王冬萌，王 慧，韓 乾

（保定市兒童醫(yī)院/保定市兒童呼吸消化疾病臨床研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 保定 071000）

1 資料與方法

1.1 研究對象

對象來源：選自保定市兒童醫(yī)院感染內(nèi)科2019年7月-2019年9月住院的36例IM兒童T淋巴細(xì)胞亞群資料，并搜集患兒末梢血檢測異型淋巴細(xì)胞資料，對照組40例為健康體檢的正常兒童，患兒診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第8版提出的IM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。排除標(biāo)準(zhǔn)：篩選排除傳單診斷依據(jù)不充足的兒童，篩選排除并存細(xì)菌感染、支原體感染、噬血細(xì)胞綜合征、免疫缺陷的傳單兒童。

1.2 方法

由醫(yī)護(hù)人員無菌操作下抽取急性期患兒靜脈血2ml（不許溶血/血凝），由專人立即送檢檢驗(yàn)科用流式細(xì)胞儀檢測TB淋巴細(xì)胞亞群。并同時(shí)采集末梢血，由專業(yè)檢驗(yàn)技師進(jìn)行涂片，手工分類計(jì)數(shù)異型淋巴細(xì)胞百分比。對照組同樣進(jìn)行上述處理?；仡櫺苑治?6例IM兒童急性期T淋巴細(xì)胞亞群的變化，與40例對照組相比較，對比T淋巴細(xì)胞亞群變化規(guī)律。并探討IM兒童，流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群與末梢血檢測異型淋巴細(xì)胞的靈敏度。

1.3 TB淋巴細(xì)胞亞群的檢測

應(yīng)用的TB淋巴細(xì)胞亞群的檢測儀器為美國BECKMAN COULTER公司提供的CVTOMICS FS 500 型流式細(xì)胞儀。TB淋巴細(xì)胞亞群的檢測8個(gè)項(xiàng)目：淋巴細(xì)胞占有核細(xì)胞（CD45+） 12.5(%)，T淋巴細(xì)胞(CD3+)%，輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞(CD3+CD4+)%，抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞(CD3+CD8+)%，CD4+/CD8+，CD3+CD4-CD8-，B淋巴細(xì)胞(CD3-CD19+)%，NK細(xì)胞(CD3-CD16+CD56+)%；其中T細(xì)胞亞群的3個(gè)項(xiàng)目變化最明顯，以此T 細(xì)胞亞群的3 個(gè)項(xiàng)目為研究項(xiàng)目：輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞(CD3+CD4+)%（CD4+）；抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞(CD3+CD8+)%（CD8+）；CD4+/CD8+比值。

1.4 末梢血異型淋巴細(xì)胞檢測：

專業(yè)檢驗(yàn)技師進(jìn)行涂片，手工制片、染色、顯微鏡觀察檢測異型淋巴細(xì)胞百分比，以＞10%為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和構(gòu)成比表示，組間差異比較采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)檢測結(jié)果求出均值±標(biāo)準(zhǔn)差，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)量資料不符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)檢測結(jié)果，檢測結(jié)果用中位數(shù)表示，組間比較采用Mann-Whitney Y檢驗(yàn)，檢測結(jié)果P＜0.05為差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05無差異性,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 發(fā)病年齡與性別

IM組兒童共36例，其中男27例，女9例，男女比為3：1，年齡從1歲3月～9歲不等，中位年齡4.0歲。對照組40例，其中男25例，女15例，男女比為1.67：1，中位數(shù)年齡3.0歲；從46天～11歲不等。兩組性別經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具有可比性。（x2=1.37，P=0.242，P＞0.05）兩組年齡經(jīng)正態(tài)檢驗(yàn)不符合正態(tài)分布，故經(jīng)Mann-Whitney Y檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.315，P=0.188，P＞0.05），具有可比性。

2.2 IM組與對照組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較：

對急性期IM組與對照組兩組CD4+水平比較，符合正態(tài)分布，急性期IM組CD4+水平（17.97±7.69 ）%明顯低于對照組（35.61±8.09）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-9.717，P=0.000，P＜0.05）。對急性期IM組與對照組兩組CD8+水平比較，不符合正態(tài)分布，故經(jīng)Mann-Whitney Y檢驗(yàn)（Z=-7.314，P=0.000，P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對急性期IM組與對照組兩組CD4+/CD8+比值水平比較，不符合正態(tài)分布，故經(jīng)Mann-Whitney Y檢驗(yàn)（Z=-7.237，P=0.000，P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 IM兒童的T淋巴細(xì)胞亞群變化與末梢血異型淋巴細(xì)胞的陽性率。

