韓憲忠 沈正澤 袁文霄 黃英如 丁家昱

摘 要 目的：比較黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠的保護作用差異，為黃芪資源的進一步開發(fā)利用提供參考。方法：取240只ICR小鼠平行分為4批，每批60只，雌雄各半。各批小鼠均按體質(zhì)量及性別隨機分為空白組、模型組和黃芪地上、地下部分低、高劑量組（均為3、6 g/kg，以生藥量計），每組10 只?？瞻捉M和模型組小鼠均灌胃生理鹽水，黃芪組小鼠灌胃相應濃度的藥物，灌胃體積均10 mL/kg，每日1次，連續(xù)給藥30 d。除空白組外，其余各組小鼠均自給藥第24天起腹腔注射環(huán)磷酰胺40 mg/（kg·d），連續(xù)注射3 d，建立免疫低下模型。檢測各組小鼠的血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）、炎癥因子[一氧化氮、白細胞介素2（IL-2）、IL-6、腫瘤壞死因子α]和半數(shù)溶血值，測定小鼠體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、吞噬指數(shù)、自然殺傷（NK）細胞活性、脾淋巴細胞增殖能力、二硝基氟苯誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應（以左右兩耳的質(zhì)量差反映）和溶血空斑數(shù)。結果：與空白組比較，模型組小鼠血清中免疫球蛋白水平、體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、吞噬指數(shù)、NK細胞活性、脾淋巴細胞增殖能力、溶血空斑數(shù)、半數(shù)溶血值均顯著降低（P<0.05），炎癥因子水平、左右耳片質(zhì)量差顯著升高（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠的上述指標均顯著改善，且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組的上述指標的改善更為明顯（P<0.05）。結論：黃芪地上、低下部分對免疫低下模型小鼠均具有一定的保護作用，且地上部分的作用優(yōu)于地下部分。

關鍵詞 黃芪;地上部分;地下部分;免疫力;藥效學

ABSTRACT ? OBJECTIVE： To compare the protective effects model mice between the aboveground and underground parts of Astragalus membranaceus on immunosuppression， and to provide reference for further utilization and development of A. membranaceus. METHODS： A total of 240 ICR mice were divided into 4 batches， 60 mice in each batch， with half male and half female. Each batch of mice were randomly divided into blank group， model group， A. membranaceus aboveground part and undergroud part low-dose and high-dose groups （3， 6 g/kg， by crude drug） according to body weight and sex， with 10 mice in each group. Blank group and model group were given normal saline intragastrically. A. Membranaceus groups were given corresponding concentration of drug intragastrically， 10 mL/kg， once a day， for consecutive 30 days. Except for blank group， other groups were intraperitoneally injected with cyclophosphamide 40 mg/（kg·d） for consecutive 3 days， since 24th day of treatment， to establish immunosuppression model. The levels of serum immunoglobulin （IgG， IgM， IgA）， inflammation factors [nitric oxide， interleukin-2 （IL-2）， IL-6， tumor necrosis factor-α] and half hemolysis value were detected in each group. Body weight， thymus index， spleen index， phagocytic index， activity of natural killer （NK）cell， splenic lymphocyte proliferation ability， dinitrofluorobenzene-induced delayed metamorphosis reaction in mice （by weight difference between left and right ears） and the number of hemolytic plaque were determined. RESULTS： Compared with blank group， the serum levels of immunoglobulin， body weight， thymus index， spleen index， phagocytic index， NK cell activity， the proliferation ability of splenic lymphocyte， the number of hemdytic plaque and half hemolysis value were decreased significantly in model group （P<0.05）， while inflammation factor level as well as weight difference between left and right ears were increased significantly （P<0.05）. Compared with model group， above indexes of mice in A. membranaceus groups were improved significantly， in dose-dependent manner （P<0.05）. Compared with A. membranaceus undergroud part group， above indexes of A. membranaceus aboveground part group were improved significantly （P<0.05）. CONCLUSIONS： Aboveground and underground part of A. membranaceus both have pretective effect on immunosuppression model mice， and the effect of aboveground part of A. membranaceus is stronger than underground part of A. membranaceus.

