3： ‘中國(guó)紅·北京’‘Zhongguohong Beijing’； 4： ‘16-A10-30’； 5： ‘子夜’‘Ziye’； 6： ‘中國(guó)紅·井岡山’‘Zhongguohong Jinggangshan’； 7： ‘紅臺(tái)蓮’‘Hongtailian’； 8： ‘16-A10-27’； 9： ‘27-1’； 10： ‘39-1’； 11： ‘16-A9-55’； 12： ‘金太陽(yáng)’‘Jintaiyang’； 13： ‘珠峰翠影’‘Zhufengcuiying’； 14： ‘16-A9-49’； 15： ‘秣陵秋色’‘Molingqiuse’； 16： ‘艾江南’‘Aijiangnan’； 17： ‘逸仙蓮’‘Yixianlian’； 18： ‘伯里夫人’‘Bolifuren’； 19： ‘大灑錦’‘Dasajin’； 20： ‘16-A9-44’. —： 未檢出Undetected.

2.2 荷花不同品種花瓣中釋香成分的比較

烯烴類(lèi)、醇類(lèi)、酯類(lèi)、酮類(lèi)和醛類(lèi)化合物為釋香成分。荷花20個(gè)品種花瓣中釋香成分共有42個(gè)，各品種花瓣中釋香成分的數(shù)量和相對(duì)含量見(jiàn)表6。結(jié)果顯示：‘16-A10-1’和‘紅臺(tái)蓮’花瓣中釋香成分有15個(gè)，‘16-A10-27’、‘16-A9-55’和‘大灑錦’花瓣中釋香成分有14個(gè)，‘16-A9-49’花瓣中釋香成分有13個(gè)，‘子夜’和‘16-A9-44’花瓣中釋香成分有12個(gè)，‘稼先蓮’、‘中國(guó)紅·北京’和‘中國(guó)紅·井岡山’花瓣中釋香成分有11個(gè)，‘27-1’和‘金太陽(yáng)’花瓣中釋香成分有10個(gè)，‘39-1’和‘秣陵秋色’花瓣中釋香成分有9個(gè)，‘珠峰翠影’和‘艾江南’花瓣中釋香成分有8個(gè)，‘逸仙蓮’和‘伯里夫人’花瓣中釋香成分有6個(gè)，‘16-A10-30’花瓣中釋香成分有5個(gè)。

2.2.1 烯烴類(lèi)化合物的比較 由表3和表6可見(jiàn)：荷花20個(gè)品種花瓣中烯烴類(lèi)化合物共有24個(gè)?！?6-A10-1’和‘紅臺(tái)蓮’花瓣中烯烴類(lèi)化合物的相對(duì)含量較高，分別為53.70%和57.54%，‘16-A10-1’花瓣中烯烴類(lèi)化合物有11個(gè)，其中，1-十六烯的相對(duì)含量最高，為30.09%，且僅存在于該品種中；‘紅臺(tái)蓮’花瓣中烯烴類(lèi)化合物有10個(gè)，其中，α-石竹烯的相對(duì)含量最高，為32.85%，而該化合物在其他品種中相對(duì)含量較低或未檢出；‘秣陵秋色’花瓣中烯烴類(lèi)化合物的相對(duì)含量最低，僅6.39%?！?6-A10-27’和‘16-A9-55’花瓣中烯烴類(lèi)化合物也較多，分別有11和9個(gè)，相對(duì)含量分別為27.08%和27.43%?！?7-1’、‘16-A9-55’、‘16-A9-49’、‘金太陽(yáng)’、‘伯里夫人’和‘16-A9-44’ 花瓣中反-7-十六烯的相對(duì)含量均高于10%，為這些品種的主要揮發(fā)性成分?！右埂?、‘中國(guó)紅·井岡山’、‘16-A9-49’、‘大灑錦’和‘16-A9-44’花瓣中烯烴類(lèi)化合物均有8個(gè)，相對(duì)含量分別為31.96%、28.41%、35.36%、26.78%和32.25%，‘子夜’花瓣中1-石竹烯含量最高，為16.72%，為主要的揮發(fā)性成分。‘16-A9-30’和‘伯里夫人’花瓣中烯烴類(lèi)化合物較少，僅3個(gè)，相對(duì)含量分別為18.84%和30.83%。

