陳璐璐，雷妮婭

北京林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，北京 100083

隨著工業(yè)的不斷發(fā)展，酸雨現(xiàn)象在全球范圍內(nèi)蔓延且不斷加重。在中國，酸雨現(xiàn)象同樣日趨嚴(yán)重，華北地區(qū)酸雨危害面積不斷擴大（俞飛等，2016），致使該地區(qū)植物及生態(tài)系統(tǒng)面臨巨大挑戰(zhàn)。酸雨阻礙植物光合作用（蔡夢莎，2012），影響植物生物量積累（張海艷，2013；梁曉琴，2013；Ramlall et al.，2015），嚴(yán)重危害植物生長表現(xiàn)，植物幼苗生長階段極易受到酸雨的不良脅迫，森林群落物種更新也受到酸雨影響。森林生態(tài)系統(tǒng)中土壤微生物對酸雨的響應(yīng)相當(dāng)敏感，它們的變化致使土壤養(yǎng)分發(fā)生變化并直接或間接影響植物的生長狀態(tài)。酸雨引起土壤酸化并破壞土壤結(jié)構(gòu)，改變土壤微環(huán)境，從而影響微生物活動及土壤酶的活性，對土壤生態(tài)平衡產(chǎn)生不良影響（王琳等，2014）；土壤微生物中有益微生物類群與植物生長密切相關(guān)，尤其是與植物互利共生的菌根真菌群落（梁倩倩等，2014），它們對酸雨的響應(yīng)可較大程度地影響植物的生長。植物根系菌根真菌對酸雨的響應(yīng)主要體現(xiàn)在其群落結(jié)構(gòu)、定殖率及在根系內(nèi)的形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面的變化，并進一步出現(xiàn)養(yǎng)分吸收及運輸?shù)裙δ苄苑矫娴母淖儯▍纬旱龋?007）。根系菌根真菌幫助植物應(yīng)對酸雨脅迫的積極作用，主要表現(xiàn)在增強對植物根系的物理保護（Courty et al.，2010），提高其養(yǎng)分吸收能力（如N、P、K等）（Christophe et al.，2010）以及相關(guān)酶活性（Baghel et al.，2009）等方面。其中，關(guān)于泡囊-叢枝菌根真菌（Vescile-Arbusular Mycorrhizal Fungi，VA）的研究相對成熟，它們在植物養(yǎng)分吸收與運輸過程中的作用及對生態(tài)系統(tǒng)群落構(gòu)建及演替過程的影響都得到了深入研究，相關(guān)研究成果也得到了廣泛應(yīng)用（韋莉莉等，2016；蔣勝競等，2014）；目前，探索VA在植物應(yīng)對逆境脅迫中的積極作用方面的研究為數(shù)眾多，確認(rèn)了VA能緩解逆境脅迫給植物造成的各種不良影響，諸如生物量積累降低、養(yǎng)分失衡、種子敗育或萌發(fā)率低下等（Zhao et al.，2015；Kongpun et al.，2011）。各種逆境脅迫中，酸雨脅迫因其危害范圍廣、程度深、持續(xù)時間久等特點而受到了重視，但是具體到不同酸雨脅迫梯度對根系真菌形態(tài)、結(jié)構(gòu)及功能的影響報道較少。本研究將結(jié)合植物生物量及葉片氮磷含量等重要指標(biāo)，研究酸雨脅迫下接種土壤微生物對植物根系泡囊-叢枝菌根真菌定殖情況、形態(tài)結(jié)構(gòu)及由此對植物生物量積累及養(yǎng)分吸收情況產(chǎn)生的影響，并試圖證明泡囊-叢枝菌根真菌在調(diào)節(jié)植物應(yīng)對酸雨脅迫中的重要作用。