KEYWORDS ? Astragalus membranaceus; Aboveground part; Underground part; Immunity; Pharmacodynamics

黃芪是豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge. var. Mongholicus（Bge.）Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，富含多糖類、皂苷類、生物堿類和黃酮類等多種化合物[1]，具有補氣升陽、固表止汗和利水消腫等功效[2-3]?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃芪具有明顯的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化等藥理活性，臨床應用廣泛，需求量較大[4]。相關研究顯示，黃芪地上部分與地下部分的營養(yǎng)成分相似，均含有多糖類、皂苷類、生物堿類和黃酮類化合物[5]，并且地上部分中黃酮類、皂苷類和多糖類成分的含量均高于地下部分[6-8]，這提示黃芪地上部分也可能具有與地下部分相似的藥理活性，具有一定的開發(fā)利用價值。鑒于此，本研究以黃芪為考察對象，比較其地上、地下部分增強免疫力的藥效學差異，以期為黃芪藥用植物的全面開發(fā)利用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

AU5800全自動生化儀（美國Beckman公司）;BB150型CO2培養(yǎng)箱（美國Thermo Fisher Scientific公司）;Infinite M200PRO型全自動酶標儀（瑞士Tecan公司）;BSA224S型萬分之一分析天平（德國Sartorius公司）;Stemi 508型倒置顯微鏡（德國Zeiss公司）;BPZ-LC型真空干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

1年生黃芪于2018年5月采摘自陜西秦嶺山區(qū)，經(jīng)重慶醫(yī)科大學中醫(yī)藥學院王剛教授鑒定為豆科植物蒙古黃芪A. membranaceus（Fisch.）Bge. var. Mongholicus（Bge.）Hsiao的干燥全草，地上部分（株高80 cm，羽狀復葉、葉片長8 cm，無花）和地下部分各2 kg。注射用環(huán)磷酰胺（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號：18061214，規(guī)格：0.2 g/瓶）;胎牛血清（澳洲Cellmax公司）;DMEM培養(yǎng)基、刀豆蛋白試劑、Hanks液、RPMI 1640培養(yǎng)基、青霉素-鏈霉素雙抗、姬姆薩染液（北京普博欣生物科技有限責任公司）;一氧化氮（NO）、白細胞介素2（IL-2）、IL-6、腫瘤壞死因子α（TNF-α）和血清免疫球蛋白G（IgG）、IgM、IgA酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20180102、20180402、20180502、20180503、20180310、20180305、20180301）;RIPA裂解液（上海雅酶生物科技有限公司）;SA緩沖液（上海聯(lián)碩生物科技有限公司）;2%綿羊紅細胞懸液（北京博爾西科技有限公司，批號：180601）;瓊脂培養(yǎng)基（北京伊塔生物科技有限公司，批號：180403）;L（+）-乳酸（百奧萊博科技有限公司，批號：18001）;豚鼠血清（北京伊塔生物科技有限公司，批號：20180401）;都氏試劑（焦作路非凡生物科技有限公司，批號：18024）;其余試劑均為分析純，水為自制蒸餾水。

1.3 動物

SPF級ICR小鼠240只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，購自重慶醫(yī)科大學實驗動物中心，實驗動物使用許可證號：SYXK（渝）2018-0003，適應性飼養(yǎng)7 d后進行實驗。飼養(yǎng)環(huán)境溫度為20～22 ℃、相對濕度為30%～70%、明（12 h）/暗（12 h）周期交替。本實驗設計遵循3R原則。

1.4 細胞

小鼠淋巴瘤細胞YAC-1由中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所提供。

2 方法

2.1 藥液的制備

將黃芪地上、地下部分分別經(jīng)40 ℃真空干燥至恒定質(zhì)量，然后分別加5倍量（mL/g）水進行煎煮，每次煎煮1 h，共3次。分別合并兩者的3次水煎液并濃縮為10 g/mL（以生藥量計）的藥液，備用。

