楊均秀 謝巧玲 梁林國(guó)

【摘要】 目的 探討腸型脂肪酸結(jié)合蛋白（I-FABP）和超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）聯(lián)合檢測(cè)在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎（NEC）診斷中的意義。方法 選取2015年4月～2017年6月在本院新生兒科住院確診為NEC的患兒29例作為NEC組， 選取同期確診為敗血癥的患兒29例（排除合并NEC）作為敗血癥組， 另選同期無NEC及敗血癥臨床癥狀且由實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)無感染的32例新生兒作為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測(cè)三組血清I-FABP水平， 同時(shí)采取動(dòng)脈血標(biāo)本送本院檢驗(yàn)科檢測(cè)hs-CRP水平， 比較三組患兒24 h內(nèi)I-FABP水平及不同時(shí)間hs-CRP水平。結(jié)果 NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對(duì)照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對(duì)照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對(duì)照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 I-FABP水平可能成為NEC早期診斷的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)， 雖然hs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測(cè)卻可以評(píng)估疾病的進(jìn)展情況。

【關(guān)鍵詞】 新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎;腸型脂肪酸結(jié)合蛋白;超敏C反應(yīng)蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.11.003

【Abstract】 Objective? ?To discuss the significance of combined detection of intestinal fatty acid binding protein （I-FABP） and hypersensitive C-reactive protein （hs-CRP） in the diagnosis of neonatal necrotizing enterocolitis （NEC）. Methods? ?A total of 29 neonates diagnosed as NEC in our hospital during April 2015 ～?June 2017 were selected as NEC group， 29 neonates with sepsis diagnosed at the same time （excluding the combination of NEC） selected as the sepsis group， and 32 neonates without NEC and clinical symptoms of sepsis confirmed by laboratory as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect the levels of serum I-FABP in three groups. Meanwhile， artery blood samples were sent to the laboratory of our hospital to detect the levels of hs-CRP. The I-FABP level within 24 h and hs-CRP at different times in three groups was compared. Results? ?NEC group had I-FABP level as （36.09±14.78） ng/ml， which was （22.49±14.36） ng/ml?in sepsis group， and （11.08±7.85） ng/ml in control group. Their difference was statistically significant （P<0.05）. NEC group had hs-CRP level within 24 h， 3 d and 6 d respectively as （24.09±36.26）， （12.26±10.38） and （3.58±3.67） mg/L， sepsis group had hs-CRP level reapectively as （28.24±45.36）， （12.07±13.23） and （3.49±2.58） mg/L and control group had hs-CRP level within 24 h as （2.08±0.85） mg/L. NEC group and sepsis group had no statistically significant difference in hs-CRP within 24 h， 3 d and 6 d （P>0.05）. NEC group and sepsis group had higher hs-CRP level within 24 h than the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. NEC group and sepsis group had higher hs-CRP level within 24 h and 3 d than those within?6 d， and higher hs-CRP level within 24 h than those within 3 d. Their difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? ?I-FABP level may be a predictor of early diagnosis of NEC. Although the specificity of hs-CRP is not high， continuous monitoring of its serum level can assess the progress of the disease.

【Key words】 Neonatal necrotizing enterocolitis; Intestinal fatty acid binding protein; Hypersensitive C-reactive protein