2.2.2 醇類(lèi)化合物的比較 由表4和表6可見(jiàn)：荷花20個(gè)品種花瓣中醇類(lèi)化合物共有8個(gè)，多數(shù)品種花瓣中含3或4個(gè)醇類(lèi)化合物，少數(shù)品種花瓣中含1或2個(gè)醇類(lèi)化合物。‘16-A9-49’花瓣中醇類(lèi)化合物的相對(duì)含量最高，為25.01%，其中，順-9-十四碳烯醇的相對(duì)含量最高，為11.59%，為主要揮發(fā)性成分；‘16-A10-1’、‘稼先蓮’、‘16-A10-27’和‘大灑錦’花瓣中醇類(lèi)化合物的相對(duì)含量也較高，分別為14.58%、18.71%、15.46%和18.45%，其中，順-9-十四碳烯醇在‘16-A10-1’和‘稼先蓮’花瓣中的相對(duì)含量最高，分別為8.99%和12.15%，為主要揮發(fā)性成分；‘16-A10-30’和‘逸仙蓮’花瓣中醇類(lèi)化合物的相對(duì)含量較低，分別為0.54%和0.31%。

2.2.3 酯類(lèi)化合物的比較 由表5和表6可見(jiàn)：荷花20個(gè)品種花瓣中酯類(lèi)化合物共有6個(gè)，‘中國(guó)紅·北京’、‘16-A10-30’、‘子夜’、‘紅臺(tái)蓮’、‘27-1’、‘39-1’、‘16-A9-55’、‘金太陽(yáng)’、‘珠峰翠影’、‘逸仙蓮’、‘大灑錦’和‘16-A9-44’花瓣中含1或2個(gè)酯類(lèi)化合物，其他品種花瓣中不含酯類(lèi)化合物?！鹛?yáng)’花瓣中酯類(lèi)化合物相對(duì)含量最高，為15.08%，僅包含順-11，14-二十碳二烯酸甲酯；‘16-A10-30’和‘39-1’花瓣中酯類(lèi)化合物的相對(duì)含量較高，分別為11.29%和13.08%，均僅含乙酸-5-十二烯醇酯；‘27-1’花瓣中酯類(lèi)化合物的相對(duì)含量也較高，為9.81%。

表6荷花20個(gè)品種花瓣中釋香成分的數(shù)量和相對(duì)含量1)

Table6Numbersandrelativecontentsofaromacomponentsinpetalsof20cultivarsofNelumbonuciferaGaertn.1)

編號(hào)No.品種Cultivar烯烴類(lèi)化合物Alkenes醇類(lèi)化合物Alcohols酯類(lèi)化合物Esters酮類(lèi)化合物Ketones醛類(lèi)化合物Aldehydes合計(jì)TotalNRC/%NRC/%NRC/%NRC/%NRC/%NRC/%116-A10-11153.70414.58——————1568.282稼先蓮Jiaxianlian623.40418.71——10.26——1142.363中國(guó)紅·北京Zhongguohong Beijing613.8834.7715.28——10.751124.67416-A10-30318.8410.54111.29————530.675子夜Ziye831.9636.4310.32————1238.716 中國(guó)紅·井岡山Zhongguohong Jinggangshan828.4139.61——————1138.017紅臺(tái)蓮Hongtailian1057.5436.1410.27——10.651564.60816-A10-271127.08315.46——————1442.53927-1617.7828.0629.81————1035.651039-1410.3332.44113.0814.36——930.211116-A9-55927.4333.6425.05————1436.1112金太陽(yáng)Jintaiyang626.2530.94115.08————1042.2713珠峰翠影Zhufengcuiying514.8014.5414.21——13.46827.001416-A9-49835.36425.01——10.18——1360.5515秣陵秋色Molingqiuse46.3933.40——10.8412.35912.9816艾江南Aijiangnan636.2023.71——————839.9117逸仙蓮Yixianlian413.5610.3110.48————614.3418伯里夫人Bolifuren330.8338.47——————639.3019大灑錦Dasajin826.78418.4510.3510.62——1446.202016-A9-44832.2536.9117.98————1247.14

1)N： 數(shù)量Number； RC： 相對(duì)含量Relative content. —： 未檢出Undetected.