2.2 分組、造模與給藥

將240只小鼠分為4批，每批60只，雌雄各半。將4批小鼠分別按照性別和體質(zhì)量隨機分為6組：空白組、模型組和黃芪地上、地下部分的低、高劑量組[劑量均為3、6 g/kg（均以生藥量計）;黃芪的臨床建議用量為9～30 g[3]，相當于小鼠的日用量1.8～6 g/kg（以生藥量計），筆者結合上述臨床用量換算結果和前期預實驗結果將黃芪給藥組的低、高劑量分別設置為3、6 g/kg]，每組10只?？瞻捉M和模型組小鼠灌胃生理鹽水，給藥組小鼠分別灌胃相應濃度的藥物，灌胃體積均10 mL/kg;每日1次，連續(xù)給藥30 d。除空白組外，其余各組小鼠均自給藥第24 天起腹腔注射環(huán)磷酰胺40 mg/（kg·d），每天1次，連續(xù)注射3 d，建立免疫低下模型[9]。若小鼠存在嚴重脫毛、食欲下降、精神不振、脾臟萎縮、肝臟發(fā)白、胸腺受損等情況，表明免疫低下模型建立成功[9]。

2.3 小鼠血清中Ig、炎癥因子和溶血素水平檢測

末次給藥后1 h，取第1批小鼠，自右眼內(nèi)眥靜脈取血約1.0 mL，轉(zhuǎn)移至EP離心管中，以5 000 r/min離心5 min，收集血清，備用。按照相應試劑盒說明書操作，分別檢測血清中Ig（IgM、IgG、IgA）和炎癥因子（NO、IL-2、IL-6、TNF-α）的水平。另取血清0.1 mL，以生理鹽水稀釋200倍，然后取稀釋后的血清1.0 mL、4%綿羊紅細胞懸液0.5 mL、10%豚鼠血清1.0 mL，置于同一試管中，并以等體積生理鹽水替代血清作為對照，分別于37 ℃水浴0.5 h，取出后冰浴終止反應。取上清液1.0 mL，加都氏試劑3 mL，采用分光光度法測定各管在540 nm波長處的光密度（OD）值。另取4%綿羊紅細胞懸液0.25 mL、都氏液3.75 mL于同一試管中，測定綿羊紅細胞懸液的半數(shù)溶血值，然后按公式計算樣品的半數(shù)溶血值（半數(shù)溶血值=血清樣品的OD值×200/羊紅細胞懸液半數(shù)溶血時的OD值）[10]，以半數(shù)溶血值來反映血清溶血素水平。

2.4 小鼠免疫器官臟器指數(shù)和吞噬指數(shù)檢測

取“2.3”項下取血后的小鼠，稱定其體質(zhì)量，并在末次給藥后12 h（期間禁食不禁水），經(jīng)小鼠左眼內(nèi)眥靜脈注入稀釋4倍的印度墨汁（0.1 mL/10 g），立即計時。在注入墨汁后的第2、10 min時，分別從小鼠右眼內(nèi)眥取血約1.0 mL，以5 000 r/min離心5 min，收集血清。取血清20 μL，加入0.1%碳酸鈉溶液2 mL，作為待測樣品溶液。以0.1%碳酸鈉溶液為空白對照進行調(diào)零，采用全自動生化儀檢測各樣品在600 nm波長處的OD值。隨后將小鼠安樂處死，于無菌條件下取出其肝、脾和胸腺組織，稱定質(zhì)量，計算其免疫器官（胸腺、脾）臟器指數(shù)、吞噬指數(shù)：臟器（胸腺、脾）指數(shù)=臟器（胸腺、脾）質(zhì)量（g）/體質(zhì)量（g）×100%;吞噬指數(shù)=[0.125×（lgOD2 min-lgOD10 min）]/3×體質(zhì)量×（肝質(zhì)量+脾質(zhì)量）[11]。