新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎（neonatal necrotizing enterocolitis，?NEC）是由圍生期多種致病因素導(dǎo)致的以腹脹、嘔吐、便血為主要癥狀的急性壞死性腸道疾病。其發(fā)病機(jī)制尚不完全明確， 多認(rèn)為與早產(chǎn)、低出生體重、感染、腸黏膜缺氧缺血、喂養(yǎng)不當(dāng)?shù)纫蛩赜嘘P(guān)。NEC晚期預(yù)后差， 存活患兒部分留有短腸綜合征、生長(zhǎng)受限、遠(yuǎn)期神經(jīng)發(fā)育不良等后遺癥[1]， 因此NEC早期診斷尤為重要。目前， NEC的診斷主要依靠臨床癥狀及腹部X線、B超檢查， 但是NEC的早期臨床表現(xiàn)及腹部X線、B超表現(xiàn)都是非特異性的， 導(dǎo)致NEC的早期診斷困難。因此尋找一種更有效的診斷指標(biāo)， 對(duì)提高NEC的早期診斷率、降低NEC的死亡率有著重要意義。本研究旨在研究I-FABP和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)在診斷新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年4月～2017年6月在佛山市禪城區(qū)中心醫(yī)院新生兒科住院的新生兒作為研究對(duì)象， 選取根據(jù)BellNEC臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為NEC的患兒29例（全部患兒均為經(jīng)保守治療1周內(nèi)病情好轉(zhuǎn)的患兒， 保守治療失敗的患兒轉(zhuǎn)外院?？浦委煻顺稣n題研究）歸為NEC組;選取同期在新生兒科病房住院的敗血癥的患兒（排除合并NEC）29例歸為敗血癥組， 新生兒敗血癥根據(jù)國(guó)際膿毒癥共識(shí)（internationaI sepsis consensus）中定義的標(biāo)準(zhǔn)， 該組患兒具有體溫改變、反應(yīng)不佳、黃疸、喂養(yǎng)不耐受、呼吸暫停等敗血癥臨床癥狀且血培養(yǎng)為陽性， 確診無NEC的患兒;另選同期無NEC及敗血癥臨床癥狀且由實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)無感染的新生兒32例歸為對(duì)照組。三組胎齡、性別、體重等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。見表1。該研究獲得研究對(duì)象監(jiān)護(hù)人的知情同意， 且已通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員審查。

1. 2 標(biāo)本的采集及血清I-FABP水平檢測(cè) NEC組患兒出現(xiàn)可疑的NEC癥狀后24 h內(nèi)采集橈動(dòng)脈血液標(biāo)本1.5 ml， 敗血癥組患兒出現(xiàn)癥狀24 h內(nèi)采集橈動(dòng)脈血液標(biāo)本1.5 ml， 將所采血液標(biāo)本經(jīng)3000 r/min離心5 min， 留取上清液0.5 ml置EP管， 并于-80℃冰箱凍存， 定期批量測(cè)定。使用I-FABP酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒（上海凡科維生物技術(shù)有限公司）進(jìn)行測(cè)定。

1. 3 hs-CRP水平測(cè)定 NEC組及敗血癥組于出現(xiàn)癥狀的24 h內(nèi)、3 d、6 d送標(biāo)本至本院檢驗(yàn)科檢測(cè)hs-CRP水平， 對(duì)照組僅于24 h內(nèi)送檢1次。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);多行多列計(jì)量資料采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組24 h內(nèi)I-FABP水平比較 NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對(duì)照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對(duì)照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2. 2 三組不同時(shí)間hs-CRP水平比較 NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對(duì)照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)d hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

NEC是新生兒時(shí)期比較常見的消化系統(tǒng)危重癥， 嚴(yán)重者甚至可能危及生命， 臨床癥狀以腹脹、嘔吐、便血為主要癥狀的急性壞死性腸道疾病。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)如血清白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)、CRP、糞隱血試驗(yàn)對(duì)NEC早期診斷的敏感度和特異度均較低， 影像學(xué)檢查X線片上、胃腸彩超初期亦無明顯改變， 待X線片、彩超出現(xiàn)典型影像時(shí)往往表示病情已嚴(yán)重。NEC的治療早期以禁食、營(yíng)養(yǎng)支持、抗感染為主， 晚期出現(xiàn)腸壞死、穿孔時(shí)則以外科治療為主， 病死率高， 術(shù)后遠(yuǎn)期生存質(zhì)量常受影響。因此NEC的早期診斷尤為重要， 但目前臨床上尚缺乏可靠的生物學(xué)診斷指標(biāo)。因此在發(fā)病早期可以使用的敏感性及特異性較高的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)對(duì)本病的診治有重要意義。

