許春來

（江蘇省建湖縣人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 鹽城 224700）

細(xì)菌作為一種原核微生物，具有結(jié)構(gòu)簡單以及形態(tài)微小的特點，但是肉眼無法直接觀察，因此，在臨床的診斷和治療過程中，細(xì)菌檢驗占據(jù)十分重要的作用。近年來，伴隨細(xì)菌檢驗技術(shù)的發(fā)展不斷成熟和完善，臨床上對于細(xì)菌鑒定以及藥敏結(jié)果的分析要求隨之不斷提高，目前，臨床上對于細(xì)菌的鑒定方法和技術(shù)也相對較多，由于檢驗操作的過程并不相同，加之容易受到主觀因素的影響，將會直接影響鑒定結(jié)果[1]。選取我院檢驗科所接收的264例陽性血液標(biāo)本，分別采取常規(guī)藥敏以及直接藥敏的檢驗方法，觀察鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取我院2018年10月～2019年10月檢驗科所接收的264例陽性血液標(biāo)本，研究時間在，按照不同檢驗方法分為常規(guī)組和直接組。其中，男142例，女122例，年齡16～82歲，平均（46.52±2.47）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者自愿參與研究；②簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①血液系統(tǒng)疾病；②采集血液樣本48h內(nèi)，并未用藥或者接受其他治療；③凝血功能障礙；④資料不全。

1.2 檢驗方法

留取患者20 mL的血液樣本，分別放置含溶血素厭氧菌以及含樹脂需氧培養(yǎng)瓶中，并將其放置于全自動血液培養(yǎng)儀器中。對于培養(yǎng)陽性血標(biāo)本分別采取以下兩種方法進(jìn)行檢驗。

常規(guī)組采取常規(guī)藥敏試驗的方法進(jìn)行檢驗。將血液標(biāo)本放置于血平板、巧克力平板以及麥康凱平板培養(yǎng)，分別放置于濃度為5%、溫度為35攝氏度的CO2環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，持續(xù)20h。取菌落涂片后，進(jìn)行常規(guī)的革蘭染色，并根據(jù)檢驗結(jié)果進(jìn)行觸酶或者氧化酶試驗。利用微生物鑒定儀，進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏試驗。具體操作步驟如下：使用無菌棉簽取菌落，并放置于鑒定管中，混合均勻后靜置10 s，出現(xiàn)氣泡則為鑒定失敗。使用比濁儀將菌液濃度調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬号渲猛瓿珊笮柙?0 s內(nèi)完成操作。最后，將145 μL鑒定管菌懸液轉(zhuǎn)入藥敏管當(dāng)中，充分混勻。藥敏和鑒定板卡分別插入AST藥敏管以及鑒定管中。輸入最終鑒定以及藥敏結(jié)果，并將藥敏以及鑒定板放入儀器當(dāng)中，關(guān)閉艙門，完成檢驗。

直接組則采取直接藥敏試驗的方法進(jìn)行檢驗。使用無菌注射器抽取10 mL血液樣本，將其放置于無菌試管中，使用密度梯度離心法，按照每分鐘1500轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理，處理時間在5～10 min，收集上清液后，將其轉(zhuǎn)移到全新的離心管中，隨后按照每分鐘3000轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理，處理時間15m in，去除上清液后，進(jìn)行PBS洗滌和沉淀。此外，取20 μL懸液涂片進(jìn)行革蘭染色處理，將其倒置于顯微鏡下繼續(xù)觀察，鑒定細(xì)菌為陰性菌或者革蘭染色陽性菌。最后，使用無菌棉簽取沉淀物，并利用全自動細(xì)菌鑒定系統(tǒng)或者藥敏系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏檢驗。

1.3 臨床觀察指標(biāo)

分別采取以上兩種檢驗方法后，比較兩組細(xì)菌鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

觀察指標(biāo)確定后，將兩組研究對象的指標(biāo)數(shù)據(jù)通過SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)進(jìn)行測評，計數(shù)資料采用（n，%）進(jìn)行統(tǒng)計描述，采用x2檢驗進(jìn)行統(tǒng)計推斷。當(dāng)P值小于0.05時，表示兩組數(shù)據(jù)結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)參考價值。

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)菌鑒定結(jié)果

所有血液標(biāo)本經(jīng)過檢驗，陽性檢出率為251例（95.08%）。直接組對于革蘭陽性球菌的檢驗符合率53例（20.08%），對于革蘭陰性桿菌的檢驗符合率209例（79.17%），與常規(guī)組53例（20.08%）、209例（79.17%）相比并無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 藥敏試驗結(jié)果

直接組對于革蘭陰性桿菌的檢驗敏感率257例（97.35%）以及耐藥率256例（96.97%），對于革蘭陽性球菌檢驗敏感率258例（97.73）以及耐藥率259例（98.11%），與常規(guī)組256例（96.97%）、255例（96.59%）比較并無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討 論

對于感染患者來說，體內(nèi)將會帶有耐藥性的細(xì)菌，此時，若未進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)菌的耐藥性，將會導(dǎo)致患者病情加重，增加治療難度。因此，臨床上對于感染患者來說，進(jìn)行血液細(xì)菌學(xué)以及耐藥性的檢驗對于臨床診斷和后續(xù)的用藥治療具有十分重要的作用。近年來，伴隨抗生素濫用的問題十分普遍，細(xì)菌耐藥性以及對于抗生素的敏感性隨之發(fā)生了巨大的變化，將會導(dǎo)致細(xì)菌檢驗的難度增加，因此，臨床上尋求一種有效而又快速的檢驗方法十分重要，進(jìn)而提高檢驗質(zhì)量，為臨床的治療提供可靠的數(shù)據(jù)支持[2-3]。

目前，臨床上通常采取基因鑒定以及表型鑒定兩種鑒定方法，表型鑒定法主要是根據(jù)生理變化、具體形態(tài)、蛋白質(zhì)以及細(xì)胞組分等方面的變化進(jìn)行細(xì)菌的鑒定，目前，對于大部分醫(yī)院來說，由于醫(yī)療條件有限，難以全面開展基因型鑒定。對于藥敏試驗的檢驗方法相對較多，如：稀釋法、擴(kuò)散法以及抗生素濃度梯度法，但是不同檢驗方法的檢驗結(jié)果也各不相同[4-5]。

常規(guī)的檢驗方法對于陽性血液標(biāo)本的檢出率相對較高，但是藥敏試驗以及細(xì)菌鑒定的速度相對緩慢，難以滿足臨床診斷和治療的需求[6]。經(jīng)過研究，得出以下結(jié)果：所有血液標(biāo)本經(jīng)過檢驗，陽性檢出率為251例（95.08%）。直接組對于革蘭陽性球菌的檢驗符合率以及革蘭陰性桿菌的檢驗符合率與常規(guī)組相比并無明顯差異，直接組對于革蘭陰性桿菌的檢驗敏感率以及耐藥率以及革蘭陽性球菌檢驗敏感率與常規(guī)組比較并無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。因此可見，直接藥敏試驗的過程中，處于適當(dāng)?shù)臏囟认?，對于抑菌環(huán)大小進(jìn)行藥敏試驗，在此期間無需進(jìn)行培菌培養(yǎng)，使得鑒定更加快捷和方便，能夠為臨床的診斷和后續(xù)的治療提供有效的依據(jù)[7-10]。對于病情并不嚴(yán)重以及復(fù)雜的患者來說，短時間并不會威脅患者生命安全，則可進(jìn)行常規(guī)檢查，通常情況下直接進(jìn)行藥敏試驗將可以達(dá)到檢驗要求，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床當(dāng)中。