李若飛　于春萍　蘭丁璇　付子杰

【摘? 要】目前肝病的發(fā)生率高并在逐年上升，肝病的病理機制和治療方案始終是國內(nèi)外研究熱點問題。研究肝病時選擇一種較為合適的肝病模型是極為重要的，本文對目前研究中常用的化學(xué)性急性肝損傷動物模型的發(fā)病機制、造模方法、模型特點以及檢測方法等進(jìn)行綜述，為急性肝損傷的研究提供便捷。

【關(guān)鍵詞】化學(xué)性肝損傷;動物模型

【中圖分類號】R285.5? ????【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A? ????【文章編號】1004-7484（2020）09-0232-02

1、四氯化碳（CCl₄）

近年來對CCl₄所致肝損傷的研究一致認(rèn)為，其發(fā)病機制主要是自由基代謝產(chǎn)物的形成以及其引發(fā)的鏈?zhǔn)竭^氧化反應(yīng)^[1]。CCl₄進(jìn)入體內(nèi)后，在細(xì)胞色素酶的催化下產(chǎn)生自由基，這些自由基與細(xì)胞膜上的磷脂等大分子物質(zhì)共價結(jié)合，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，進(jìn)而破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能。這些自由基還會使細(xì)胞膜和線粒體膜上鈣泵活性受到抑制，細(xì)胞內(nèi)外鈣失衡，從而造成肝損傷。給小鼠單次腹腔注射0.1%CCl₄溶液10 ml/kg，16小時后可誘導(dǎo)急性肝損傷發(fā)生^[2]。四氯化碳是目前最常用的肝損傷模型制備的化學(xué)性藥物，能有效造成肝細(xì)胞損害，成模率高，且在進(jìn)行多次實驗時模型能夠能夠很好地重現(xiàn)，但CCl₄毒性較大，揮發(fā)性很強，可經(jīng)皮膚、口鼻等多途徑傳播，危險性高。當(dāng)肝細(xì)胞受損時，血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）的含量將會大大升高，而發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)會使體內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）含量下降，丙二醛（MDA）水平升高。以上指標(biāo)在發(fā)生肝損傷時變化靈敏，可作為造模是否成功的依據(jù)，另，也可通過觀察肝組織病理形態(tài)學(xué)變化及一些分子生物學(xué)方法來判斷肝受損情況等。以下介紹的幾種化學(xué)性肝損傷模型的建立亦可用以上檢測方法。

2、D-氨基半乳糖（D-GaIN）

D-氨基半乳糖（D-GaIN）可損害肝細(xì)胞質(zhì)膜，形成細(xì)胞內(nèi)復(fù)合物，消耗尿苷三磷酸，使肝細(xì)胞出現(xiàn)炎癥壞死。D- GalN 也可使肝細(xì)胞內(nèi)鈣失衡，線粒體功能被抑制，加速產(chǎn)生氧自由基，使肝損傷加劇^[3]。目前造模方法多樣，有學(xué)者對小鼠一次性腹腔注射 500mg/kg GalN，處理24小時后造成急性肝損傷模型。脂多糖聯(lián)合D - 氨基半乳糖具有更強的肝毒性，肝細(xì)胞壞死后，肝臟對內(nèi)毒素的解毒能力降低，從而使肝損傷加重。有學(xué)者給SD大鼠腹腔注射20 μg/kg LPS 聯(lián)合400 mg/kg D - GalN ，12h后造模成功。D-GalN造模穩(wěn)定性好，肝毒性專性高，且對實驗人員無危害。但該模型具有不可逆性，并且D-GalN價格較為昂貴，限制了其應(yīng)用。