3. 1 I-FABP 脂肪酸結(jié)合蛋白是一種轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸的低分子量蛋白質(zhì)， 有很多亞型， 具有組織器官特異性[2]。肪肪酸結(jié)合蛋白家族是脂質(zhì)結(jié)合蛋白超家族成員， 廣泛存在于哺乳動(dòng)物的小腸、肝、心、腦、骨骼肌等多種細(xì)胞內(nèi)。I-FABP是其中的重要成員， 主要局限表達(dá)于小腸黏膜細(xì)胞和胃黏膜細(xì)胞， 具有較好的器官特異性， 對(duì)診斷腸道缺血缺氧、炎癥壞死具有較大的臨床價(jià)值。正常情況下， 其在血清中含量很少。當(dāng)腸黏膜受損時(shí)， 由于細(xì)胞膜的通透性增加， 其在血清中的含量增加， 被認(rèn)為是NEC早期診斷和疾病嚴(yán)重程度預(yù)測(cè)的潛在生物學(xué)標(biāo)志物[3]。Ng EW等[4]研究顯示， I-FABP區(qū)分NEC的敏感性為50%， 特異性為95%。秦嘉麗等[5]研究認(rèn)為， 血清I-FABP≥2.165 ng/ml可作為NEC的診斷標(biāo)準(zhǔn)， 其診斷靈敏度為73.1%， 特異度為88.5%。李粹等[6]研究顯示， 患兒在出現(xiàn)NEC可疑癥狀時(shí)及2～3 d癥狀無明顯緩解時(shí)抽血檢測(cè)血清I-FABP濃度， 結(jié)果顯示最后出院診斷為NEC的患兒其濃度在這兩個(gè)采血點(diǎn)均明顯高于非NEC組。上述研究均說明血清I-FABP可以作為NEC早期診斷較為理想的生化指標(biāo)之一。本研究采集患兒發(fā)病后24 h內(nèi)標(biāo)本測(cè)定血清I-FABP水平， 結(jié)果顯示NEC組患兒血清I-FABP水平高于敗血癥組和對(duì)照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。故血清I-FABP水平可能成為NEC早期診斷的一個(gè)有效指標(biāo)。

3. 2 hs-CRP hs-CRP是監(jiān)測(cè)炎癥反應(yīng)的一個(gè)常用指標(biāo)， 已被廣泛應(yīng)用于臨床。CRP水平在受損傷后的6～8 h開始升高， 被認(rèn)為是一種“晚期預(yù)警”的生物標(biāo)志物。雖然CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測(cè)卻可以評(píng)估疾病的進(jìn)展情況[7]。CRP為肝臟產(chǎn)生的急性期反應(yīng)物， 在機(jī)體感染、炎癥或組織損傷時(shí)可出現(xiàn)水平升高。一般出現(xiàn)在感染后6～8 h開始升高， 與感染程度呈正相關(guān)， 24～48 h達(dá)峰值;張愛梅等[8]對(duì)NEC患兒進(jìn)行早期CRP及降鈣素原（PCT）水平的監(jiān)測(cè)后發(fā)現(xiàn)， 隨著有效的治療， 病情的恢復(fù)， 兩項(xiàng)指標(biāo)均可顯著下降， 因此對(duì)NEC早期診斷、病情演變及隨訪治療效果的評(píng)估有重要價(jià)值。阿爽等[9]對(duì)30例壞死性小腸結(jié)腸炎患兒常規(guī)進(jìn)行CRP及白細(xì)胞（WBC）水平的連續(xù)檢測(cè)， 將手術(shù)組及非手術(shù)組兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較， 研究認(rèn)為血清CRP具有重要的臨床價(jià)值， 有助于壞死性小腸結(jié)腸炎的早期診斷和病情分期， 有助于觀察療效， 及時(shí)掌握手術(shù)時(shí)機(jī)。但胡曉艷等[10]對(duì)60例NEC病例研究中發(fā)現(xiàn)， NEC只有合并感染后PCT及CRP才會(huì)相應(yīng)升高， 但并非所有NEC病例都合并感染， 所以檢測(cè)感染指標(biāo)CRP及PCT的特異性差， 容易造成早期NEC的漏診。

本研究結(jié)果顯示， NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對(duì)照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對(duì)照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對(duì)照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。本研究顯示dhs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測(cè)卻可以評(píng)估疾病的進(jìn)展情況。

綜上所述， 血清I-FABP可成為NEC早期診斷的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)。雖然hs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測(cè)卻可以評(píng)估疾病的進(jìn)展情況， 本研究未將NEC組進(jìn)行分期， 在后續(xù)的研究中可進(jìn)一步測(cè)定NEC患兒不同分期的血清I-FABP水平以及其在預(yù)測(cè)病情的嚴(yán)重程度上是否存在價(jià)值。

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[收稿日期：2018-10-22]