2.2.4 酮類(lèi)化合物的比較 荷花20個(gè)品種花瓣中酮類(lèi)化合物共有2個(gè)，‘稼先蓮’、‘16-A9-49’和‘秣陵秋色’花瓣中順-環(huán)二十酮的相對(duì)含量分別為0.26%、0.18%和0.84%，‘39-1’和‘大灑錦’花瓣中1-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)-丙酮的相對(duì)含量分別為4.36%和0.62%，其他品種花瓣中未檢出酮類(lèi)化合物。

2.2.5 醛類(lèi)化合物的比較 荷花20個(gè)品種花瓣中醛類(lèi)化合物共有2個(gè)，‘紅臺(tái)蓮’、‘珠峰翠影’和‘秣陵秋色’花瓣中順-14-十六碳醛的相對(duì)含量分別為0.65%、3.46%和2.35%，‘中國(guó)紅·北京’花瓣中9，12，15-十八碳三烯醛的相對(duì)含量為0.75%，其他品種花瓣中未檢出醛類(lèi)化合物。

2.3 荷花不同品種花瓣中胺類(lèi)、酸類(lèi)和其他化合物的比較

2.3.1 胺類(lèi)化合物的比較 荷花20個(gè)品種花瓣中胺類(lèi)化合物共有2個(gè)，‘39-1’花瓣中N，N-二甲基十九烷-1-胺的相對(duì)含量為1.57%，‘大灑錦’花瓣中N-丁基苯磺酰胺的相對(duì)含量為0.44%，其他品種花瓣中未檢出胺類(lèi)化合物。

2.3.2 酸類(lèi)化合物的比較 荷花20個(gè)品種花瓣中酸類(lèi)化合物共有2個(gè)，‘16-A10-1’、‘16-A10-30’、‘27-1’、‘金太陽(yáng)’、‘艾江南’和‘伯里夫人’花瓣中均含L-丙氨酰甘氨酸和DL-丙氨酰-L-甘氨酸，其他品種花瓣中僅含DL-丙氨酰-L-甘氨酸。

2.3.3 其他化合物的比較 ‘子夜’、‘16-A10-27’、‘16-A9-49’、‘金太陽(yáng)’、‘秣陵秋色’、‘艾江南’、‘逸仙蓮’、‘伯里夫人’、‘大灑錦’和‘16-A9-44’花瓣中均含對(duì)苯二甲醚，其中，對(duì)苯二甲醚在‘艾江南’花瓣中的相對(duì)含量最高(11.24%)，在‘子夜’、‘16-A10-27’和‘伯里夫人’花瓣中的相對(duì)含量均高于1%；‘大灑錦’花瓣中含9-十八炔，相對(duì)含量為4.83%；‘39-1’和‘大灑錦’花瓣中均含4-十八烷基-嗎啉，且在‘39-1’花瓣中的相對(duì)含量較高(8.81%)；‘子夜’花瓣中含石竹素，‘艾江南’花瓣中含(1S，8aR)-1-異丙基-4，7-二甲基-1，2，3，5，6，8a-六氫萘，但相對(duì)含量均較低。

2.4 基于釋香成分的荷花20個(gè)品種的聚類(lèi)分析

基于釋香成分的荷花20個(gè)品種的聚類(lèi)分析圖見(jiàn)圖1。由圖1可見(jiàn)：荷花20個(gè)品種可分為3組，‘子夜’、‘紅臺(tái)蓮’、‘16-A10-27’、‘秣陵秋色’和‘艾江南’聚為A組，‘逸仙蓮’單獨(dú)聚為C組，其他14個(gè)品種聚為B組。A組特有的釋香成分為β-蒎烯、4-甲基-3-(1-甲基亞乙基)-環(huán)己烯和順-8-十二烯-1-醇；B組特有的釋香成分較多，包括萜品油烯、3，6，6-三甲基-雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯、γ-萜品烯、1-十六烯、2-蒎烯、雙戊烯、反式角鯊烯、順-9-十八烯、[1R-(1R*，4Z，9S*)]-4，11，11-三甲基-8-亞甲基-雙環(huán)[7.2.0]4-十一烯和順-2-甲基-7-十六烯10個(gè)烯烴類(lèi)化合物，芳樟醇和亞麻醇2個(gè)醇類(lèi)化合物，順-11，14，17-二十碳三烯酸甲酯、順-5-十四碳烯-1-醇乙酸酯、順-11，14-二十碳二烯酸甲酯和棕櫚酸異丙酯4個(gè)酯類(lèi)化合物，以及1-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)-丙酮和9，12，15-十八碳三烯醛；C組特有的釋香成分為蓽澄茄油烯和反-9-十六碳烯-1-醇。

