費(fèi) 鵬 秘 雪 姜毓君 - 劉悅欣 e-李建軍 - 周蓮昕 - 郭 鸰
(1. 河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,河南 洛陽(yáng) 471023;2. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,黑龍江 哈爾濱 150030)
扣碗酪是由新鮮牛奶與米酒制成,江米酒在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酸性蛋白酶,從而使得牛奶中蛋白質(zhì)凝固,產(chǎn)品色澤潔白,從外觀上看類似于凝固型酸奶,但其奶香醇厚更兼具酒香,風(fēng)味獨(dú)特,因能凝結(jié)于碗上,倒扣而不倒,故名“扣碗酪”[1-3]??弁肜抑械娜樘敲赣写龠M(jìn)乳糖分解的功能,能防止乳糖不耐癥,同時(shí)能助消化、防便秘與腹瀉,降低膽固醇,預(yù)防老年人心血管疾病[4]。此外,作為凝乳劑的江米酒不僅能賦予扣碗酪獨(dú)特風(fēng)味,同時(shí)富含多肽、氨基酸、有機(jī)酸等多種對(duì)人體有益的營(yíng)養(yǎng)成分,因此深受消費(fèi)者喜愛(ài)[5]。
凝乳是扣碗酪生產(chǎn)的關(guān)鍵工藝,傳統(tǒng)的凝乳方法易出現(xiàn)嚴(yán)重的乳清析出現(xiàn)象,而且發(fā)酵時(shí)間較長(zhǎng)、在運(yùn)輸過(guò)程中易被破壞,僅適合當(dāng)?shù)刈鞣皇绞止どa(chǎn),無(wú)法大批量生產(chǎn)[6]。滕國(guó)新等[7-8]發(fā)現(xiàn)在高乙醇含量條件下,根霉凝乳酶的凝乳時(shí)間大大縮短,而選擇低溫長(zhǎng)時(shí)的熱處理方式和較低的均質(zhì)壓力參數(shù)有利于扣碗酪質(zhì)構(gòu)的形成;蔡曉林[9]發(fā)現(xiàn)添加脫脂乳可以提高扣碗酪的質(zhì)構(gòu)特性,而相比于原料乳的高溫長(zhǎng)時(shí)的熱處理方式,巴氏殺菌和高溫瞬時(shí)的熱處理方式更有利于扣碗酪良好質(zhì)構(gòu)的形成。此外,還有研究[10-11]表明在扣碗酪的凝乳過(guò)程中,選擇70 ℃作為江米酒的凝乳溫度,可縮短凝乳時(shí)間,并使得扣碗酪的質(zhì)地更加緊密,但該條件下扣碗酪中的大量有益活菌被殺滅,不利于其益生功能的發(fā)揮。因此,扣碗酪凝乳時(shí)間過(guò)長(zhǎng),質(zhì)地稀松仍需亟待解決。
副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)通常被作為發(fā)酵劑或輔助發(fā)酵劑,由于其具有較好的產(chǎn)酸和產(chǎn)黏能力,常用于促進(jìn)產(chǎn)品的凝乳和質(zhì)構(gòu)的形成[12-14]。此外,副干酪乳桿菌對(duì)食品中的腐敗菌有較好的抑制作用,可以在不影響食品性狀的前提下,延長(zhǎng)產(chǎn)品的儲(chǔ)存時(shí)間[15]。然而,副干酪乳桿菌具有一定的產(chǎn)酸和產(chǎn)芳香物質(zhì)的能力,可能會(huì)對(duì)扣碗酪的品質(zhì)產(chǎn)生一定的影響。
課題組前期研究發(fā)現(xiàn)利用分離自牦牛奶傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品的副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610加工扣碗酪可以將凝乳時(shí)間從5 h減少到3 h。試驗(yàn)擬繼續(xù)以副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610為研究對(duì)象,分析其對(duì)扣碗酪產(chǎn)品及貯藏期間感官品質(zhì)、pH、滴定酸度、質(zhì)構(gòu)特性和活菌數(shù)的影響,為扣碗酪產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。
1.1.1 試驗(yàn)菌種
副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacase)KLDS.LP T1610:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
復(fù)合型菌粉(保加利亞桿菌∶嗜熱鏈球菌=1∶1)、甜酒曲:安琪酵母股份有限公司。
1.1.2 原料與試劑
江米、鮮牛乳:市售;
氯化鈉、乙醇、無(wú)水乙酸鈉:分析純,天津市天力化學(xué)試劑有限公司;
氫氧化鈉:96%,天津市福晨化學(xué)試劑廠;
乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基(MRS):北京奧博星生物技術(shù)有限公司;
鄰苯二甲酸氫鉀:99.8%,上海紫銘試劑廠。
高壓蒸汽滅菌器:BKQP-75L型,濟(jì)南來(lái)寶醫(yī)療器械有限公司;
遠(yuǎn)紅外線恒溫干燥箱:YH-1BS型,天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)電爐有限公司;
