福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院影像科 (福建 漳州 363000)

陳玉珊 詹阿來(lái)

腦膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的原發(fā)性顱腦腫瘤，不同級(jí)別膠質(zhì)瘤的臨床與細(xì)胞病理表現(xiàn)有所不同，低級(jí)別膠質(zhì)瘤主要表現(xiàn)為細(xì)胞低速分裂增生；而高級(jí)別膠質(zhì)瘤則表現(xiàn)為高速的細(xì)胞分裂增生以及伴隨新生血管生成和腫瘤的缺氧、壞死[1-2]。因此，顱腦膠質(zhì)瘤不僅要明確膠質(zhì)瘤的臨床診斷，更要明確其分化級(jí)別，為患者制定不同的治療方案。多模態(tài)磁共振是新型的磁共振檢查模式，通過(guò)有機(jī)融合各項(xiàng)磁共振功能成像技術(shù)，提高磁共振檢查的準(zhǔn)確性[3]。CD151是tetraspanin家族的成員之一，這些成員大多數(shù)是細(xì)胞表面蛋白，具有特征性的四個(gè)疏水結(jié)構(gòu)域。CD151在細(xì)胞發(fā)育、活化、生長(zhǎng)和運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)中具有重要的介導(dǎo)作用，此外，它還參與包括細(xì)胞粘附在內(nèi)的許多生物活動(dòng)，并可能具有增強(qiáng)癌細(xì)胞的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性：侵襲和轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，腦膠質(zhì)瘤患者CD151水平顯著升高，提示其與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[4]。SNAT1是一種Na+偶聯(lián)的中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要在表達(dá)于胎盤(pán)、大腦和脊髓中。研究[5-6]發(fā)現(xiàn)，SNAT1在膠質(zhì)瘤患者中表達(dá)顯著升高，且與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展具有密切相關(guān)性。為此，本文聯(lián)合CD151、SNAT1及多模態(tài)磁共振，望提高顱腦膠質(zhì)瘤的診斷效率。現(xiàn)將報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2016年11月～2017年11月本院收治的48例高級(jí)別顱腦膠質(zhì)瘤患者，將其作為高級(jí)別膠質(zhì)瘤組；另選取64例低級(jí)別顱腦膠質(zhì)瘤患者，將其作為低級(jí)別膠質(zhì)瘤組；同時(shí)選取我院行顱腦檢查的60例無(wú)顱腦膠質(zhì)瘤患者，將其作為對(duì)照組。高級(jí)別膠質(zhì)瘤組患者男27例，女21例，年齡在22～63歲之間，平均年齡為(35.9±3.9)歲，體重在51～77kg之間，平均體重為(61.4±5.1)kg；低級(jí)別膠質(zhì)瘤組患者男36例，女28例，年齡在22～64歲之間，平均年齡為(36.1±3.7)歲，體重在50～76kg之間，平均體重為(61.0±5.2)kg；對(duì)照組患者為我院既往行顱腦減壓術(shù)患者，男34例，女26例，年齡在21～53歲之間，平均年齡為(37.0±3.2)歲，體重在50～73kg之間，平均體重為(61.3±5.4)kg。以上患者均在我院經(jīng)病理確診，高低級(jí)別膠質(zhì)瘤診斷也是按照病理組織進(jìn)行判定，本研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬知情并同意本研究。

1.2.1 入選標(biāo)準(zhǔn)：以上患者在我院進(jìn)行顱腦檢查并確診，符合第八版內(nèi)科學(xué)顱腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；無(wú)嚴(yán)重傳染性疾病；未合并嚴(yán)重呼吸及循環(huán)系統(tǒng)疾病；未合并其他神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤；無(wú)酒精成癮史。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并顱腦炎者；合并既往顱腦手術(shù)史者；因各種原因無(wú)法完成本研究包含測(cè)評(píng)表者；伴有呼吸系統(tǒng)的急性感染者。

1.3 方法 觀察并記錄受試者一般資料(包括性別、年齡、體重)，對(duì)以上所有受試者進(jìn)行顱腦多模態(tài)磁共振檢查，并測(cè)定各組患者CD151、SNAT1陽(yáng)性率。統(tǒng)計(jì)分析各診斷方法在高級(jí)別顱腦膠質(zhì)瘤中的診斷效果，并對(duì)各診斷方法進(jìn)行ROC曲線分析。病理檢查：所有受試者腦組織標(biāo)本離體后經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋。SNAT1表達(dá)陽(yáng)性率采用Western Blot法進(jìn)行檢測(cè)，CD151表達(dá)陽(yáng)性率采用免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)。以上操作由我院檢驗(yàn)科人員嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，所有試劑盒及試劑均購(gòu)自上海嵐派生物技術(shù)有限公司。磁共振檢查方法參考Park M J等人[8]在研究中的檢查方法，由兩名我院影像科專業(yè)醫(yī)師進(jìn)行讀片，意見(jiàn)分歧時(shí)進(jìn)行討論并重新評(píng)定。