36例IM患兒中T淋巴細(xì)胞亞群存在圖1所述變化規(guī)律者33例占91.67%。末梢血異型淋巴細(xì)胞＞10%者21例占58.33%，對照組未發(fā)現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞＞10%者。將上述IM組T細(xì)胞亞群與末梢血異型淋巴細(xì)胞靈敏度（組內(nèi)自身比較）進(jìn)行卡方檢驗(yàn)顯示：x2=10.667，P=0.001＜0.05，IM病人在T淋巴細(xì)胞亞群和末梢血異型淋巴細(xì)胞之間靈敏度有差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討 論

IM主要與皰疹病毒群的EB病毒（EBV）原發(fā)感染有關(guān)，我國是EBV感染高流行國家[2]，無癥狀排毒者為感染源。EB病毒很不穩(wěn)定，外界環(huán)境中從未發(fā)現(xiàn)該病毒存在。唾液傳播為主要途徑，在兒科感染中具有普遍性，感染后終生潛伏于體內(nèi)，不能被機(jī)體免疫系統(tǒng)徹底清除，所以被稱為“無處不在的成功病毒”。

兒童對EBV易感，可出現(xiàn)多臟器多系統(tǒng)受累，并與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，如兒童急性淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤等。嚴(yán)重威脅兒童健康。從發(fā)病機(jī)制上講，EBV多種并發(fā)癥的發(fā)生與人體細(xì)胞免疫異常有著非常密切關(guān)系。本研究以符合IM診斷標(biāo)準(zhǔn)者36例為研究對象，分析IM的T淋巴細(xì)胞亞群的變化規(guī)律，并與末梢血涂片的異型淋巴細(xì)胞進(jìn)行比較分析。以協(xié)助臨床早期診斷，早期治療。減少并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。

國外資料顯示，IM的發(fā)病年齡多數(shù)在青少年及年輕成人，而我國與之不同，發(fā)病高峰年齡為4-6歲，本研究對象：36例IM病人中位數(shù)年齡為4.0歲，位于我國發(fā)病年齡特點(diǎn)正常低值。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)病年齡低于國外原因是此年齡段兒童免疫功能相對較低有關(guān)。另外，4-6歲年齡兒童常居于幼托機(jī)構(gòu)及家庭，經(jīng)唾液傳播發(fā)病可能性大。經(jīng)過對IM組和對照組的T淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CD4+、CD4+/CD8+較對照組下降，CD8+上升，T淋巴細(xì)胞亞群是反應(yīng)T淋巴細(xì)胞免疫功能的一組指標(biāo)。CD4+、CD8+的改變及其比值降低說明IM患兒存在T細(xì)胞免疫功能過度抑制。探究其原因，病毒入侵口咽部上皮細(xì)胞，再入血刺激B淋巴細(xì)胞增殖，表達(dá)病毒特異性抗原，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答反應(yīng)，所以臨床抽血檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)EB病毒抗體陽性、EB病毒載量增高。

IM組：T淋巴細(xì)胞亞群變化與末梢血涂片查找異型淋巴細(xì)胞結(jié)果相比較，經(jīng)卡方檢驗(yàn)，T淋巴細(xì)胞亞群變化比末梢血異型淋巴細(xì)胞變化有意義。有研究認(rèn)為，末梢血異型淋巴細(xì)胞多數(shù)是細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CD8+），CD8+是T細(xì)胞表面的一種標(biāo)記物，是T細(xì)胞的免疫表型。研究它的變化規(guī)律可以彌補(bǔ)末梢血靈敏度低和形態(tài)學(xué)上的不足，彌補(bǔ)檢驗(yàn)員對異型淋巴細(xì)胞識(shí)別的熟練度的主觀差異，使得對異型淋巴細(xì)胞的識(shí)別變得標(biāo)準(zhǔn)化。所以在中國發(fā)病年齡段偏小、臨床非特異性表現(xiàn)為主、臨檢證據(jù)不足時(shí)，行T細(xì)胞亞群檢測可協(xié)助IM診斷。