宋岱松 陳煥昌 劉媛媛 李月田 張 強 金梅林*

1.環(huán)山集團養(yǎng)豬事業(yè)部健康管理部，山東青島 266706；2.華中農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室，武漢 430070

沙門氏菌是一種重要的人畜共患病原菌，可導致多種動物發(fā)病，也可通過污染的食物感染人類，對人類的健康造成極大威脅。沙門氏菌血清型眾多，導致豬發(fā)病的沙門氏菌主要為豬霍亂沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌，前者的主要臨床表現(xiàn)為敗血癥，后者主要表現(xiàn)為壞死性腸炎[1]。

1 發(fā)病情況

2018年2月5日，山東煙臺某育肥豬場（存欄1 063頭，92日齡）農(nóng)場主反饋豬突然發(fā)生腹瀉，筆者于2月7日對該農(nóng)場進行了調(diào)查。臨床癥狀:腹瀉傳播迅速，腹瀉比例已經(jīng)達到70%；采食量下降60%左右；豬只扎堆，被毛臟亂，體溫39.5℃以上的豬只約占40%（圖1）；糞便呈水樣，顏色較復雜，為灰黑色、黃色、綠色等，個別豬只糞便中帶有紅色血液及腸道脫落物（圖2）。瀕臨死亡的豬只體溫較低，為36.0～37.5℃；2月6日死亡2頭，2月7日死亡8頭。

圖1 被毛粗亂、扎堆

圖2 糞便黃色或帶有血液

2 剖檢癥狀

脾臟略微腫大（圖3）；肺水腫（圖4）；全身淋巴結腫大、出血（圖5）；小腸各部可見明顯充血、腸壁增厚（圖6）；結腸內(nèi)容物呈水樣，有纖維素性滲出物（圖6），部分豬只結腸內(nèi)容物呈現(xiàn)血色（圖7），盲腸、結腸有偽膜覆蓋（圖8）。

圖3 脾臟略微腫大

圖5 淋巴結腫大、出血

圖7 腸道內(nèi)血色內(nèi)容物

2月5日至2月20日，筆者共計剖檢34頭豬，其中急性死亡豬21頭，慢性病例13頭（自然死亡與安樂死），隨后對剖檢病變進行了統(tǒng)計與分析（表1）。

3 實驗室診斷

疾病發(fā)生初期，送檢肛拭子進行病原學檢測，結果顯示:豬流行性腹瀉病毒（PEDV）和豬傳染性胃腸炎病毒（TGE）均為陰性。

圖4 肺水腫

圖6 腸壁增厚、結腸內(nèi)水樣內(nèi)容物

圖8 結腸內(nèi)偽膜覆蓋

表1 剖檢病變統(tǒng)計

2月7日，采集新鮮的結腸內(nèi)容物及腹瀉豬只肛拭子送至實驗室進行細菌分離鑒定，2月9日出具的結果顯示:SS瓊脂培養(yǎng)基可見黑色菌落，符合沙門氏菌生長特性（圖9）。隨后，選取2個菌株進行藥敏試驗，結果顯示:該菌株對恩諾沙星最為敏感（表2、圖10）。

表2 菌株藥敏試驗結果

圖9 細菌鑒定培養(yǎng)

圖10 藥敏試驗

以P1:GTGAAATTATGGCCACGTTCGGGCAA、P2:TCATCGCACCGTCAAAGGAACC為引物，以細菌培養(yǎng)液為模板，進行PCR擴增。PCR產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳，約在284 bp有一可見條帶，可確定該菌株為沙門氏菌（圖11）。

圖11 PCR產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖

4 病史回顧及綜合診斷

經(jīng)農(nóng)場主反饋，2月2日起，豬群中零星出現(xiàn)腹瀉豬只，2～3 d內(nèi)腹瀉比例已經(jīng)達到了40%以上，采食量降低50%。2月5日，筆者通過農(nóng)場主的信息反饋，將其診斷為某種病毒感染導致的腹瀉，同時要求農(nóng)場主采集腹瀉豬只肛拭子，送相關實驗室檢測PEDV和TGEV。

2月7日，筆者對該農(nóng)場進行了調(diào)查。極為重要的信息是:2月6日夜間至2月7日凌晨，有8頭豬只因腹瀉死亡。筆者立即否定了之前的診斷，排除了病毒感染的可能性。與此同時，實驗室反饋，PEDV和TGEV陰性，診斷方向指向了細菌感染。通過臨床癥狀和剖檢診斷的信息匯總，筆者判定該案例為疑似沙門氏菌感染導致的出血性腹瀉，但胞內(nèi)勞森氏菌和豬痢疾密螺旋體感染的可能性沒有排除。對死亡豬只結腸內(nèi)容物進行細菌分離鑒定，2月9日實驗室出具的結果顯示沙門氏菌陽性；同時藥敏試驗表明，該菌株對恩諾沙星最為敏感。

5 控制方案

1）藥物干預。2月7日起，10%硫酸粘桿菌素500 g/t，飲水給藥，連續(xù)使用 5 d；80%泰妙菌素120 g/t，飲水給藥，連續(xù)使用7 d。2月9日，10%恩諾沙星注射液 0.025 mL/kg（約 1.0～1.5 mL/頭），全群注射1次。2月12日起，給予體況較差的豬只飲用電解多維、補液鹽等。