生化培養(yǎng)箱:SPX-70BX型,天津市泰斯特儀器有限公司;
pH計(jì):MP511型,上海精密儀器儀表有限公司;
超凈工作臺(tái):BCN-1360型,北京市東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司;
電子天平:PB-S型,梅特勒—托利多儀器(上海)有限公司;
質(zhì)構(gòu)儀:TA.XT2i型,英國(guó)Stable Micro Systems公司。
1.3.1 江米酒的制備 根據(jù)蔡曉琳[9]的方法制備江米酒,在4 ℃條件下儲(chǔ)藏備用。
1.3.2 乳酸菌菌種活化
(1) 副干酪乳桿菌的活化:將0.5 mL副干酪乳桿菌KLDS.LP T161菌液接種到10 mL MRS液體培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)24 h。將得到的菌液進(jìn)行梯度稀釋,取0.1 mL菌液在MRS固體培養(yǎng)基中涂布,置于37 ℃培養(yǎng)24 h。挑取平板中單菌落進(jìn)行鏡檢,證明不含雜菌后,再挑取單菌落接種到10 mL MRS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)12 h。將活化菌種按10%(體積分?jǐn)?shù))加入至50 mL新鮮牛乳中,42 ℃ 培養(yǎng)12 h后,于4 ℃儲(chǔ)藏備用。
(2) 普通發(fā)酵劑的活化:將0.05 g菌粉加入至50 mL新鮮牛乳中,攪拌30 s以上,混合均勻后,42 ℃培養(yǎng)12 h,于4 ℃儲(chǔ)藏備用。
1.3.3 扣碗酪的制作 制作3組扣碗酪,分別記為A、B、C,A組為空白對(duì)照,只加入江米酒;B組添加直投式發(fā)酵劑(保加利亞乳桿菌∶嗜熱鏈球菌=1∶1);C組添加副干酪乳酸桿菌KLDS.LP T1610。調(diào)整B、C兩組中乳酸菌濃度為107CFU/mL。江米酒的加入比例均為原料乳體積的18%,攪拌均勻后于42 ℃恒溫箱中發(fā)酵,分別發(fā)酵5,3,1 h。將發(fā)酵好的扣碗酪置于4 ℃冰箱中后熟并保存。
1.3.4 感官評(píng)定 由感官評(píng)價(jià)小組,按組織狀態(tài)、風(fēng)味、口感、氣味、色澤的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分,取平均值作為感官評(píng)價(jià)的結(jié)果,具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。
1.3.5 pH的測(cè)定 在扣碗酪貯藏第1、3、5天進(jìn)行測(cè)定,將樣品充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?,用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。
1.3.6 滴定酸度的測(cè)定 參照GB 5009.239—2016,在扣碗酪貯藏第1、3、5天進(jìn)行酸度測(cè)定。按式(1)計(jì)算樣品的滴定酸度。
(1)
式中:
TA——樣品的滴定酸度,°T;
C——標(biāo)定后氫氧化鈉濃度,moL/L;
V——消耗標(biāo)定氫氧化鈉體積,mL。
表1 扣碗酪感官評(píng)分表
1.3.7 質(zhì)構(gòu)分析 根據(jù)屠康等[16]的方法修改如下:對(duì)扣碗酪貯藏第1、3、5天的質(zhì)構(gòu)進(jìn)行測(cè)定。質(zhì)構(gòu)分析中參數(shù)設(shè)定為測(cè)前、測(cè)中、測(cè)后速度分別為2.0,1.0,5.0 mm/s,感應(yīng)力3.0 N,下壓距離10 mm,兩次下壓間隔時(shí)間5.0 s,探頭型號(hào)A/BE35。
1.3.8 乳酸菌的計(jì)數(shù) 參照GB 4789.35—2016,對(duì)貯藏第1、3、5天的扣碗酪樣品中的乳酸菌數(shù)目進(jìn)行平板計(jì)數(shù)。
每組樣品測(cè)3個(gè)平行樣,用Excel數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、制圖,并用SPSS軟件進(jìn)行差異性分析,顯著水平為P<0.05,最終結(jié)果用(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示。
由表2可知,相比A、B兩組,C組扣碗酪在組織狀態(tài)、風(fēng)味、口感和氣味方面都有顯著提高(P<0.05),且總分最高。這可能是副干酪乳桿菌不僅能夠產(chǎn)生乙醛、丁二酮、乙偶姻、揮發(fā)性酸等風(fēng)味性物質(zhì),且其產(chǎn)黏能力有助于改善扣碗酪的組織狀態(tài)和黏稠度[17]。說(shuō)明副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪感官品質(zhì)的影響為正向。
表2 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪感官品質(zhì)的影響?
