王衛(wèi)鋼，黃麗杰，崔燕貞，岳 磊，劉娜娜，辛易霖

(1.周口市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 周口 466000；2.鄭州市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鄭州 450000)

獨(dú)活為傘形科植物重齒毛當(dāng)歸AngelicapubescensMaxim.f.biserrataShan et Yuan的干燥根[1]。性味辛、苦，微溫，歸腎、膀胱經(jīng)。具有祛風(fēng)，除濕，散寒，止痛之功效，是治療風(fēng)寒濕痹，腰膝酸痛，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，風(fēng)寒頭痛等癥的傳統(tǒng)用藥[2]。獨(dú)活的來源主要為栽培品，在重慶、湖北、陜西等地廣泛種植[3]。2015年版藥典中以蛇床子素和二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯作為獨(dú)活質(zhì)量控制的主要指標(biāo)[4]。蛇床子素具有抗腫瘤活性[5]?，F(xiàn)代研究表明二氫歐山芹醇具有抑制血小板聚集、抗脂質(zhì)過氧化等作用[6]。本實(shí)驗(yàn)擬比較不同飲片廠家的獨(dú)活飲片中蛇床子素和二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯兩種成分的含量，為評(píng)價(jià)和合理應(yīng)用獨(dú)活飲片提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，DVD檢測器(美國安捷倫科技有限公司)；XS205電子分析天平(METTLER)；RT-01型粉碎機(jī)(浙江溫嶺市大海藥材器械廠)；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 試劑與試藥

乙腈、甲醇(Merck公司，色譜純)；哇哈哈純凈水。阿莫西林對(duì)照品(批號(hào)：130409-201512，含量以86.9%計(jì)，中國食品藥品檢定研究院)；蛇床子素對(duì)照品(批號(hào)：110822-201710，含量以99.5%計(jì)，中國食品藥品檢定研究院)、二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯對(duì)照品(批號(hào)：111583-201605，含量以98.6%計(jì)，中國食品藥品檢定研究院)；獨(dú)活飲片見表1。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl Analytical(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(49∶51)；檢測波長為330 nm。

2.2 供試品溶液的制備[1]

取各批次的獨(dú)活飲片適量，粉碎并過三號(hào)篩，取約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入20 mL甲醇，密塞，再次稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，并用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液3 mL，置20 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取蛇床子素對(duì)照品15 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。精密稱取二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯對(duì)照品10 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置20 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別精密吸取兩種對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。色譜及結(jié)果如圖1-圖4及表1所示。

圖1 蛇床子素對(duì)照品色譜

圖2 二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯對(duì)照品色譜

圖3 編號(hào)01樣品色譜

圖4 10批樣品總色譜

表1 飲片來源及含量測定結(jié)果

4 討論

現(xiàn)商品獨(dú)活種類比較混亂，其原植物有15種以上[7]。獨(dú)活在我國分布較廣，藥材因產(chǎn)地分布、性狀差異而形成不同的商品獨(dú)活，其藥材質(zhì)量差異較大[8]。且可能由于種植技術(shù)、采收時(shí)間以及初加工方法等因素的差異[9]，致使不同批次獨(dú)活飲片中化學(xué)成分在含量上存在差異。獨(dú)活中主要含有香豆素類、揮發(fā)油類，以及少量甾醇和糖類等成分[10]。獨(dú)活中香豆素類化合物達(dá)十余種[11]，主要有蛇床子素、二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯、歐前胡素、異歐前胡素等。且香豆素類成分是評(píng)價(jià)獨(dú)活質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。

2015年版藥典收載獨(dú)活含量測定項(xiàng)下有蛇床子素和二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯兩個(gè)指標(biāo)成分，由本實(shí)驗(yàn)可知，兩個(gè)化合物含量均較高，且本實(shí)驗(yàn)中10批次飲片中所測得的兩種化合物含量均高于藥典規(guī)定的限度，編號(hào)07和09中的飲片中二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯含量較高，編號(hào)02和03中的則較低，但均高于藥典規(guī)定限度。編號(hào)02和03中的蛇床子素含量較高，編號(hào)07中的則相對(duì)較低，但均高于藥典規(guī)定限度。結(jié)果表明，不同廠家獨(dú)活飲片中蛇床子素和二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯含量均符合藥典藥用標(biāo)準(zhǔn)，且兩種成分含量存在差異，含量的高低與廠家無關(guān)，蛇床子素和二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯兩種成分之間的含量高低無相關(guān)性。中藥材由于產(chǎn)地分布、溫濕度等條件的影響而在質(zhì)量上存在差異，規(guī)范化種植，建立獨(dú)活GAP種植基地，確定統(tǒng)一的種植和采收時(shí)間、加工方法，使獨(dú)活飲片的生產(chǎn)更加標(biāo)準(zhǔn)化，更能為獨(dú)活飲片的科學(xué)、合理、安全使用提供保障。