李 勤，曾素根，楊舒羽，石 佳，盧興兵，周 靜

(四川大學(xué)華西醫(yī)院實驗醫(yī)學(xué)科，四川成都 610041)

糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)是人體血液中紅細胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物，HbA1c的形成為不可逆反應(yīng)，在臨床上可有效反映糖尿病患者2～3個月的血糖控制水平，也是臨床中2型糖尿病早期診斷的重要評價標(biāo)準[1]。2010年，美國糖尿病協(xié)會(ADA)已將HbA1c≥6.5%推薦作為糖尿病的一項診斷標(biāo)準[2]。筆者在臨床工作中觀察到1例健康體檢者的HbA1c為0.0%的案例，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 臨床病例

健康體檢者張某，男性，40歲，每年單位組織定期來本院體檢。檢測HbA1c的結(jié)果為0.0%(HLC-723 G8，日本東曹，高效液相色譜法)，見圖1A。該中年健康體檢者出現(xiàn)如此低的糖化血紅蛋白確實很難解釋，查看其歷史數(shù)據(jù)及相關(guān)檢驗結(jié)果：體檢者為第一次查HbA1c，故無該項目的歷史數(shù)據(jù)。血液細胞分析結(jié)果，其紅細胞所有參數(shù)均未發(fā)現(xiàn)異常，見圖1B；空腹血糖結(jié)果為5.77 mmol/L，其在正常參考范圍內(nèi)。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，該體檢者的HbA1c結(jié)果與其他相關(guān)檢驗結(jié)果不相符。

為查找原因后期做了以下相關(guān)檢測：(1)糖化清蛋白檢測結(jié)果為11.25%，其也在正常參考范圍內(nèi)。(2)另一種儀器檢測HbA1c結(jié)果仍然為0.0%(VARIANT-Ⅱ，美國伯樂，高效液相色譜法)。(3)參考方法檢測HbA1c的結(jié)果為4.3%[Waters Xevo TQS，美國沃特世，高效液相色譜串聯(lián)電噴霧電離一級質(zhì)譜法，(HPLC-ESI/MS)]。(4)血紅蛋白電泳，圖譜中大量異常血紅蛋白峰(120 s～180 s)，而無HbA峰，見圖1C。

注：A表示高效液相色譜法；B表示血液細胞分析結(jié)果；C表示血紅蛋白電泳圖譜

圖1檢驗結(jié)果

2 討 論

本科室檢測HbA1c的方法為日本東曹公司的HLC-723 G8儀器，采用高效液相色譜法，其原理是根據(jù)HbA1c所帶電荷與其他蛋白不同而將其分離，再根據(jù)峰值下面積來計算HbA1c占總HbA的比例。有資料顯示，當(dāng)標(biāo)本存在有異常血紅蛋白時，該方法存在不足，不能將異常血紅蛋白分辨出來，而影響HbA1或HbA0峰值下面積，導(dǎo)致HbA1c結(jié)果假性升高或假性降低[3-4]。由于該標(biāo)本存在異常血紅蛋白帶未見HbA峰，該離子交換高效液相色譜法無法檢測出HbA1c的值。為驗證是否因為不同儀器和試劑等因素導(dǎo)致的檢測結(jié)果假性降低，后續(xù)用美國伯樂公司的儀器進行驗證，仍然未檢測HbA1c的值，結(jié)果也顯示為0.0%。

目前國際公認的參考方法為IFCC推薦的高效液相色譜串聯(lián)電噴霧電離一級質(zhì)譜(HPLC-ESI/MS)或高效液相色譜串聯(lián)毛細管電泳[5]。原理是用HPLC-ESI/MS原理是對蛋白內(nèi)切酶GLU-C作用下得到的糖基化和非糖基化β鏈N末端六肽(HbA1c六肽、HbA0六肽)進行定量分析，在標(biāo)準曲線中根據(jù)HbA1c六肽、HbA0六肽的峰面積比計算得出HbA1c的量。后采用HPLC-ESI/MS參考方法檢測該標(biāo)本HbA1c的結(jié)果為4.3%，其反應(yīng)出該體檢者的真實糖化血紅蛋白水平。

HbA1c在糖尿病的診斷和治療監(jiān)測中的作用越來越受到臨床重視[6-7]。由于HbA1c是紅細胞中血紅蛋白與葡萄糖持續(xù)且不可逆地進行非酶促蛋白糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物，因此，任何引起血紅蛋白數(shù)量與質(zhì)量變化的因素都會對HbA1c的測定結(jié)果產(chǎn)生影響[8-9]。在實際工作中常常遇到各種因素引起的貧血和異常血紅蛋白導(dǎo)致HbA1c結(jié)果假性降低，但該體檢者的HbA1c為0.0%極為少見。遇到這樣的情況應(yīng)及時與體檢中心進行溝通，建議在未找到原因之前推遲發(fā)放報告，最好使用參考方法進行檢測，或者建議臨床醫(yī)生參考糖化清蛋白的檢測結(jié)果，因為其也能反映機體近期的平均血糖水平[10]。