劉 楊，王 超，劉倩倩，湯有宏

（安徽潤(rùn)安信科檢測(cè)科技檢測(cè)有限公司，安徽亳州236820）

酒中的氰化物主要來(lái)自原料，以木薯、野生植物釀制的酒，氰化物含量較高，氰化物的毒性主要由其在體內(nèi)釋放的氰根而引起，可引起頭暈、頭痛、乏力等，皮膚長(zhǎng)期接觸后，可引起皮疹，表現(xiàn)為斑疹、丘疹等癥狀，氰化物是食品的一項(xiàng)重要安全檢測(cè)指標(biāo)，本文采用紫外分光光度法進(jìn)行食用酒精中氰化物含量的檢測(cè)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)該過(guò)程的不確定度進(jìn)行分析討論。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

材料與試劑：食用酒精樣品1（加標(biāo)），氫氧化鈉溶液（2 g/L），乙酸溶液(1+24)，氰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000 mg/L），磷酸鹽緩沖溶液(0.5 mol/L)，氯胺T溶液(10 g/L)，異煙酸-吡唑啉酮溶液，酚酞指示劑(10 g/L)。

儀器設(shè)備：紫外可見分光光度計(jì)（配1 cm比色皿），分析天平（感量為0.1 mg），恒溫水浴鍋：37℃±1℃，電加熱板：120℃±1℃，1 mL移液管A級(jí)，2 mL移液管A級(jí)，10 mL移液管A級(jí)，10 mL具塞比色管，100 mL容量瓶A級(jí)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)原理

食用酒精在堿性條件下加熱，然后在pH7.0條件下，用氯胺T將氰化物轉(zhuǎn)變?yōu)槁然瑁倥c異煙酸-吡唑啉酮作用，生成藍(lán)色染料，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

1.2.2 操作步驟

（1）吸取1.0 mL試樣于50 mL燒杯中，加入5 mL的2 g/L氫氧化鈉溶液，放置10 min，然后置于120℃電加熱板上加熱至溶液剩余約1 mL，取下放至室溫，用2 g/L氫氧化鈉溶液轉(zhuǎn)移至10 mL具塞比色管中，最后加2 g/L氫氧化鈉至5 mL。

（2）用移液管分別吸取0 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.2 mL、1.6 mL、2.0 mL氰離子標(biāo)準(zhǔn)中間液于10 mL具塞比色管中，加2 g/L氫氧化鈉至5 mL。

（3）于試樣及標(biāo)準(zhǔn)管中分別加入2滴酚酞指示劑，然后加入乙酸溶液調(diào)至紅色褪去，再用2 g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至近紅色，然后加2 mL磷酸鹽緩沖溶液(如果室溫低于20℃，即放入25～30℃水浴中10 min)，再加入0.2 mL氯胺T溶液，搖勻放置3 min，加入2 mL異煙酸-吡唑啉酮溶液，加水稀釋至刻度，加塞振蕩混合均勻，在37℃恒溫水浴鍋中放置40 min，取出用1 cm比色杯以空白管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)638 nm處測(cè)吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 數(shù)學(xué)模型

蒸餾酒及其配制酒結(jié)果計(jì)算，試樣中氰化物(以 CN-計(jì))的含量按式(1)計(jì)算：

式中：X——試樣中氰化物含量(以CN-計(jì))，mg/L；

m——測(cè)定用試樣中氰化物的質(zhì)量，μg；

1000——換算系數(shù)；

V——試樣體積，mL；

計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

2.2 不確定度來(lái)源

從測(cè)定全過(guò)程分析，不確定度來(lái)源主要包括以下方面：

（1）樣品測(cè)定重復(fù)性產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度（Ur1）；（2）樣品前處理過(guò)程中產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度（Ur2）；（3）標(biāo)準(zhǔn)使用液配制產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度（Ur3）；（4）紫外可見分光光度計(jì)產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度（Ur4）。

2.3 不確定度的評(píng)定

2.3.1 樣品測(cè)定過(guò)程中重復(fù)性產(chǎn)生相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度（Ur1）

對(duì)食用酒精樣品1（加標(biāo)）中氰化物含量進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，結(jié)果見表1。

表1 食用酒精樣品中氰化物含量結(jié)果

平均含量為X=0.348 mg/L，計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0017，所以其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

2.3.2 樣品前處理過(guò)程中產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度Ur2

樣品前處理過(guò)程產(chǎn)生的不確定度主要來(lái)源于食用酒精樣品的量取、定容。食用酒精樣品前處理產(chǎn)生的不確定度，1 mL、2 mL移液管引起的相對(duì)不確定度和比色管引起的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為Ur2y（V1）、Ur2y（V2）、Ur2b（V1）。