目前大多數(shù)關(guān)于菌根真菌促生作用的接種試驗多采用單一菌株或幾種菌株混合作為接種劑，以欒樹（Koelreuteria paniculata）根際土壤作為微生物接種劑，可較全面地接種其根際土壤微生物群，更精確地模擬野外根際微生物環(huán)境。欒樹屬無患子科欒樹屬喬木樹種，是中國華北地區(qū)重要的森林群落樹種及城市行道樹種、觀賞樹種，性喜石灰質(zhì)（堿性）土壤，在硅基酸質(zhì)的紅土地區(qū)不能生長，對酸雨相當(dāng)敏感；其幼苗階段是對逆境脅迫最為敏感的時期。因此，以欒樹幼苗作為受試植物材料，通過土壤微生物接種處理及模擬酸雨脅迫處理，開展栽培試驗，試圖探討以下兩個問題：（1）酸雨脅迫對欒樹根系泡囊-叢枝菌根結(jié)構(gòu)特性及定殖率的影響；（2）酸雨脅迫如何通過影響泡囊-叢枝菌根真菌對欒樹幼苗生長及養(yǎng)分吸收產(chǎn)生影響。本研究旨在進一步完善泡囊-叢枝菌根真菌在植物抗逆境脅迫方面的相關(guān)理論研究，評估欒樹的抗酸雨能力及探索根系泡囊-叢枝菌根真菌在植物抗酸雨方面的相關(guān)緩解機制，為今后制定保育措施提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

從中國林木種子公司購買北京鄉(xiāng)土欒樹種子，用多菌靈試劑滅菌并經(jīng)無菌水清洗干凈后裝入塑料袋內(nèi)進行低溫（4 ℃）催芽，待種子破殼播種于無菌育苗盤中統(tǒng)一育苗，2個月后挑選長勢整齊的幼苗移栽到育苗基質(zhì)與土壤接種劑按一定比例混合的塑料盆中，并開展試驗。本試驗中育苗基質(zhì)均為無菌草炭土：蛭石：珍珠巖（2∶1∶1，體積比）混合物，3種成分均經(jīng)滅菌處理。土壤接種劑為采自北京市鷲峰林場欒樹林的野生成年欒樹根際土壤。將采集的根際土壤分為兩份制成接種劑，其中一份原狀低溫保存，另一份經(jīng)高壓真空滅菌處理，121 ℃濕熱滅菌45 min，連續(xù)2次，24 h后重復(fù)（Nie et al.，2013）。分別將兩種接種劑（滅菌土、不滅菌土）混勻于育苗基質(zhì)中，使育苗基質(zhì)中接種劑體積比為 5%（Lau et al.，2011；McNamara et al.，2003），采集到的欒樹根際土壤pH值為5.75，有機質(zhì)、全氮、全磷含量分別為 18.19%、3.06 g·kg-1、1.02 g·kg-1，微生物生物量碳、氮含量分別為 285.9 mg·kg-1和 37.4 mg·kg-1，無菌草炭土 pH 值為 7.18。

1.2 盆栽試驗設(shè)計

盆栽試驗在北京林業(yè)大學(xué)八家苗圃內(nèi)的簡易塑料棚中開展。試驗采用雙因素隨機試驗設(shè)計，設(shè)置了 3個酸雨強度梯度（pH1=3.5，pH2=4.5，pH3=5.6）及2種接種方式（滅菌土和不滅菌土），共6個處理，各處理重復(fù)5次。中國酸雨類型主要為硫酸型，故酸雨母液采用體積比為 5∶1 的H2SO4∶HNO3的混合液，每次使用時取適量酸雨母液利用手持便攜式pH計配制酸雨液。試驗于2015年4月3日開始，于8月27日收獲所有苗木，期間每隔3天進行1次酸雨噴施，具體噴施時間為上午 8：00－8：30；噴施量參考北京市近 5 年（2010－2014年）4－8月月均降水量（見表1）。酸雨僅噴灑在土壤中，嚴(yán)格避免噴施液接觸到植物地上部分。試驗過程中酸雨配置用水及常規(guī)水分管理澆灌用水均為去離子水。

