周 俊 郭曉輝 周 莉

深圳市人民醫(yī)院產(chǎn)科，廣東深圳 518000

染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常是導(dǎo)致新生兒出生缺陷常見病因，目前尚無特異性的治療方法[1]。目前常用的有創(chuàng)性產(chǎn)前診斷方法有羊膜腔穿刺、絨毛穿刺等，但其具有培養(yǎng)時間長，成功率不高等缺點[2-3]。對于孕周較大的孕婦，臍帶穿刺已經(jīng)成為一種安全、有效的常用性產(chǎn)前診斷方法[4]。本研究總結(jié)了2017 年5 月～2018 年6 月本院行臍帶穿刺術(shù)臍血細(xì)胞培養(yǎng)以及染色體核型分析的680 例病例，闡述不同指征異常核型異常檢出情況，并比較正常新生兒與異常新生兒肝腎功能指標(biāo)差異，為臨床臍血穿刺產(chǎn)前診斷提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年5 月～2018 年6 月本院產(chǎn)科進(jìn)行產(chǎn)前檢查或遺傳咨詢孕婦680 例，年齡21 ～45歲，平均（28.6±3.5）歲；孕周17 ～39 周，平均（31.74±2.85）周；產(chǎn)前診斷指征為高齡36 例，超聲診斷胎兒畸形399 例，唐氏篩查高危88 例，不良孕產(chǎn)史36 例，羊水過多或過少83 例，夫妻雙方地貧26 例，其他12 例。680 例具有不同診斷指征的高危孕婦中共娩出新生兒579 例，其中正常新生兒230 例，納入正常新生兒組；異常新生兒349 例，包括早產(chǎn)109 例，過期新生兒85 例，合并各類新生兒疾病155 例，納入異常新生兒組。正常新生兒組包括男嬰112 例，女嬰118 例。異常新生兒組包括男嬰175 例，女嬰174 例。兩組新生兒性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。

1.2 方法

標(biāo)本采集：術(shù)前常規(guī)行B 超檢查，了解胎兒發(fā)育情況、胎心、胎盤和羊水等基本情況，臍帶定位，選擇穿刺點和角度，固定支架，在超聲引導(dǎo)下行臍帶管穿刺術(shù)，取臍血4mL，置于肝素鈉抗凝的一次性取血管中送實驗室培養(yǎng)；（2）細(xì)胞培養(yǎng)與染色體核型分析：將2mL 臍血接種于1640 培養(yǎng)基中37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)68h，加10μg/mL 的秋水仙素90 ～100μL 繼續(xù)培養(yǎng)1.5h，常規(guī)收獲刺片，胰酶消化G 顯帶，鏡下觀察每例均經(jīng)分析計數(shù)20 ～ 30 個中期分裂相，配對分析5 個核型，如發(fā)現(xiàn)嵌合體則加大計數(shù)至50 ～100 個核型。（3）將抗凝處理后的臍血2mL 于高速冷凍離心機(jī)常溫下進(jìn)行離心，轉(zhuǎn)速為3000r/min，離心10min，置于-20℃低溫保存，通過放射免疫法測定β2-MG 含量，常規(guī)血生化法測定尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBIL）水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS23.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以（表示，兩組肝腎功能指標(biāo)比較采用t 檢驗，核型異常檢出率比較采用χ2檢驗，采用Logistic多因素回歸分析臍血功能指標(biāo)與新生兒預(yù)后之間的關(guān)系，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同指征異常核型異常檢出情況

680 例臍血染色體核型中，101 例核型異常，異常率為14.85%。高齡產(chǎn)婦36 例，超聲診斷胎兒畸形399 例，唐氏篩查高危88 例，不良孕產(chǎn)史36 例，羊水或絨毛染色體異常63 例，夫妻雙方地貧36 例，其他22 例，檢出率分別為11.11%、16.79%、5.68%、8.33%、31.74%、5.56%、0.00%，羊水或絨毛染色體異常核型異常檢出率高于其他指征，各類指征核型異常檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。見表1。

表1 不同指征異常核型異常檢出情況

2.2 臍血染色體異常核型的類型及相應(yīng)指征分布情況

101 例核型異常中，三體綜合癥共33 例，其中21-三體17 例，18-三體4 例，13-三體12 例，占總核型異常比例分別為16.83%、3.96%、11.88%；性染色體異常10 例，占總核型異常比例為9.90%；嵌合體22 例，占總核型異常比例為21.78%；倒位11 例，占總核型異常比例為10.89%；其他21 例，占總核型異常比例為20.79%。見表2。

2.3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標(biāo)比較

680 例具有不同診斷指征的高危孕婦中共娩出新生兒579 例，異常新生兒組肝腎功能指標(biāo)β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量均高于正常新生兒組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。見表3。

表2 臍血染色體異常核型的類型及相應(yīng)指征分布情況

表3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標(biāo)比較（）

表3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標(biāo)比較（）

組別 n β2-MG（μg/mL） BUN（mmol/L） Cr（μmol/L） ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L）正常新生兒組 230 2.35±0.56 4.12±1.23 53.98±17.85 8.12±3.71 5.12±1.07 30.35±8.47異常新生兒組 349 3.28±1.08 4.39±1.27 70.79±16.83 9.87±4.85 5.98±1.41 37.65±9.12 t 12.034 2.535 11.479 4.648 7.845 9.693 P 0.000 0.012 0.000 0.000 0.000 0.000

表4 臍血肝腎功能指標(biāo)與新生兒預(yù)后Logistic多因素回歸分析

2.4 臍血肝腎功能指標(biāo)與新生兒預(yù)后Logistic回歸分析

臍血肝腎功能指標(biāo)β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量是影響新生兒預(yù)后的獨立危險因素。見表4。

