李紅 郭婧 施嘉琛 李疆 趙立文 高文暉 趙耀
肌酐(creatinine,Cr)主要是由肌肉產(chǎn)生的低分子量含氮化合物,是肌酸的終末代謝產(chǎn)物。血液中的肌酐通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò),從尿中排出體外,肌酐在體內(nèi)含量較為恒定,在腎臟功能損傷不嚴(yán)重時(shí),尿液中肌酐的排泄很少受尿液稀釋以及濃縮的影響,因此通常用尿液中肌酐含量作為尿中其他物質(zhì)排泄的參照物[1]。尿肌酐校正尿微量白蛋白可替代24 h留尿檢測(cè)尿微量白蛋白研究[2-3]、隨機(jī)尿微量白蛋白與糖尿病、高血壓早期腎損傷研究[4-6],尿微量白蛋白/尿肌酐比值與心血管病相關(guān)性研究中均用尿肌酐進(jìn)行校正[7-8],在開(kāi)展尿液污染物、重金屬等研究中,都用到了尿肌酐含量校正[9],故尿肌酐檢測(cè)的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。用自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肌酐常用苦味酸法和酶法,兩種方法檢測(cè)血液中肌酐含量差異較大[10],然而王凱等[11]報(bào)道檢測(cè)尿肌酐無(wú)顯著性差異。各實(shí)驗(yàn)室使用的儀器設(shè)備和檢測(cè)試劑差別很大,為保證檢測(cè)結(jié)果的一致性于2017年2月通過(guò)比較這兩種方法檢測(cè)尿肌酐含量的差異,探討尿液常量、減量和稀釋方式檢測(cè)對(duì)尿肌酐含量的影響,為獲得準(zhǔn)確測(cè)定尿肌酐含量提供參考。
1.1儀器設(shè)備及試劑 7600日立生化分析儀(日立高新技術(shù)有限公司,日本)??辔端岱ê兔阜ㄔ噭⑿?zhǔn)品和質(zhì)控品(WAKO,和光純藥工業(yè)株式會(huì)社,日本)。
1.2實(shí)驗(yàn)方法 在日立生化分析儀上同時(shí)用苦味酸法和酶法試劑分別檢測(cè)44份尿樣。使用苦味酸法,將加樣量分別選擇為常量分析、減量分析和1∶10儀器自動(dòng)稀釋三種方式測(cè)定62份尿肌酐。尿樣來(lái)源于市CDC科研實(shí)驗(yàn)樣品,均為晨尿。測(cè)定結(jié)果通過(guò)實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)LIS直接輸出統(tǒng)計(jì)。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 20.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。
2.1二種方法檢測(cè)結(jié)果 用苦味酸法和酶法試劑測(cè)定尿肌酐結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r=0.995,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=44,t=1.69,P=0.05,表1)。
表1 二種方法檢測(cè)結(jié)果比較
2.2三種加樣量方式檢測(cè)結(jié)果 常量分析、減量分析和1∶10自動(dòng)稀釋測(cè)定尿樣肌酐結(jié)果差異極顯著(n=62,F(xiàn)=9.65,P=0.00,表2)。
表2 三種加樣量方式檢測(cè)結(jié)果比較
用苦味酸法和酶法試劑測(cè)定44件尿肌酐的結(jié)果r=0.995相關(guān)性好[12],差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三種加樣方式測(cè)定62件尿樣肌酐含量,造成常量分析、減量分析和1∶10自動(dòng)稀釋測(cè)定尿樣肌酐結(jié)果差異大的原因,主要是與試劑適用的線性范圍有關(guān)。雖然試劑廠家說(shuō)明書提供的可適合檢測(cè)樣品有血樣和尿樣,但是尿樣中肌酐濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于血樣,不能像測(cè)定血肌酐那樣直接測(cè)定尿肌酐,要通過(guò)稀釋樣品濃度保證在線性范圍內(nèi)檢測(cè)尿樣。目前這兩種方法均被廣泛使用,線性范圍酶法是0.08~100 mg/dL,苦味酸法是0.13~60 mg/dL。酶法比苦味酸法試劑線性范圍寬,但價(jià)格貴很多,可根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室需求,確定使用試劑的方法。如果是需要各地區(qū)或者各實(shí)驗(yàn)室比較的數(shù)據(jù),要預(yù)先統(tǒng)一試劑方法。兩種方法試劑檢測(cè)血樣均可采用常量分析,遇到高濃度樣品可減量分析復(fù)查,而尿樣濃度高且個(gè)體差異大,不能使用常量、減量常規(guī)檢測(cè)方法直接測(cè)定,充分利用儀器自動(dòng)稀釋功能,稀釋樣品以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。