表1 2010－2014北京市4－8月平均降雨量及試驗中酸雨澆灌量Table 1 Precipitation of Beijing from April to August between 2010 and 2014 and the monthly irrigation amount of simulated acid rain in test

1.3 指標(biāo)測定

于收獲日對欒樹幼苗進行基徑、株高及生物量進行測量，基徑使用50 mm游標(biāo)卡尺測量，株高使用20 cm直尺直接測量，植株于65 ℃下烘干后測生物量（干質(zhì)量）。根系內(nèi)生真菌侵染率測定方法：在對細(xì)根進行取樣烘干處理之前每個樣品留取 0.2 g乳白色根端，切成約1 cm的根段，清洗干凈后用福爾馬林-酒精-醋酸混合固定液（FAA，體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇、甲醛水、冰醋酸的體積比為90∶5∶5）固定保存，加入5 mL甘油可長期固定（張春英，2008），用于叢枝菌根菌侵染率測定。叢枝菌根菌侵染率測定參考Phillips et al.（1970）的方法。從固定液中取出根段樣本并放入 10%氫氧化鉀溶液中，90 ℃水浴加熱1.5 h至根系透明；洗去堿液后用體積分?jǐn)?shù)為10%的H2O2漂白15 min；清洗干凈并用0.2 mol·L-1的鹽酸酸化1 h；酸化根段用臺盼藍染色15 min后用乳酸酚脫色30 min；最后將脫色處理過的根段清洗干凈后壓片進行顯微鏡鏡檢。每株幼苗隨機取10條根段，每個處理取100條根段進行鏡檢。鏡檢采用十字交叉法計數(shù)（Mcgonigle et al.，1990）。對視野內(nèi)被十字絲所搭上的菌絲、泡囊和叢枝結(jié)構(gòu)分別進行計數(shù)并記錄在同一個交叉點下，通過等距移動玻片使每組根段形成不少于150個觀察視野，同時對幼苗的泡囊-叢枝菌根真菌結(jié)構(gòu)特征進行觀察，并使用佳能PC1591進行拍攝記錄。侵染率計算公式為：泡囊侵染率=(泡囊侵染的交叉點數(shù)和/總交叉數(shù))×100%，菌絲侵染率=(菌絲侵染的交叉點數(shù)和/總交叉數(shù))×100%，總侵染率=(總交叉點-無侵染點數(shù))/總交叉點×100%（Mcgonigle et al.，1990）。

土壤pH利用pH計（OHRUS，STARTER2100）測定（土∶水=1∶5，質(zhì)量體積比）。土壤有機碳測定采用重鉻酸鉀-濃硫酸外加熱法（Nelson et al.，1982）。微生物生物量碳氮采用氯仿熏蒸法（Vance et al.，1987）。土壤全氮全磷、葉片氮磷含量測定采用催化劑消煮法，使用 AA3連續(xù)流動分析儀（AutoAnalyzer 3）測定消煮液中氮磷含量，其中葉片消煮液稀釋5倍后上AA3連續(xù)流動分析儀測定葉片氮磷含量（丁凡等，2011）。菌根依賴度(Mycorrhizae Dependence, MD)=(接種處理植物干物質(zhì)-非物質(zhì)處理物質(zhì)干物質(zhì))/接種處理植物干物質(zhì)×100%（Klironomos，2002）。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

在Excel中對所有數(shù)據(jù)進行基礎(chǔ)處理，對不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進行LOG或SQRT轉(zhuǎn)換，運用SPSS 17.0對不同酸雨處理下的菌根結(jié)構(gòu)侵染率、生長及生理指標(biāo)進行單因素方差分析（One-way ANOVA），比較不同酸雨或接種方式對供試幼苗指標(biāo)作用的差異性是否顯著；以接種方式和酸雨梯度為固定因子對內(nèi)生菌侵染率，欒樹生長指標(biāo)及葉片氮磷、氮磷比率進行雙因素方差分析（Two-way ANOVA）及Duncan多重比較，對試驗中不同酸雨梯度處理中欒樹幼苗總生物量，地上生物量，地下生物量，根冠比，株高，基徑，葉片氮、磷及氮磷比，根系內(nèi)生菌總侵染率進行相關(guān)性分析（Pearson correlation analysis）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同酸雨梯度下欒樹根系內(nèi)生真菌侵染特征

