劉 露

（重慶三峽職業(yè)學(xué)院，重慶 404100）

銀杏葉枯病是銀杏栽培地區(qū)常見(jiàn)的一種病害，早在20世紀(jì)60年代初期，該病在江蘇省泰州市苗圃出現(xiàn)時(shí)，已受到生產(chǎn)單位重視。

銀杏葉部病害的主要病原菌為鏈格孢病菌、炭疽菌、擬盤(pán)多毛孢菌，分別引起銀杏黑斑病、炭疽病和輪紋病。在病害發(fā)生的不同時(shí)期采集病葉進(jìn)行組織分離的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)3種病原菌常常同時(shí)存在，形成混合侵染，在葉子上形成面積較病斑，致使葉片干枯、提早脫落，影響銀杏的產(chǎn)量和質(zhì)量。該文主要針對(duì)炭疽病菌開(kāi)展以下試驗(yàn)，試圖找到防治銀杏炭疽病菌的最佳藥劑及最適濃度。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑 60%苯醚甲環(huán)唑（海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司）、4%四氟醚唑（意大利意賽格公司）。

1.1.2 培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，以下簡(jiǎn)稱PDA。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 病菌分離 切取銀杏炭疽病葉病健交界處葉組織。將其放于0.1%升汞及75%酒精中消毒后，用無(wú)菌紙吸干表面水分，放于PDA平板，置于25 ℃條件下恒溫培養(yǎng)。

1.2.2 含毒介質(zhì)制作 將4%四氟醚唑配制成質(zhì)量濃度分別為125、250、500、1 000 mg/L 和 2 000 mg/L 的含毒培養(yǎng)基，將60%苯醚甲環(huán)唑配制成質(zhì)量濃度分別為250、500、1000、2 000 mg/L 和 4 000 mg/L 的含毒培養(yǎng)基。以無(wú)藥劑加入的PDA平板作為對(duì)照組。每皿培養(yǎng)皿中倒入20 mL，每個(gè)濃度5個(gè)重復(fù)。

1.2.3 接入菌餅 用直徑為5 mm的打孔器在菌落邊緣打下菌餅[1]。將菌餅移入上述平板中央，用封口膜封住培養(yǎng)皿邊緣縫隙，做對(duì)應(yīng)標(biāo)記，置于25 ℃條件下恒溫培養(yǎng)7 d后觀察[2]。

1.2.4 十字交叉法測(cè)量菌落直徑 7 d后，采用十字交叉法測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑，并記錄好數(shù)據(jù)。

1.2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理 按照以下公式，計(jì)算每個(gè)藥液對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)抑制率。

利用Excel處理數(shù)據(jù)，計(jì)算毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)及EC50。

2 結(jié)果與分析

針對(duì)供試殺菌劑對(duì)銀杏炭疽菌菌絲生長(zhǎng)的影響，經(jīng)計(jì)算得到：60%苯醚甲環(huán)唑回歸直線方程為Y=0.284X+5.223 6， 相 關(guān) 系 數(shù) R2=0.976，EC50=26.582 8 mg/L。4% 四 氟醚唑回歸直線方程為Y=1.026 3X+3.537 9，相關(guān)系數(shù)R2=0.997 4。EC50=6.128 1 mg/L。

由結(jié)果可知：4%四氟醚唑的抑制作用較強(qiáng)，其EC50值為6.128 1 mg/L，60%苯醚甲環(huán)唑抑制作用次之，EC50值為 26.582 8 mg/L。

3 結(jié)果與討論

結(jié)果表明：4%四氟醚唑?qū)︺y杏炭疽病菌的抑菌效果較好，60%苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果次之。

2種殺菌劑在較高質(zhì)量濃度時(shí)對(duì)銀杏炭疽病菌的抑制效果較好，4%四氟醚唑和60%苯醚甲環(huán)唑的建議用藥濃度分別為2 000 mg/L 和 4 000 mg/L。質(zhì)量濃度較低時(shí)抑制效果不佳[3]。

殺菌劑防治是植物病害防治的關(guān)鍵，而在殺菌劑的選擇中，最重要的是要考慮殺菌劑對(duì)病原菌的殺滅能力。試驗(yàn)所使用的2種殺菌劑中4%四氟醚唑的EC50值最小，證明其對(duì)銀杏炭疽病菌的殺滅效果最好；而60%苯醚甲環(huán)唑的效果則較差一點(diǎn)。由此可看出4%四氟醚唑在理論上應(yīng)用潛力更好[4]。

在進(jìn)一步對(duì)銀杏炭疽病的校內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，還需要對(duì)這2種殺菌劑進(jìn)行綜合比較，如比價(jià)其對(duì)銀杏生長(zhǎng)作用的影響、對(duì)環(huán)境的影響、成本等，力求找到經(jīng)濟(jì)合理、施用高效的低毒殺菌劑。

研究表明，長(zhǎng)期使用單一殺菌劑會(huì)使病原菌產(chǎn)生抗藥性。為了延緩病原菌對(duì)藥劑抗藥性的產(chǎn)生和發(fā)展，有專(zhuān)家提出將此類(lèi)殺菌劑與機(jī)制不同的其他類(lèi)型殺菌劑混合或交替使用。葉滔等研究也表明，合理復(fù)配是降低抗藥性發(fā)生的主要策略。因此，為了防止銀杏炭疽病菌對(duì)本試驗(yàn)篩選出的抑制效果較好的4%四氟醚唑和60%苯醚甲環(huán)唑產(chǎn)生抗藥性，建議人們?cè)谥脖９ぷ髦薪惶媸褂?種殺菌劑對(duì)銀杏炭疽病進(jìn)行防治。

本試驗(yàn)結(jié)果僅基于室內(nèi)毒力測(cè)定得出，若要準(zhǔn)確選擇銀杏炭疽病的防治藥劑，還應(yīng)結(jié)合銀杏生長(zhǎng)情況、環(huán)境、用藥成本等相關(guān)因素進(jìn)行分析，因此人們需要再進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)。