1.4 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) ①CD151陽(yáng)性表達(dá)判定：CD151陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞(圖1)，隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡(×400)視野，記錄每張切片陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目及染色強(qiáng)度，綜合陽(yáng)性細(xì)胞百分比(A)和染色強(qiáng)度(B)進(jìn)行半定量分析。A：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0分、陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分、11%～50%為2分、51%～80%為3分、＞80%為4分；B：無(wú)色為0分、淡黃色為1分、棕黃色為2分、棕褐色為3分。A×B為總分：＞4分為(+)，余為(-)。②SNAT1檢查：觀察5個(gè)不重復(fù)高倍鏡視野(×400)，計(jì)數(shù)SNAT1陽(yáng)性細(xì)胞。其中：陽(yáng)性細(xì)胞百分比≤25%為1分，＞25%～50%為2分，＞50%～75%為3分，＞75%為4分；根據(jù)染色程度評(píng)分：無(wú)染色者為0分，淡黃色者為1分，黃色或棕黃色者為2分，褐色者為3分。最后以兩者評(píng)分的總和為最終評(píng)分，0分為陰性，1～7分為陽(yáng)性，其中1～3分為低表達(dá)，4～7分為高表達(dá)。③平行聯(lián)合檢測(cè)判定：不同檢測(cè)方法中，任何一個(gè)出現(xiàn)陽(yáng)性，即判定為陽(yáng)性；④系列聯(lián)合檢測(cè)：幾個(gè)檢測(cè)方法均出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，判定為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本研究的數(shù)據(jù)分析采用spss19.0進(jìn)行，計(jì)數(shù)資料以率來(lái)表示，采用χ2檢驗(yàn)比較，計(jì)量資料以(s)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，t檢驗(yàn)比較正態(tài)分布的計(jì)量資料，ANOVA比較多組間計(jì)量資料，采用ROC曲線比較多種診斷方法診斷效率，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P＜0.05視為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 各組患者CD151、SNAT1陽(yáng)性率比較 對(duì)照組及低級(jí)別膠質(zhì)瘤組CD151、SNAT1陽(yáng)性率無(wú)明顯差異(P＞0.05)，各組患者CD151、SNAT1陽(yáng)性率差異明顯(P ＜0.0 5)，高級(jí)別膠質(zhì)瘤組CD151、SNAT1陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組及低級(jí)別膠質(zhì)瘤組(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

2.2 單項(xiàng)檢測(cè)診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤效能分析 單純CD151、SNAT1、磁共振下高級(jí)別膠質(zhì)瘤診斷結(jié)果差異明顯(P＜0.05)，磁共振診斷的特異度顯著高于CD151、SNAT1的診斷特異度(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

2.3 各聯(lián)合檢測(cè)診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤診斷效能比較CD151+SNAT1+磁共振診斷平行及系列聯(lián)合下，高級(jí)別顱腦膠質(zhì)瘤診斷效能明顯提高，平行聯(lián)合檢測(cè)下，敏感度、陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于CD151+磁共振、SNAT1+磁共振(P＜0.05)；系列聯(lián)合檢測(cè)下，CD151+SNAT1+磁共振診斷的特異度顯著高于CD151+磁共振(P＜0.05)；在聯(lián)合診斷的敏感性方面，平行聯(lián)合診斷的敏感性明顯高于系列聯(lián)合診斷(P＜0.05)，在聯(lián)合診斷的特異性方面，系列聯(lián)合診斷的特異性明顯高于平行聯(lián)合診斷(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表3。

2.4 聯(lián)合檢測(cè)診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤的ROC曲線分析 CD151+磁共振、S N A T 1+磁共振及CD151+SNAT1+磁共振診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤的ROC曲線如圖1，平行聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積分別為0.716、0.785和0.918，系列聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積為0.784、0.748和0.903，CD151+SNAT1+磁共振診斷的ROC曲線下面積顯著高于CD151+磁共振、SNAT1+磁共振(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)圖1-2。

2.5 膠質(zhì)瘤圖像分析 見(jiàn)圖3-12。

3 討 論

對(duì)于低級(jí)別膠質(zhì)瘤，如毛細(xì)胞星形細(xì)胞瘤，手術(shù)的完整切除，是可使患者得到根治并長(zhǎng)期存活[9]。而高級(jí)別的腦膠質(zhì)瘤不僅體積大，手術(shù)難以完全切除，且擴(kuò)散范圍大，血運(yùn)豐富，大大提高了手術(shù)難度。早期診斷并采取針對(duì)性治療措施能有效提高治療成功率。