通過顯微鏡觀測并記錄泡囊-叢枝菌根真菌各結(jié)構(gòu)形態(tài)特征及侵染率。泡囊-叢枝菌根真菌的典型結(jié)構(gòu)（泡囊、叢枝、菌絲）在3種酸雨強度梯度處理中均有出現(xiàn)，叢枝結(jié)構(gòu)在各處理中多呈現(xiàn)消解狀態(tài)且數(shù)量較少，本文將叢枝結(jié)構(gòu)侵染記錄為菌絲侵染。欒樹幼苗根系泡囊-叢枝菌根真菌各結(jié)構(gòu)特征見圖1。

欒樹幼苗根系泡囊-叢枝菌根真菌各結(jié)構(gòu)定殖情況，在不同強度酸雨脅迫下存在顯著差異（表2）。菌絲和泡囊兩種結(jié)構(gòu)的侵染率及菌根真菌總侵染率3項指標(biāo)隨著pH值的升高而下降，pH 3.5處理下菌絲侵染率、泡囊侵染率及總侵染率分別是 pH 5.6處理下的2.4、2.2、2.2倍，pH 4.5處理下該3項指標(biāo)分別是pH 5.6處理下的1.5、1.4、1.6倍。本研究中不接種處理的欒樹幼苗根系菌根各結(jié)構(gòu)侵染極低，甚至為0，因此下文不予分析。

表2 不同酸雨梯度欒樹幼苗根系泡囊-叢枝菌根結(jié)構(gòu)侵染率Table 2 Vesicle-arbuscular mycorrhizal fungi colonization ratio of Koelreuteria paniculata seedlings under acid stress

圖1 欒樹根系泡囊-叢枝菌根結(jié)構(gòu)特征Fig. 1 Vesicle-arbuscular mycorrhizal fungi structure traits of Koelreuteria paniculata

2.2 不同處理下欒樹幼苗生長情況分析

從雙因素方差分析結(jié)果看（表3），酸雨脅迫與土壤接種處理及其交互作用均對欒樹幼苗基徑、地上生物量及地下生物量有顯著影響，兩者交互作用均對欒樹幼苗各生長指標(biāo)具有顯著影響（P＜0.05）；但是，酸雨脅迫、接種處理及其交互作用對欒樹幼苗根冠比均不具有顯著影響?？傮w上，pH 3.5處理下（接種及不接種土壤微生物）欒樹幼苗各生長指標(biāo)高于其他兩種酸梯度處理，且接種土壤微生物下，pH 3.5處理下欒樹幼苗基徑、株高、地上及地下生物量均顯著高于 pH 4.5及 pH 5.6處理（P＜0.05），而pH 4.5及pH 5.6處理間各指標(biāo)差異性不顯著（P＞0.05）。pH 3.5處理下接種土壤微生物處理的欒樹幼苗基徑、株高、地上及地下生物量均顯著高于未接種處理（P＜0.05），分別較其高出30%、45.9%、121.6%、114.5%；pH4.5處理下，接種處理的欒樹幼苗地上、地下生物量均顯著高于未接種處理（P＜0.05），分別較其高出 52%、76.7%。pH 5.6處理下，接種處理的欒樹幼苗株高顯著低于未接種處理（38.5%，P＜0.05），接種處理的幼苗基徑、地上及地下生物量高于未接種處理，但不顯著（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，pH 3.5和pH 4.5處理下，接種土壤微生物處理對欒樹幼苗生長有較大的促進作用，而pH 5.6處理下，接種土壤微生物處理對欒樹幼苗生長的促進作用稍弱些。另一方面，從菌根依賴度（MD）（表3）可知，pH 3.5處理下，欒樹幼苗對根系菌根真菌的依賴度最高，其次是pH 4.5，pH 5.6處理下欒樹幼苗對菌根真菌的依賴性最低。