2）飼養(yǎng)管理。要求農(nóng)場主及時清理豬舍內(nèi)的排泄物，保證豬舍內(nèi)環(huán)境干燥；略微提高豬舍內(nèi)溫度，并保證溫度盡可能恒定。

3）2月11日起，豬群急性死亡數(shù)量明顯降低，采食量明顯升高（圖12），之后死亡的豬只多數(shù)為慢性病例（圖13）。

圖12 豬群日采食量變化曲線

圖13 豬群日死亡數(shù)量曲線

6 討論

6.1 預防措施

沙門氏菌感染在豬群中相當普遍，但未必造成嚴重的臨床癥狀，毒力較強的菌株大劑量感染是導致急性沙門氏菌腸炎的主要原因。豬群飼養(yǎng)密度過大、豬舍衛(wèi)生差、豬舍內(nèi)濕度過大均可導致環(huán)境中沙門氏菌載量增加，日糧更換、豬只混群會導致豬群抵抗力下降，增加發(fā)病的風險。此案例中，豬舍漏糞地板面積較小，大部分為水泥地面，豬只排泄物清理不及時，這2個方面的因素是導致發(fā)病的最主要原因。干燥的環(huán)境、良好的衛(wèi)生條件是預防該病的有效手段。

6.2 綜合診斷

本案例診斷初期，鑒于腹瀉癥狀發(fā)展十分迅速，筆者將該案例判定為病毒感染導致。隨后2～3 d豬群出現(xiàn)大量急性死亡豬只，這與病毒性腹瀉的臨床表現(xiàn)相悖，與此同時，病原學診斷顯示，PEDV和TGEV都為陰性，因此，診斷指向細菌性腹瀉。本案例診斷后期，發(fā)現(xiàn)血性下痢、結腸壞死灶等癥狀，同時細菌分離鑒定顯示沙門氏菌呈陽性，給予了確診。以往經(jīng)驗，豬流行性腹瀉（PED）和豬傳染性胃腸炎（TGE）在抗體陰性的豬群中發(fā)病極為迅速，發(fā)病率可高達80%以上，而細菌性腹瀉往往起病略緩，發(fā)病率略低。本案例的發(fā)生啟示，某些情況下，沙門氏菌導致的腹瀉發(fā)病速度亦較快，發(fā)病率與病毒性腹瀉相差不大。PED和TGE僅可以造成哺乳仔豬的大量死亡，保育豬群發(fā)生時死亡率極低，在育肥豬群中，死亡率幾乎為零[2]。本案例診斷后期通過死亡率的分析和病原學診斷，否定了病毒性腹瀉的診斷。

本案例的后期診斷依然存在疑點，通常情況下育肥豬出血性下痢由沙門氏菌、胞內(nèi)勞森氏菌、豬痢疾密螺旋體感染導致。本案例中通過臨床癥狀、剖檢診斷以及細菌分離鑒定，綜合診斷為沙門氏菌感染。由于實驗室條件的限制，并沒有從病原學層面排除胞內(nèi)勞森氏菌和豬痢疾密螺旋體感染的可能性。胞內(nèi)勞森氏菌感染可引起豬的急性回腸炎，導致豬小腸急性出血（偶見結腸出血），糞便呈亮黑色，最急性案例可呈現(xiàn)鮮血便；剖檢可見小腸充滿出血，結腸內(nèi)容物呈亮黑色，最急性案例可見小腸內(nèi)充滿大量血液，結腸內(nèi)容物正常[3]；豬痢疾密螺旋體感染可導致結腸出血，糞便往往呈鮮紅色，剖檢可見盲腸、結腸內(nèi)大量充滿血液，回腸以上部位正常[4]。

本案例中，可見的剖檢病變包括:脾臟腫大、淋巴結腫大、腸道充血、腸壁增厚、腸道出血與潰瘍。脾臟腫大在急性病例和慢性病例中都較為常見，淋巴結腫大、出血也較為常見，但主要表現(xiàn)在腸系膜淋巴結；腸道充血、腸壁增厚在急性病例中較為常見；回腸、盲腸、結腸出血在急性病例中零星可見，在慢性病例中罕見；盲腸、結腸潰瘍在急性病例中發(fā)生機率很小，但是慢性病例中極為常見，且病變非常典型。

6.3 控制方案

在本案例中，發(fā)病十分迅速，快速干預十分重要。以往經(jīng)驗，粘桿菌素、恩諾沙星、氟苯尼考、新霉素、頭孢噻呋、鏈霉素等對沙門氏菌均有效，快速篩選最為敏感藥物相當重要。注射給藥相對于口服給藥，藥效迅速，急性案例可保證快速干預。因此，在急性沙門氏菌案例中，需要格外注意干預速度、藥物選擇、給藥方式。

6.4 疫情損失與疫情處理機制

本案例共計有54頭育肥豬死亡（35～45 kg），直接經(jīng)濟損失為4.0～4.5萬元；由于疫病的發(fā)生，該育肥豬群上市時間至少延遲10 d，多余的飼料成本為6.5～7.0萬元。因此，此次疫情損失約為11萬元。

該案例中，農(nóng)場主與獸醫(yī)的溝通方面尚存在可提高改善的空間，農(nóng)場主對信息反饋的準確性有待提高，獸醫(yī)對于疫病診斷的及時性還有提升的空間，這可為疾病的控制爭取時間。因此，良好的疫情預警、匯報、診療機制是豬場降低疾病損失的重要措施。