1： ‘16-A10-1’； 2： ‘稼先蓮’‘Jiaxianlian’； 3： ‘中國(guó)紅·北京’‘Zhongguohong Beijing’； 4： ‘16-A10-30’； 5： ‘子夜’‘Ziye’； 6： ‘中國(guó)紅·井岡山’‘Zhongguohong Jinggangshan’； 7： ‘紅臺(tái)蓮’‘Hongtailian’； 8： ‘16-A10-27’； 9： ‘27-1’； 10： ‘39-1’； 11： ‘16-A9-55’； 12： ‘金太陽(yáng)’‘Jintaiyang’； 13： ‘珠峰翠影’‘Zhufengcuiying’； 14： ‘16-A9-49’； 15： ‘秣陵秋色’‘Molingqiuse’； 16： ‘艾江南’‘Aijiangnan’； 17： ‘逸仙蓮’‘Yixianlian’； 18： ‘伯里夫人’‘Bolifuren’； 19： ‘大灑錦’‘Dasajin’； 20： ‘16-A9-44’.

3 討論和結(jié)論

本研究利用HS-SPME-GC-MS技術(shù)從荷花20個(gè)品種花瓣中共檢出69個(gè)揮發(fā)性成分，包括烷烴類(lèi)、烯烴類(lèi)、醇類(lèi)、酯類(lèi)、醛類(lèi)、酮類(lèi)和胺類(lèi)化合物，以及5個(gè)其他化合物，其中，烷烴類(lèi)、烯烴類(lèi)和醇類(lèi)化合物的數(shù)量較多，相對(duì)含量較高。荷花不同品種花瓣中的揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量差異較大，如：‘中國(guó)紅·北京’、‘16-A10-30’、‘16-A10-27’、‘39-1’、‘逸仙蓮’、‘伯里夫人’和‘16-A9-44’花瓣中正十五烷的相對(duì)含量最高，‘稼先蓮’、‘子夜’、‘中國(guó)紅·井岡山’、‘27-1’、‘16-A9-55’、‘16-A9-49’、‘珠峰翠影’、‘金太陽(yáng)’、‘秣陵秋色’和‘大灑錦’花瓣中正十六烷的相對(duì)含量最高，其他3個(gè)品種花瓣中相對(duì)含量最高的揮發(fā)性成分也各不相同，這與徐雙雙等[14]和鄧嬌等[15]對(duì)荷花花瓣中揮發(fā)性成分組成的研究結(jié)果相似。

在荷花20個(gè)品種花瓣中檢出的釋香成分有42個(gè)，其中，烯烴類(lèi)化合物的數(shù)量最多，相對(duì)含量最高，是主要釋香成分；其次是醇類(lèi)和酯類(lèi)化合物。百合[10]、桂花[11]、文心蘭[12]和刺槐屬[13]等的釋香成分研究結(jié)果均表明：烯類(lèi)化合物是主要釋香成分。聚類(lèi)分析結(jié)果顯示：根據(jù)荷花20個(gè)品種花瓣中的釋香成分，20個(gè)品種可以分為3組，‘子夜’、‘紅臺(tái)蓮’、‘16-A10-27’、‘秣陵秋色’和‘艾江南’聚為A組，逸仙蓮單獨(dú)聚為C組，其他14個(gè)品種聚為B組。對(duì)比3組間荷花品種花瓣中的釋香成分，A組中多數(shù)荷花品種花瓣中含1-石竹烯、α-石竹烯和α-松油醇，推測(cè)這些釋香成分對(duì)A組荷花品種的香氣具有重要貢獻(xiàn)，其中，1-石竹烯和α-松油醇具有類(lèi)似松木和丁香的味道；B組荷花品種花瓣中的檜烯、反-7-十六烯和順-5-十八烯對(duì)該組荷花品種的香氣具有重要貢獻(xiàn)；C組‘逸仙蓮’花瓣中的α-萜品烯對(duì)其香氣具有重要貢獻(xiàn)。鄧嬌等[15]認(rèn)為，荷花花瓣中的揮發(fā)物質(zhì)與花色無(wú)相關(guān)性，而與遺傳背景密切相關(guān)。本研究中，A、B和C 3組內(nèi)荷花品種的瓣型和花色并不一致，也表明荷花花瓣中的釋香成分與瓣型和花色無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。研究結(jié)果還顯示：荷花不同品種花瓣中特有的釋香成分可能決定了不同品種的香味存在差異，這為后續(xù)進(jìn)行不同香型荷花香料的深加工提供了可能，同時(shí)也為荷花不同香型品種的育種提供了基礎(chǔ)資料。本研究只對(duì)處于同一花期的荷花花瓣的揮發(fā)性成分進(jìn)行了探究，而荷花在不同花期的揮發(fā)性成分及其含量的變化規(guī)律以及不同花部位的揮發(fā)性成分存在的差異還需更深入的研究。