接種方式顯著影響欒樹幼苗葉片氮含量及氮磷比率，酸雨脅迫及其與接種處理的交互作用對幼苗葉片氮磷含量及氮磷比率不具有顯著影響（表4）。3種 pH梯度下，未接種處理欒樹葉片氮含量及氮磷比率均顯著高于接種處理（P＜0.05）；未接種處理欒樹葉片磷含量略高于接種處理（P＞0.05）。不同酸雨梯度下，接種土壤微生物并未促進欒樹幼苗葉片氮磷含量的積累，反而降低了欒樹幼苗葉片的氮含量，葉片氮磷比受到顯著影響。

2.3 欒樹幼苗生長指標(biāo)與根系內(nèi)生真菌侵染率相關(guān)性分析

對接種處理下3種酸雨處理欒樹幼苗生長指標(biāo)與根系泡囊-叢枝菌根真菌總侵染率進行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果（表5）表明，pH 3.5處理下，欒樹幼苗根系菌根真菌侵染率與總生物量、地上生物量、地下生物量、基徑有極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），與株高有顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），與葉片氮有極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；pH 4.5處理下，欒樹幼苗根系菌根真菌真菌侵染率與總生物量、地上生物量、地下生物量有極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），與株高、葉片氮和葉片氮磷比有顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；pH 5.6處理下，欒樹幼苗根系菌根真菌侵染率與各生長指標(biāo)無顯著相關(guān)關(guān)系（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，不同酸雨梯度下，幼苗根系菌根真菌侵染率與幼苗生長指標(biāo)之間的相關(guān)關(guān)系存在較大差異。

表3 各處理下欒樹幼苗生長情況Table 3 Growth condition of Koelreuteria paniculata in different treatments

表4 各處理下欒樹幼苗葉片氮、磷含量及氮磷比率Table 4 Leaf N, P and N：P ratio of Koelreuteria paniculata in treatments

表5 不同酸雨梯度下欒樹幼苗生長指標(biāo)與根系泡囊-叢枝菌根真菌總侵染率的相關(guān)關(guān)系Table 5 Correlation analysis of seedling growth index and vesicle-arbuscular mycorrhizal fungi colonization ratio under acid stress gradients

2.4 各處理下土壤養(yǎng)分狀況分析

由表6可知，酸雨梯度、接種方式均對土壤pH有極顯著影響（P＜0.001），且兩者間有極顯著的交互作用（P＜0.001）；酸雨梯度對土壤有機碳無顯著影響（P＞0.05），而接種方式對其有極顯著影響（P＜0.001），兩者對土壤有機碳無顯著交互作用（P＞0.05）；酸雨梯度、接種方式對土壤全氮有極顯著影響（P＜0.001），而兩者間無顯著交互作用（P＞0.05）；酸雨梯度對土壤全磷有極顯著影響（P＜0.001），接種方式對全磷無顯著影響（P＞0.05），且兩者間無顯著交互作用（P＞0.05）。除pH 4.5不接種處理下pH值顯著低于其他處理外，各處理間pH值差異性不顯著（P＞0.05），但總體上強酸處理下pH值低于其他酸雨強度處理。pH 3.5和pH 4.5處理下接種土壤微生物處理有機碳含量顯著低于不接種處理；pH 4.5處理下接種土壤微生物處理土壤全氮含量顯著低于其他處理；pH 4.5處理下接種土壤微生物處理及 pH 5.6處理下不接種處理土壤全磷含量顯著低于其他處理。