（1）1 mL移液管為A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，允許差為0.005 mL，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

體積讀數(shù)的不確定度按估算誤差0.003 mL，同樣服從均勻分布，則其產(chǎn)生的不確定度：

移液管溫度變化引起的不確定度U2T（V1）可只考慮液體體積變化帶來(lái)的不確定度。已知水的膨脹系數(shù)α=2.1×10-4℃，移液管在20℃校準(zhǔn)，測(cè)試溫度在（20±4）℃范圍內(nèi)波動(dòng)，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

所以1 mL移液管的合成不確定度：

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

（2）2.0 mL刻度移液管為A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，允許差為0.010 mL，按照均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

體積讀數(shù)的不確定度按估算誤差0.003 mL，同樣也服從均勻分布，則：

移液管溫度變化引起的不確定度u2（TV2）可只考慮液體體積變化帶來(lái)的不確定度。已知水的膨脹系數(shù)α=2.1×10-4℃，移液管在20℃校準(zhǔn)，測(cè)試溫度在（20±4）℃范圍內(nèi)波動(dòng)，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

則2.0 mL移液管帶來(lái)的合成不確定度為：

相對(duì)不確定度：

（3）定容產(chǎn)生的不確定度，即10 mL比色管引起的相對(duì)不確定度Ur2（bV1），10 mL比色管容量允許偏差為10.012 mL，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

體積讀數(shù)的不確定度按估算誤差0.005 mL，同樣服從均勻分布，則。

比色管溫度變化引起的不確定度u2b（TV1）：已知水的膨脹系數(shù)α=2.1×10-4℃，移液管在20℃校準(zhǔn)，測(cè)試溫度在（20±4）℃范圍內(nèi)波動(dòng)，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

則10.0 mL比色管帶來(lái)的合成不確定度為：

相對(duì)不確定度：

所以樣品前處理過(guò)程中產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)使用液配制產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度Ur3

（1）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書，其相對(duì)擴(kuò)展不確定度為1%（k=2），則氰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對(duì)不確定度為：

（2）移液管的容量引起的不確定度U3y相對(duì)（V1），10 mL移液管為A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，允許差為0.0020 mL，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

體積讀數(shù)的不確定度按估算誤差0.005 mL，同樣服從均勻分布，則產(chǎn)生的不確定度為：

移液管溫度變化引起的不確定度u3（TV1）可只考慮液體體積變化帶來(lái)的不確定度。已知水的膨脹系數(shù)α=2.1×10-4℃，移液管在20℃校準(zhǔn)，測(cè)試溫度在（20±4）℃范圍內(nèi)波動(dòng)，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

所以10 mL移液管的合成不確定度：

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

（3）100 mL容量瓶容量允許偏差0.10 mL，按均勻分布，其產(chǎn)生的不確定度：

體積讀數(shù)的不確定度按估算誤差0.005 mL，同樣服從均勻分布，則：

容量瓶溫度變化引起的不確定度U3R（TV1）同上一樣計(jì)算，得出其產(chǎn)生的不確定度：

所以100 mL容量瓶的合成不確定度：

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

綜上可知，標(biāo)準(zhǔn)使用液配制產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.3.4 紫外可見分光光度計(jì)產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度Ur4

由紫外可見分光光度計(jì)的檢定證書可知，透射比示值誤差為0.4%，按均勻分布，取，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

2.4 合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定（表2）

表2 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

由上可知相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.5 擴(kuò)展不確定度評(píng)定

取 k=2，則擴(kuò)展不確定度為：U=k×U(X)=2×0.003=0.006。

3 結(jié)論

本次所測(cè)食用酒精樣品中氰化物測(cè)定結(jié)果為：0.348 mg/L±0.006 mg/L，擴(kuò)展不確定度U=0.006，它是由合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度U（X）=0.003乘以包含因子k=2而得到。

本法對(duì)食用酒精氰化物含量檢測(cè)結(jié)果的不確定度進(jìn)行了評(píng)定，此測(cè)量不確定度的主要來(lái)源為樣品測(cè)定重復(fù)性、樣品前處理過(guò)程、標(biāo)準(zhǔn)使用液的配制、紫外可見分光光度計(jì)等。對(duì)其分量應(yīng)采取相應(yīng)措施，如增加待測(cè)樣品測(cè)定次數(shù)，保持儀器的穩(wěn)定性，提高分析實(shí)驗(yàn)水平，以確保分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、科學(xué)性和嚴(yán)密性，盡可能降低測(cè)量的不確定度，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。