錢 坤，張 穎，王 敬，任連泉

（ 1.天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心 300402； 2.天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 300402）

1 奶牛乳房炎發(fā)病率情況

奶牛乳房炎在一定程度上對(duì)病畜的產(chǎn)乳量造成影響。 會(huì)對(duì)奶牛廠造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失， 同時(shí)也在一定程度上威脅了公共食品衛(wèi)生安全。 金黃色葡球菌大都呈慢性經(jīng)過(guò)，危害較為嚴(yán)重。

相關(guān)文獻(xiàn)證實(shí)，在上世紀(jì)80 年代，對(duì)于我國(guó)奶牛乳房炎病因和發(fā)病情況加以調(diào)查，結(jié)果證實(shí)：金黃色葡球菌所引發(fā)的隱性乳房炎以及臨床乳房炎，發(fā)病概率分別為17.4%以及18.4%。 在2008 年至2009 年，北京地區(qū)一項(xiàng)調(diào)查展示出了牛乳房炎發(fā)病情況，結(jié)果證實(shí)：由于金黃色葡球菌所引發(fā)的隱性與臨床乳房炎發(fā)病概率分別達(dá)到了37.8%以及33.3%[1-2]。 由此能夠看出，此類疾病的發(fā)生率呈現(xiàn)出了逐年上升的趨勢(shì)。 因此有必要使用有效方式，積極鑒定出金黃色葡球菌，進(jìn)而為疾病的治療作出貢獻(xiàn)。

2 金黃色葡球菌分離以及藥敏試驗(yàn)具體過(guò)程

2.1 制備干燥藥敏片

在此其中包含濾紙片制備以及藥液配制。 則取當(dāng)前臨床上常用的幾種獸用抗菌制，用藥劑量依照說(shuō)明書，同時(shí)結(jié)合各個(gè)藥物藥敏紙片純藥物含量水平要求以及抗菌藥物原液內(nèi)百分比，計(jì)算出一份所需要的抗菌藥物原液重量。 在精準(zhǔn)測(cè)量各類抗菌藥品之后，利用緩沖液與稀釋，將藥物稀釋到所需濃度此后進(jìn)行含藥物紙片制備。

2.2 收集乳汁樣本

使用有效方法清除所收集樣本內(nèi)的雜菌。 完成編號(hào)之后，放入到冰盒中冷藏保存。 后離心處理，棄去上層油脂以及中層液體，留存底部沉淀物準(zhǔn)備檢驗(yàn)。

2.3 分離乳汁液樣本中病原菌。 詳細(xì)內(nèi)容包含顯微鏡檢查、細(xì)菌分離培養(yǎng)細(xì)菌、純培養(yǎng)

2.4 細(xì)菌生化鑒定

擇取通過(guò)純化處理的菌株開(kāi)展觸酶試驗(yàn)、 乳膠凝集試驗(yàn)、甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)、藥敏實(shí)驗(yàn)。 觀察具體結(jié)果。

3 牛乳房炎乳汁中金黃色葡球菌分離鑒定結(jié)果特征

3.1 染色鏡檢特征

通過(guò)染色鏡檢可以發(fā)現(xiàn)： 菌體呈現(xiàn)為球狀， 直徑規(guī)格約在0.5～1.0μm。為葡萄串狀、短鏈狀以及雙球狀排列。不存在莢膜、芽孢。 革蘭染色陽(yáng)性球菌。 其可疑似為金黃色葡球菌。

3.2 培養(yǎng)特性

營(yíng)養(yǎng)肉湯質(zhì)地較為渾濁，在管內(nèi)存在少量灰白色沉淀物質(zhì)。輕輕搖晃之后一并消散。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板之中配藥實(shí)驗(yàn)樣本，形成圓形，表面光滑度高、濕潤(rùn)，存在隆起的金黃色菌落菌較大為金黃色。

在血液瓊脂平板之中，菌落較大，為金黃色。 四周存在較為明顯的β 溶血。 而在麥康凱瓊脂平板之上，不存在細(xì)菌生長(zhǎng)，樣本為葡萄串狀排列，不存在莢膜以及芽孢。

3.3 生化鑒定結(jié)果特征

通過(guò)觸酶試驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，受到感染的樣本全部出現(xiàn)氣泡，觸酶試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性[3]。

3.4 乳膠凝集試驗(yàn)

陽(yáng)性分離株在2 分鐘之內(nèi)發(fā)生凝集，乳膠凝集試驗(yàn)為陽(yáng)性。

3.5 糖發(fā)酵試驗(yàn)

通過(guò)糖發(fā)酵試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)：樣本中的海藻糖、果糖、甘露醇、蔗糖、麥芽糖、乳糖、葡萄糖生化反應(yīng)均為陽(yáng)性。 而木糖醇、棉子糖、蜜二糖、木糖則為陰性。

4 陽(yáng)性樣本藥敏試驗(yàn)結(jié)果特征

金黃色葡球菌分離菌株針對(duì)于青霉素鈉耐藥率為100%。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能和此類抗菌制劑過(guò)度使用存在關(guān)聯(lián)性。而針對(duì)紅霉素、阿莫西林、氨芐西林鈉、土霉素的耐藥率分別為56%、63%、69%、75%。 建議不再使用上述藥物治療，其實(shí)對(duì)于鹽酸克林霉素、硫酸鏈霉素、硫酸卡那霉素表現(xiàn)為中度敏感，可實(shí)現(xiàn)交替用藥。 而針對(duì)于硫酸慶大霉素、頭孢噻呋鈉、恩諾沙星以及乳酸環(huán)丙沙星敏感性較高。 推薦使用上述抗生素視為奶牛乳房炎病畜的臨床用藥。