? 字母不同表示差異顯著(P<0.05)。
由表3可知,在貯藏第1天,C組扣碗酪的pH顯著低于A、B兩組(P<0.05);第3、5天,C組的pH顯著低于A組(P<0.05),與B組差異不顯著(P>0.05);在整個(gè)貯藏過(guò)程中,空白對(duì)照組的pH始終低于酪蛋白的等電點(diǎn)4.6,說(shuō)明江米酒凝乳機(jī)理是酶凝,而非酸凝[1]。而相比于A組,C組的扣碗酪能快速凝乳,與副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610的產(chǎn)酸能力有關(guān)。
表3 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪pH的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
由表4可知,3組扣碗酪滴定酸度存在顯著性差異(P<0.05),從低到高分別為A
表4 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪滴定酸度的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
2.4.1 硬度 由表5可知,3組扣碗酪硬度指標(biāo)差異顯著(P<0.05)。第1天是產(chǎn)品運(yùn)輸售賣的黃金時(shí)間,產(chǎn)品一經(jīng)破壞,難以二次凝固,與A組扣碗酪相比,B、C兩組扣碗酪的硬度顯著提高(P<0.05)。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),A組扣碗酪的硬度顯著增加(P<0.05),B、C兩組扣碗酪的硬度未出現(xiàn)明顯改變(P>0.05),狀態(tài)穩(wěn)定,而根據(jù)感官評(píng)價(jià)中對(duì)組織狀態(tài)的評(píng)分,添加副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610的扣碗酪的硬度更適合消費(fèi)者。
表5 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪硬度的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
2.4.2 彈性 由表6可知,3組扣碗酪彈性值在貯藏第1天時(shí)差異顯著(P<0.05),且A組扣碗酪彈性值最高;在貯藏第3、5天,3組扣碗酪彈性值差異不顯著(P>0.05);B、C兩組扣碗酪隨貯藏時(shí)間的增加,彈性變化不顯著(P>0.05),說(shuō)明副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪彈性的影響不顯著(P>0.05)。
表6 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪彈性的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
2.4.3 黏性 由表7可知,貯藏第1天,3組扣碗酪的黏性值差異顯著(P<0.05),且B組扣碗酪黏性最高;隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),C組扣碗酪的黏性有所增加,但相比貯藏初期,黏性增加的趨勢(shì)顯著低于A、B兩組(P<0.05),表明在貯藏期間,副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610更有利于維持扣碗酪的黏性。
表7 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪黏性的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
2.4.4 咀嚼性 由表8可知,3組扣碗酪的咀嚼性在貯藏期間不存在顯著性變化(P>0.05),說(shuō)明副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610的加入對(duì)扣碗酪的咀嚼性無(wú)顯著影響。
表8 副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)扣碗酪咀嚼性的影響?
? 大寫(xiě)字母不同表示同行差異顯著(P<0.05);小寫(xiě)字母不同表示同列差異顯著(P<0.05)。
由圖1可知,貯藏期間,C組扣碗酪中乳酸菌的活菌數(shù)顯著高于A組(P<0.05),且第5天時(shí),顯著高于B組,說(shuō)明與普通發(fā)酵劑相比,副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)酸的耐受性更強(qiáng)。
試驗(yàn)以分離自牦牛奶傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品的副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610為輔助發(fā)酵劑,分析了其對(duì)扣碗酪品質(zhì)的影響。研究表明,與傳統(tǒng)扣碗酪和添加普通發(fā)酵劑(保加利亞乳桿菌∶嗜熱鏈球菌=1∶1)的扣碗酪相比,添加副干酪乳桿菌的感官品質(zhì)顯著提高(P<0.05)。在5 d的貯藏期間,副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610顯著提高了扣碗酪的酸度和乳酸菌活菌總數(shù),并改善了扣碗酪的質(zhì)構(gòu)特性,在短時(shí)間凝乳的情況下,得到了風(fēng)味良好、質(zhì)地緊密、貯藏期品質(zhì)穩(wěn)定的扣碗酪產(chǎn)品。后續(xù)將繼續(xù)探索副干酪乳桿菌KLDS.LP T1610對(duì)人體的益生作用,并進(jìn)行風(fēng)味扣碗酪的研制,進(jìn)一步擴(kuò)展扣碗酪的產(chǎn)品種類。
字母不同表示差異顯著(P<0.05)
Figure 1 Effects ofL.paracaseKLDS.LP T1610 on the amount of lactic acid bacteria of Kouwan Lao