2.5 小鼠脾組織中自然殺傷（NK）細胞活性檢測

靶細胞制備：取YAC-1細胞在37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，然后以1 000 r/min離心5 min，收集細胞沉淀，采用RPMI 1640培養(yǎng)基將其重懸，并調(diào)整細胞密度為5×105個/mL。效應細胞制備：取第2批小鼠，在末次給藥后12 h（期間禁食不禁水），將其安樂處死，于無菌條件下取出其脾組織，用眼科剪將脾組織剪碎，然后以1 000 r/min離心5 min，收集組織沉淀;采用RIPA裂解液將組織裂解，并以Hanks液將其制成細胞密度為2×107個/mL的脾細胞懸液，在37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);取生長良好的脾細胞（傳代4～6代），用新鮮配制的DMEM培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度為4×105個/mL，作為效應細胞。效應細胞-靶細胞相互作用：取靶細胞和效應細胞懸液各100 μL，加至96孔培養(yǎng)板中，將細胞分為靶細胞自然釋放組（含靶細胞懸液100 μL和效應細胞懸液100 μL）和靶細胞自然釋放組（含靶細胞懸液100 μL、效應細胞懸液100 μL和1%的乙基苯基聚乙二醇），并設置無靶細胞懸液和效應細胞懸液（只含1%乙基苯基聚乙二醇）的對照組，每組均設3個復孔。將所有組別培養(yǎng)液均置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h后，取出，然后以1 500 r/min離心10 min，每孔吸取上清液100 μL，置于96孔板中，加乳酸基質(zhì)液100 μL，室溫孵育10 min后，每孔加入1 mol/L鹽酸溶液30 μL，混勻。采用酶標儀測定各孔在490 nm波長處的OD值，計算NK細胞活性：NK細胞活性=（對照組OD值-靶細胞自然釋放組OD值）/（靶細胞自然釋放孔OD值-靶細胞自然釋放孔OD值）×100%。

2.6 小鼠脾淋巴細胞增殖能力檢測

取“2.5”項下細胞密度為 2×107個/mL的小鼠脾細胞懸液，以1 000 r/min離心15 min，收集沉淀，采用RPMI 1640培養(yǎng)基將細胞重懸并調(diào)整密度為3×106個/mL。將重懸的細胞懸液加至24孔培養(yǎng)板中（1 mL/孔），每組均設置兩孔：其中一孔加入刀豆蛋白試液75 μL，作為刀豆蛋白誘導孔;另一孔加入含青霉素-鏈霉素雙抗（100 U/mL）和10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基75 μL，作為對照孔。將細胞置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 d。吸棄上清液，加入不含血清和青霉素-鏈霉素雙抗的RPMI 1640培養(yǎng)基0.7 mL和5 mg/mL四氮唑鹽試液50 μL，繼續(xù)在37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h。取出后，采用酶標儀測定各孔在570 nm波長處的OD值，計算各組細胞刀豆蛋白誘導孔OD值與對照孔OD值的差值，差值越大表示小鼠脾淋巴細胞的增殖能力越強[12]。

2.7 二硝基氟苯誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應檢測

取第3批小鼠，在第22 天給藥后1 h，脫去小鼠腹部的毛（面積為3 cm×3 cm），用1%二硝基氟苯溶液均勻涂抹于脫毛部位使其致敏;7 d后，將1%二硝基氟苯溶液均勻涂抹于小鼠右耳（兩面）進行攻擊;24 h后，將小鼠安樂處死，剪下其左、右兩耳，用打孔器在兩耳相同位置處打孔取直徑為8 mm耳片，稱定質(zhì)量，并計算左、右兩耳的質(zhì)量差異，兩耳質(zhì)量差異越大提示小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應越明顯[13]。