多模態(tài)磁共振是指整合多種磁共振成像技術(shù)以彌補(bǔ)不同成像技術(shù)缺陷的新型診斷手段。異常增生的膠質(zhì)細(xì)胞是膠質(zhì)瘤的重要組成部分，其中多數(shù)細(xì)胞屬神經(jīng)上皮來(lái)源[10]。雖然膠質(zhì)瘤中神經(jīng)元數(shù)量下降，但膠質(zhì)瘤組織的代謝強(qiáng)度并未因此下降，反而升高。因此，相對(duì)于正常細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞在MRS圖像上NAA波形明顯降低，隨著高級(jí)別膠質(zhì)瘤細(xì)胞數(shù)量升高，膠質(zhì)瘤組織呈現(xiàn)升高的Lip波，并伴隨著Lac波的升高(提示周圍組織的缺氧)。伴隨惡性腫瘤細(xì)胞有絲分裂的增加，細(xì)胞代謝明顯高于周圍正常組織。SNAT1參與體內(nèi)多項(xiàng)生物代謝，多項(xiàng)研究[11]發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤組織中SNAT1水平顯著升高，可能與腫瘤組織的生長(zhǎng)有關(guān)。CD151可以與整合素受體結(jié)合，造成細(xì)胞缺血缺氧; 還能激活內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)新生血管形成，這對(duì)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移意義重大。

本研究中，對(duì)照組及低級(jí)別膠質(zhì)瘤組CD151、SNAT1陽(yáng)性率無(wú)明顯差異(P＞0.05)，各組患者CD151、SNAT1陽(yáng)性率差異明顯(P＜0.05)，高級(jí)別膠質(zhì)瘤組CD151、SNAT1陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組及低級(jí)別膠質(zhì)瘤組(P＜0.05)。此結(jié)果表明，高級(jí)別膠質(zhì)瘤組織中CD151、SNAT1表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤及正常組織。王新軍等人[12-14]也在研究中發(fā)現(xiàn)，CD151、SNAT1與腦膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后顯著相關(guān)，可能與腫瘤組織的侵襲范圍及侵襲能力相關(guān)。單純CD151、SNAT1、磁共振下高級(jí)別膠質(zhì)瘤診斷結(jié)果差異明顯(P＜0.05)，磁共振診斷的特異度顯著高于CD151、SNAT1的診斷特異度(P＜0.05)；CD151+SNAT1+磁共振診斷平行及系列聯(lián)合下，高級(jí)別顱腦膠質(zhì)瘤診斷效能明顯提高，平行聯(lián)合檢測(cè)下，敏感度、陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于CD151+磁共振、SNAT1+磁共振(P＜0.05)；系列聯(lián)合檢測(cè)下，CD151+SNAT1+磁共振診斷的特異度顯著高于CD151+磁共振(P＜0.05)；在聯(lián)合診斷的敏感性方面，平行聯(lián)合診斷的敏感性明顯高于系列聯(lián)合診斷(P＜0.05)，在聯(lián)合診斷的特異性方面，系列聯(lián)合診斷的特異性明顯高于平行聯(lián)合診斷(P＜0.05)。此結(jié)果表明，相對(duì)于單純?cè)\斷，CD151+SNAT1+磁共振聯(lián)合診斷更能有效提高高級(jí)別膠質(zhì)瘤診斷準(zhǔn)確率。Karunanithi等人[15]也在研究中發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合診斷能有效提高診斷的準(zhǔn)確率，可能與聯(lián)合診斷可以綜合考慮多種因素，從而更全面的分析疾病的特點(diǎn)有關(guān)。CD151+磁共振、SNAT1+磁共振及CD151+SNAT1+磁共振診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤的ROC曲線如圖1，平行聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積分別為0.716、0.785和0.918，系列聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積為0.784、0.748和0.903，CD151+SNAT1+磁共振診斷的ROC曲線下面積顯著高于CD151+磁共振、SNAT1+磁共振(P＜0.05)。此結(jié)果表明，CD151+SNAT1+磁共振平行聯(lián)合檢測(cè)較系列聯(lián)合診斷試驗(yàn)更能有效提高高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤的診斷效率。然而，平行聯(lián)合及系列聯(lián)合診斷對(duì)于腦膠質(zhì)瘤的診斷有著不同的參考意義，可以根據(jù)臨床需要選擇合適的聯(lián)合診斷方式，以滿足臨床需要。

表1 各組患者CD151、SNAT1陽(yáng)性率比較(%)

表3 聯(lián)合檢測(cè)診斷高級(jí)別膠質(zhì)瘤效能比較

綜上所述，多模態(tài)磁共振與CD151、SNAT1聯(lián)合檢測(cè)能有效提高顱腦膠質(zhì)瘤診斷特異性及敏感性，值得臨床推廣。

圖1-2 ROC曲線分析，圖1為平行聯(lián)合檢測(cè)，圖2為系列聯(lián)合檢測(cè)。

圖3-12 男，張XX，65歲，右側(cè)頂葉占位。圖3 T1WI低信號(hào)；圖4 T2WI等高信號(hào)；圖5 FLAIR示水腫；圖6 T1+C呈厚環(huán)狀強(qiáng)化；圖7 DWI示高低混雜信號(hào)；圖8 ASL高灌注；圖9 SWI示迂曲線狀低信號(hào)；圖10 DTT灶周纖維束浸潤(rùn)、破壞；圖11 1H-MRS中Cho峰明顯增高，NAA峰明顯降低，寬大Lip和Lac峰；圖12 病理：腫瘤細(xì)胞異型明顯，彌漫片狀排列，無(wú)壞死，為間變型星形細(xì)胞瘤。