3 討論

3.1 欒樹根系泡囊-叢枝菌根真菌在酸脅迫環(huán)境中的適應(yīng)性表現(xiàn)

研究表明，酸雨會導(dǎo)致植物形成菌根的能力下降且改變菌根共生體的結(jié)構(gòu)特征（梁倩倩等，2014；呂超群等，2007）。本研究表明，酸雨脅迫促進了菌根真菌的定殖，并影響其結(jié)構(gòu)及形態(tài)的形成。強酸性酸雨淋洗有利于菌根真菌真菌泡囊結(jié)構(gòu)、菌絲結(jié)構(gòu)的形成，泡囊-叢枝菌根真菌菌絲及泡囊結(jié)構(gòu)在強酸脅迫（pH 3.5及pH 4.5）下有較高的定殖率，表明強酸脅迫環(huán)境激發(fā)了根系菌根真菌的定殖，可能增加脅迫環(huán)境下幼苗根系養(yǎng)分吸收的途徑及能力；而馮曾威等（2017）的研究結(jié)果與本研究略有差異，其通過調(diào)節(jié)土壤的 pH值，表明低土壤 pH（3.7）會抑制叢枝菌根真菌菌絲及叢枝結(jié)構(gòu)的形成。本文中強酸雨的淋洗卻更有利于欒樹幼苗根系菌根真菌的定殖，可能的原因是，經(jīng)過一個生長季的淋洗后，pH 3.5處理下盆栽土pH為6.82，pH 4.5處理下為6.90，pH 5.6處理下為7.06，而泡囊-叢枝菌根真菌是一類喜酸性的真菌類群，具有嗜酸性的特征，能忍耐較低pH的環(huán)境（Vosatka et al.，1998），在偏酸性環(huán)境下定殖發(fā)育良好。不同酸雨梯度處理下，隨著土壤有機碳的增加，幼苗根系菌根真菌侵染率降低，有研究表明不少叢枝菌根真菌物種隨著土壤基質(zhì)有機質(zhì)含量的升高侵染率及菌絲量均下降（張旭紅，2003），其中的作用機理有待進一步研究。而Vosatka（1999）認(rèn)為酸雨模擬試驗中泡囊-叢枝菌根真菌定殖率的積極響應(yīng)有可能與酸雨溶液中的氮、硫元素的養(yǎng)分滋養(yǎng)效益有關(guān)。目前關(guān)于模擬酸雨或土壤pH調(diào)控影響根系菌根真菌形態(tài)及結(jié)構(gòu)的相關(guān)研究報道不多，今后開展該方面的研究有利于進一步明確菌根真菌對酸雨脅迫的耐受強度及其對植物生長及養(yǎng)分吸收產(chǎn)生影響的主要表現(xiàn)形式及影響機制。

表6 各處理下土壤部分理化性質(zhì)情況Table 6 pH value, SOC, TN, TP content of soil in different treatments