2.8 小鼠脾細胞抗體生成細胞數(shù)檢測

取第4批小鼠，在第23天給藥后1 h，腹腔注射2%綿羊紅細胞懸液0.2 mL進行免疫;7 d后，自右眼內(nèi)眥靜脈采用約1.0 mL，轉(zhuǎn)移至EP離心管中，以5 000 r/min離心5 min，分離血清。然后將小鼠安樂處死，無菌取出其脾組織，用眼科剪將脾組織剪碎，以1 000 r/min離心5 min，棄上清液，采用RIPA裂解液將組織裂解，并以Hanks液將其制成細胞密度為 2×107個/mL的脾細胞懸液。以Jerne改良玻片法檢測各組脾細胞抗體生成細胞數(shù)：將1%瓊脂培養(yǎng)基加熱溶解，37 ℃水浴保溫，然后加入 Hank s液1.0 mL混合，分裝至小試管，每管0.5 mL;每管中加入10%綿羊紅細胞50 μL、脾細胞懸液25 μL，混勻，傾倒于已薄刷瓊脂培養(yǎng)基的玻片上，待瓊脂凝固后，在37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1.5 h，加入SA緩沖液稀釋的補體[即1 ∶ 30（V/V）稀釋的新鮮豚鼠血清，臨用臨配]至玻片架凹槽內(nèi)孵育1.5 h，將玻片對著光亮處，用放大鏡觀察每個溶血空斑的溶血狀況，并記錄玻片中的空斑數(shù)，計算每百萬個脾細胞內(nèi)含空斑形成細胞的平均數(shù)，即以溶血空斑數(shù)/106個脾細胞數(shù)表示抗體生成細胞數(shù)[14]。

2.9 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料若符合正態(tài)分布則以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠血清中IgG、IgM、IgA水平的影響

與空白組比較，模型組小鼠血清中IgG、IgM、IgA水平均顯著降低（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠血清中IgG、IgM、IgA水平均顯著升高，且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組小鼠血清中IgG、IgM、IgA水平均顯著升高（P<0.05）。各組小鼠血清中IgG、IgM、IgA水平的檢測結果見表1。

3.2 黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠血清中NO、IL-2、IL-6、TNF-α水平的影響

與空白組比較，模型組小鼠血清中NO、IL-2、IL-6、TNF-α水平均顯著升高（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠血清中NO、IL-2、IL-6、TNF-α水平均顯著降低，且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組小鼠血清中NO、IL-2、IL-6、TNF-α水平均顯著降低（P<0.05）。各組小鼠血清中NO、IL-2、IL-6、TNF-α水平的檢測結果見表2。

3.3 黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠體質(zhì)量、免疫器官臟器指數(shù)的影響

免疫低下模型小鼠存在嚴重脫毛、食欲下降及精神不振等癥狀，所有組別小鼠初始體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與空白組比較，模型組小鼠體質(zhì)量和胸腺指數(shù)、脾指數(shù)均顯著降低（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)均顯著升高，且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組小鼠體質(zhì)量和胸腺指數(shù)、脾指數(shù)均顯著升高（P<0.05）。各組小鼠體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的檢測結果見表3。

3.4 黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠吞噬指數(shù)和NK細胞活性的影響

與空白組比較，模型組小鼠吞噬指數(shù)、NK細胞活性顯著降低（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠的吞噬指數(shù)、NK細胞活性均顯著升高，且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組小鼠的吞噬指數(shù)、NK細胞活性均顯著升高（P<0.05）。各組小鼠吞噬指數(shù)和NK細胞活性的檢測結果見表4。

3.5 黃芪地上、地下部分對免疫低下模型小鼠脾淋巴細胞增殖、左右耳片質(zhì)量差、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值的影響