3、對乙酰氨基酚（AP）

AP又稱為撲熱息痛，是常用的解熱鎮(zhèn)痛藥，可當(dāng)其過量應(yīng)用時，體內(nèi)代謝產(chǎn)生的NAPQI不能被完全清除，NAPQI可與生物大分子共價結(jié)合，使一些具有巰基的蛋白質(zhì)被氧化和芳基化，從而使它們的生理功能下降或改變。 AP在代謝過程中同樣會在酶的催化作用下產(chǎn)生自由基，發(fā)生鈣失衡產(chǎn)生肝毒性。吳洋東等人給小鼠注射AP（200mg/kg）40h后造成急性肝損傷模型。過量AP可有效導(dǎo)致肝損傷，且不損害其他組織和器官，是造模常用的化學(xué)性藥物。

4、硫代乙酰胺（TAA）

TAA進(jìn)入體內(nèi)后，可在細(xì)胞色素酶的作用下被代謝氧化，由此產(chǎn)生的氧化物可進(jìn)一步代謝為一系列中間產(chǎn)物，結(jié)合肝臟大分子物質(zhì)，使肝細(xì)胞不能發(fā)揮正常功能，從而導(dǎo)致炎癥和壞死。有研究表明，一次性腹腔注射TAA（100mg/Kg），16小時后可造成急性肝損傷。TAA多用于急性肝損傷模型，該模型的重復(fù)性好，造模方法較為成熟，可行性高，肝功能指標(biāo)變化敏感顯著，較為常用。

5、α- 萘基異硫氰酸酯（ANIT）

ANIT可使肝細(xì)胞壞死，阻塞膽管，使膽汁淤積，膽紅素升高，導(dǎo)致動物急性黃疸型肝損傷。沈軼瑤等人在SD大鼠禁食18h后一次灌胃100mg/KgANIT造成急性肝損傷;黃正明等一次性給予大鼠腹腔注射15%ANIT（50 mL/kg）成模。ANIT可致動物急性黃疸型肝損傷，是研究退黃藥物的理想模型。

6、二甲基亞硝胺（DMN）

DMN具有肝毒性、基因毒性和免疫毒性，可使肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（ SECs ）、肝星狀細(xì)胞（ HSCs）、肝實質(zhì)細(xì)胞等受到不同程度的損害，出現(xiàn)肝內(nèi)皮損傷致出血性壞死，組織破裂。研究表明，一次性給予靜脈注射DMN（15μL/kg）后造成小鼠急性肝損傷。DMN肝毒性強，用藥后常會引起肝纖維化等更加嚴(yán)重的肝病發(fā)生，故少用于造成急性肝損傷模型。DMN是尋找和開發(fā)治療肝纖維化的藥物所用的理想模型，但其揮發(fā)性強，對實驗人員有一定的毒性危險性。

7、異煙肼（INH）

異煙肼（INH）導(dǎo)致急性肝損傷可能是因為其代謝產(chǎn)物與細(xì)胞內(nèi)的大分子物質(zhì)共價結(jié)合結(jié)合使肝細(xì)胞受損。大劑量應(yīng)用異煙肼時，其代謝后產(chǎn)生的肼不能被有效清除，從而誘導(dǎo)自由基產(chǎn)生以及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，造成肝損傷。有學(xué)者給予小鼠80mg/Kg異煙肼，18h后造模成功。異煙肼聯(lián)合利福平大劑量應(yīng)用同樣可以造成急性肝損傷。異煙肼是臨床上治療結(jié)核的一線用藥，大劑量服用可致肝損傷，是較為常用的急性肝損傷造模的方法之一。

討論

目前造成化學(xué)性肝損傷模型的研究已經(jīng)取得很大的進(jìn)展，對肝病研究也起到了巨大的推動作用，可我們還應(yīng)看到，許多造模方法尚有不足之處，且肝損傷病理機制還未完全闡明，選擇較為合適的造模方法，還需更深入地研究。

參考文獻(xiàn)

[1]徐曉輝，袁江玲，徐磊等.常用急性肝損傷5種動物模型的病理組織學(xué)特點比較[J].疾病預(yù)防控制通報.2018，33（1）：12-15，95.

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