3.2 不同酸雨梯度處理下欒樹生長差異的菌根真菌生物學(xué)機制探討

接種土壤微生物處理對幼苗生長的促進效益在不同酸雨梯度下存在較大的差異：從生物量積累、橫縱向生長情況來看，在強酸性處理中（pH 3.5和pH 4.5處理），促進效益顯著；而在弱酸處理中（pH 5.6），效益并不顯著，且欒樹幼苗在強酸處理中（pH 3.5和pH 4.5處理）有較高的菌根真菌依賴度（MD）。由此可知，強酸雨脅迫環(huán)境下，欒樹幼苗生長較大程度地依賴根系內(nèi)有益真菌（泡囊-叢枝菌根真菌），表明在強酸逆境脅迫中共生真菌對欒樹幼苗生長有重要的有益調(diào)節(jié)作用，推測此為根系共生真菌幫助植物抵抗酸脅迫逆境表現(xiàn)出的一種適應(yīng)性策略。泡囊-叢枝菌根真菌幫助植物抵抗逆境及促進植物生長的機制已經(jīng)比較清楚，它們通過活化土壤中的難溶有機物，吸收養(yǎng)分并將其運輸至宿主植物，而它們的泡囊結(jié)構(gòu)也具有儲藏磷脂的功能，可在逆境中加強養(yǎng)分元素的分解及釋放，供植物利用（劉潤進等，2007）。相關(guān)性分析結(jié)果顯示不同酸強度淋洗下菌根真菌總侵染率與幼苗生長指標(biāo)間的相關(guān)關(guān)系差異較大，說明泡囊-叢枝菌根真菌與幼苗生長指標(biāo)之間的關(guān)系顯著受到環(huán)境酸性程度的影響。強酸脅迫可能激發(fā)菌根真菌對欒樹幼苗的促生長作用，提高植物的耐酸性（張爽等，2014；Kongpun et al.，2011；劉潤進等，2017）。而從不同處理下欒樹幼苗葉片氮、磷含量來看，接種土壤微生物不利于各酸雨強度下幼苗對養(yǎng)分的吸收或積累，并且相關(guān)性分析結(jié)果顯示幼苗根系內(nèi)生真菌總侵染率與葉片氮存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，尤其在強酸性處理中表現(xiàn)為顯著負(fù)相關(guān)；于浩等（2017）以馬尾松幼苗為受試材料的研究結(jié)果表明：pH 3.5及pH 4.5強酸雨脅迫下，接種菌根真菌處理的葉片氮、磷含量低于未接種處理；另趙昕等（2006）研究表明叢枝菌根真菌并未對寄主植物葉片氮、磷養(yǎng)分吸收產(chǎn)生促進作用且減少了對地上部分葉片氮、磷比例的分配，相反，接種叢枝菌根增加了根系氮、磷養(yǎng)分的分配，針對這一現(xiàn)象中根系菌根真菌的作用機制未深入探討，推測在強酸雨脅迫條件下，菌根真菌可能優(yōu)先滿足自身養(yǎng)分吸收及地下根系養(yǎng)分吸收，而后向遠端（地上部分）分配。此外，畢銀麗等（2014）通過接種不同微生物研究其對大豆幼苗生長的試驗表明，單獨接種泡囊-叢枝菌根真菌時，葉片氮、磷含量高于未接種處理，而同時接種其他微生物類群，如解磷菌、根瘤菌等時，接種處理的葉片氮、磷含量低于未接種處理，因此，我們推測泡囊-叢枝菌根真菌與其他土壤微生物之間存在某種拮抗作用，影響幼苗礦質(zhì)養(yǎng)分的吸收；在今后的研究中，應(yīng)針對供試物種、試驗方法、酸脅迫梯度及不同微生物類群等因素對根系內(nèi)生真菌促生效益的影響強度差異性進行更深入的研究與探討。

4 結(jié)論

本文在一定程度上闡明了接種土壤微生物對欒樹幼苗抵抗酸雨的作用，重點研究了泡囊-叢枝菌根真菌結(jié)構(gòu)特征和侵染率的特征及其與植物生長的關(guān)系。得出以下結(jié)論：（1）強酸雨脅迫（pH 3.5及pH 4.5）促進了欒樹幼苗根系泡囊-叢枝菌根真菌泡囊結(jié)構(gòu)和菌絲結(jié)構(gòu)的定殖；泡囊-叢枝菌根真菌結(jié)構(gòu)在酸脅迫下的該種表現(xiàn)形式是對酸雨脅迫的重要適應(yīng)策略。（2）結(jié)合強酸脅迫下根系真菌定殖情況與幼苗生物量相關(guān)關(guān)系可知，根系泡囊-叢枝真菌對欒樹幼苗生長有促進作用；欒樹幼苗在強酸處理中有較高的菌根依賴度，表明根系菌根真菌定殖率提高是欒樹幼苗抵抗酸雨的重要策略。