與空白組比較，模型組小鼠的脾淋巴細胞增殖能力、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值均顯著降低（P<0.05），左右耳片質(zhì)量差均顯著升高（P<0.05）;與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠的脾淋巴細胞增殖能力、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值均顯著升高（P<0.05），左右耳片質(zhì)量差均顯著降低（P<0.05），且均具有一定的劑量依賴性（P<0.05）;與黃芪地下部分組比較，黃芪地上部分同劑量組小鼠的脾淋巴細胞增殖能力、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值均顯著升高（P<0.05），左右耳片質(zhì)量差均顯著降低（P<0.05）。各組小鼠淋巴細胞增殖能力、左右耳片質(zhì)量差、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值檢測結果見表5。

4 討論

IgG、IgM、IgA是臨床常用于評估人體免疫功能的指標。其中，IgG可中和病毒及毒素;IgM為抗原刺激體液免疫應答反應后最早生成的生物抗體，其水平越高，表示機體的免疫能力越強;IgA可抑制致病菌附著，為黏膜提供了屏障作用[15]。胸腺是機體受抗原刺激后發(fā)生免疫應答的部位，是細胞發(fā)育成熟的場所;脾具有非特異性和特異性免疫功能，含有大量的NK細胞和淋巴細胞。胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、吞噬指數(shù)、NK細胞活性、淋巴細胞增殖能力均可較好地反映免疫器官的發(fā)育程度和免疫細胞的功能[16]。NO、IL-2、IL-6、TNF-α均是與炎癥相關的因子。其中，IL-6、TNF-α是由單核巨噬細胞產(chǎn)生的促炎因子，當機體感染或免疫降低時，其水平增高，嚴重時可引起組織或器官損傷;IL-2可調(diào)控白細胞活性，誘導多種殺傷細胞分化，也可誘導TNF-α產(chǎn)生，阻斷或抑制NO表達，抑制炎癥反應的級聯(lián)擴大[17]。溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值是衡量機體非特異性免疫功能的重要指標，上述指標在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要意義[18]。

本研究結果顯示，與模型組比較，黃芪各給藥組小鼠的Ig（IgG、IgM、IgA）水平、體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、吞噬指數(shù)、NK細胞活性、脾淋巴細胞增殖能力、溶血空斑數(shù)和半數(shù)溶血值均顯著升高，炎癥因子（NO、IL-2、IL-6、TNF-α）水平、左右耳片質(zhì)量差均顯著降低，這提示黃芪地上部分和地下部分均可明顯增強免疫低下模型小鼠的免疫力，且具有一定的量-效關系。該結果與文獻報道類似[19-21]。進一步分析后發(fā)現(xiàn)，黃芪地上部分增強免疫力的作用較地下部分更優(yōu)，該結果與Park YC等[22]的報道相似。對于此結果，筆者分析可能的原因如下：（1）黃芪地下部分和地上部分的有效成分雖然基本一致，但地上部分中黃酮類、皂苷類和多糖類成分的含量均高于地下部分[5-8];（2）采摘時間差異可能與藥效差異有關，臨床使用的黃芪多是生長4～5年、春季萌芽前或秋季落葉后采挖的根，而本研究的黃芪是1年生，可能會影響藥效。

綜上，本研究發(fā)現(xiàn)黃芪地上、地下部分均具有增強免疫力的作用，且地上部分的作用較地下部分更強，這提示其黃芪地上部分具有進一步研究、開發(fā)利用的價值。但本研究仍存在許多不足之處：（1）未考察種植年份與藥效的關系，后續(xù)有必要動態(tài)考察更長年份黃芪地上、地下部分的藥效學差異;（2）黃芪藥材的質(zhì)量除受到生長年限的影響外，還與產(chǎn)地、物種、生態(tài)環(huán)境和種植方式等因素有關，而本研究并未考察上述因素，故后續(xù)仍需納入其他因素考察1年生黃芪地上和地下部分藥效差異的可能原因;（3）本研究僅考察和比較了1年生黃芪地上、地下部分的藥效，而多年生黃芪地上、地下部分的藥效學差異仍需進一步深入研究。

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（收稿日期：2020-08-18 修回日期：2020-11-21）

（編輯：林 靜）