3 討論

完善的產(chǎn)前診斷措施，為優(yōu)生優(yōu)育提供了有力保障，在孕中晚期，隨著胎兒的生長發(fā)育以及超聲影像技術(shù)的應(yīng)用，越來越多的胎兒畸形被發(fā)現(xiàn)，當(dāng)孕周＞25 周時，羊水細(xì)胞逐漸老化，胎脂增多，培養(yǎng)困難，培養(yǎng)周期較長，此時行臍帶血核型檢查對胎兒評估具有重要作用[5-6]。

臍血的產(chǎn)前診斷應(yīng)用范圍廣泛，包括胎兒有無遺傳性疾病、宮內(nèi)感染以及血液系統(tǒng)疾病，因此，臍靜脈穿刺和染色體核型分析是孕中晚期重要的產(chǎn)前診斷技術(shù)和方法[7]。同時，臍血染色體核型分析亦可作為病因診斷的有效手段，產(chǎn)前臍血進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)及肝腎代謝功能診斷，可為胎兒評估以及胎兒預(yù)后情況提供重要參考價值[8]。

本研究中680 例臍血染色體核型中，101 例核型異常，異常率為14.85%，高于李素萍等[9]研究結(jié)果。本文中高齡孕產(chǎn)婦染色體異常檢出率達(dá)到11.11%，隨著年齡的增長，孕產(chǎn)婦卵細(xì)胞染色體紡錘體老化，導(dǎo)致染色體不分離的頻率較高，從而增加了染色體三體發(fā)生風(fēng)險，核型異常檢出率較高。本研究中羊水或絨毛染色體異常受檢人數(shù)為63 例，異常檢出率為31.74%，低于林秀華等[10]研究結(jié)果，絨毛及羊水細(xì)胞隨著孕周的增長逐漸老化，產(chǎn)前診斷時間受到限制，同時羊水細(xì)胞培養(yǎng)易出現(xiàn)假性嵌合體，造成誤診，臍血診斷不僅為孕中晚期胎兒染色體產(chǎn)前診斷提供了技術(shù)支持，還可進(jìn)一步診斷核實羊水細(xì)胞診斷結(jié)果，彌補了絨毛和羊水檢測的缺陷。本研究中B 超異常受檢例數(shù)為399 例，占總例數(shù)的一半以上，為進(jìn)行臍血檢查的主要指征，胎兒畸形與染色體關(guān)系密切，此組共檢出67 例異常，檢出率為16.79%，占異常核型的66.33%，與湯麗霞等[11]研究結(jié)果相近，因此當(dāng)B 超檢測表現(xiàn)出一些非特異性的超聲征象時，如腦室輕度擴(kuò)張、胎兒水腫以及心臟強光點等，應(yīng)進(jìn)行產(chǎn)前診斷，以排除染色體異常。唐氏篩查高危組受檢例數(shù)88 例，占總例數(shù)的12.94%，5 例核型異常，檢出率為5.68%，由此臍血染色體可用于排查各項高危指征產(chǎn)婦胎兒染色體異常情況，盧麗華等[12]研究結(jié)果支持本結(jié)論。

染色體數(shù)目異常尤其是三體綜合癥，是嚴(yán)重出生缺陷的主要病因，表現(xiàn)為嚴(yán)重的生長發(fā)育障礙、智力低下、多發(fā)畸形等[13]。少部分21-三體綜合癥B 超顯示無明顯結(jié)構(gòu)畸形，只有通過核型診斷進(jìn)行確診[14]。本研究中。本文中染色體數(shù)目異常共43例，其中三體綜合癥33 例，性染色體異常10 例，染色體三體為妊娠中晚期的主要異常核型，染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)的異常常涉及到多個基因數(shù)量的增減，因此常表現(xiàn)為胎兒器官結(jié)構(gòu)異常，且大部分三體胎兒為多發(fā)畸形，僅小部分21 三體表現(xiàn)為微小的器官結(jié)構(gòu)異常。染色體倒位，普遍認(rèn)為基因無缺失，一般臨床表現(xiàn)正常，屬于遺傳多態(tài)，少數(shù)認(rèn)為有基因的位置效應(yīng)，可增加流產(chǎn)率[15]。本文中染色體倒位共11 例，其中9 號倒位5 例，6 號倒位2 例，3 號倒位3 例，8 號倒位1 例。

本研究中異常新生兒組臍血肝腎功能指標(biāo)檢測β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 指標(biāo)含量均高于正常新生兒組，且通過Logistic 多因素回歸分析結(jié)果顯示各項肝腎功能指標(biāo)聯(lián)合檢測是影響斷新生兒預(yù)后的因素，臍動脈血為胎兒體內(nèi)代謝后的血液，可反映胎兒體內(nèi)代謝狀態(tài)，高危因素對胎兒腎小球濾過功能造成不同程度的影響和損害，造成電解質(zhì)紊亂，腎血流量減少，影響腎小管的吸收，因此產(chǎn)前臍血肝腎功能指標(biāo)檢測，可為胎兒預(yù)后狀態(tài)提供參考價值，提前做好相應(yīng)預(yù)防措施，有利于保障產(chǎn)婦及胎兒生命安全。

綜上所述，妊娠中晚期臍血穿刺產(chǎn)前診斷可有效減少先天缺陷兒的出生，落實優(yōu)生政策，為胎兒預(yù)后情況提供參考價值，有利于保障產(chǎn)婦與胎兒生命安全。