陶秀霞，朱峰嶺，汪建文

蕪湖市第二人民醫(yī)院，安徽蕪湖241001

乳腺癌是威脅我國女性身心健康最常見的惡性腫瘤。近年來，隨著生活節(jié)奏加快、生活習(xí)慣改變、職業(yè)壓力增加等，乳腺癌的發(fā)病率逐年上升并呈年輕化趨勢。早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌，尤其是無癥狀的乳腺癌，對提高患者預(yù)后具有重要意義。乳腺鉬靶X線檢查是乳腺癌篩查首選的影像學(xué)檢查方法。有研究報道，90%以上無癥狀的乳腺癌患者是通過鉬靶X線檢查被發(fā)現(xiàn)的。惡性鈣化征象是乳腺癌鉬靶X線檢查中的重要特征之一，為進(jìn)一步診治提供了重要依據(jù)。雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人表皮生長因子受體2(HER-2)、增殖細(xì)胞核抗原Ki-67表達(dá)是劃分乳腺癌分子亞型的重要依據(jù)，對乳腺癌治療方案選擇和預(yù)后判斷具有指導(dǎo)意義[1～3]。本研究觀察了乳腺癌鉬靶X線惡性鈣化征象與ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)的關(guān)系，旨在為乳腺癌術(shù)前輔助內(nèi)分泌治療和預(yù)后判斷提供更多有價值的參考信息。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年4月～2018年11月蕪湖市第二人民醫(yī)院收治的女性乳腺癌患者81例。所有患者經(jīng)術(shù)后組織病理檢查明確診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合原發(fā)性乳腺癌診斷，單側(cè)發(fā)?。虎诔踉\，女性；③術(shù)前接受乳腺鉬靶X線檢查；④接受乳腺癌根治手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①乳腺癌轉(zhuǎn)移者；②合并其他部位惡性腫瘤者；③合并心、肝、腎等重要臟器嚴(yán)重疾病者；④乳腺鉬靶X線表現(xiàn)為可疑惡性鈣化征象者；⑤臨床資料不完整者。根據(jù)術(shù)前乳腺鉬靶X線有無惡性鈣化征象，將患者分為有惡性鈣化組36例、無惡性鈣化組45例。其中，有惡性鈣化組年齡30～75(55±12)歲，左乳19例、右乳17例，浸潤性癌29例、非浸潤性癌7例，乳房內(nèi)有腫塊30例、乳頭皮膚出現(xiàn)酒窩征或橘皮征3例、乳頭溢液3例；無惡性鈣化組年齡38～86(62±14)歲，左乳24例、右乳21例，浸潤性癌36例、非浸潤性癌9例，乳房內(nèi)有腫塊35例、乳頭皮膚出現(xiàn)酒窩征或橘皮征5例、乳頭溢液5例。兩組一般資料具有可比性。本研究經(jīng)蕪湖市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者或其家屬知情同意。

1.2 乳腺鉬靶X線鈣化征象評估 采用GE全數(shù)字化乳腺鉬靶X線攝影機(jī)常規(guī)投照雙側(cè)乳腺內(nèi)外斜位、頭尾位，必要時加攝側(cè)位或局部點壓放大攝影。采用雙盲法由兩位高年資放射科醫(yī)師獨立閱片，參考美國放射學(xué)會制定的乳腺影像報告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)對鈣化征象進(jìn)行分類。乳腺鈣化征象按性質(zhì)分為良性鈣化、可疑惡性鈣化和惡性鈣化。良性鈣化：一般鈣化灶較大，呈粗糙或邊緣清晰的圓形鈣化；可疑惡性鈣化：通常表現(xiàn)為不定形或模糊鈣化和粗糙不均質(zhì)鈣化；惡性鈣化：顆粒點狀鈣化或線樣分支狀鈣化，邊緣模糊，大小、形態(tài)不一，密度較低[4]。

1.3 ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)檢測 采用免疫組化SP法。取手術(shù)切除的乳腺癌組織，10%中性甲醛固定24 h，常規(guī)脫水、透明，石蠟包埋，3 μm厚連續(xù)切片。切片經(jīng)65 ℃烤片、二甲苯脫蠟、梯度乙醇水化、3% H2O2滅活內(nèi)源性過氧化酶、加熱抗原修復(fù)、正常山羊血清封閉后，分別滴加ER、PR、HER-2、Ki-67一抗，4 ℃孵育過夜，次日滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫孵育30 min，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，鹽酸乙醇分化，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固，顯微鏡下觀察。以PBS代替一抗作為陰性對照。

采用雙盲法由兩位病理科醫(yī)師獨立閱片。ER、PR、Ki-67陽性染色定位于細(xì)胞核，呈棕褐色顆粒；HER-2陽性染色定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，呈棕褐色顆粒。每張切片隨機(jī)選取5個100倍視野，鏡下發(fā)現(xiàn)陽性染色細(xì)胞即可判定為陽性表達(dá)、未發(fā)現(xiàn)陽性染色細(xì)胞為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

有惡性鈣化組ER、PR陽性表達(dá)率均低于無惡性鈣化組(χ2分別為0.014、0.020，P均<0.05)，而HER-2、Ki-67陽性表達(dá)率均高于無惡性鈣化組(χ2分別為0.023、0.006，P均<0.05)。兩組ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況見表1。

表1 兩組ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況[例(%)]

3 討論

乳腺癌是起源于乳腺導(dǎo)管上皮的惡性腫瘤，其病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚[5，6]。乳腺癌早期往往不具備典型的癥狀和體征，不易被發(fā)現(xiàn)或引起重視，很多患者就診時已發(fā)展至中晚期，錯過了最佳治療時機(jī)，預(yù)后較差。乳腺鉬靶X線檢查是目前診斷乳腺癌最有效、最可靠的手段。乳腺癌鉬靶X線的重要特征是惡性鈣化征象。惡性鈣化征象是診斷乳腺癌的有力證據(jù)，尤其是對無癥狀的乳腺癌患者更具價值。有研究報道，有惡性鈣化征象的乳腺癌惡性程度更高，侵襲性更強(qiáng)，患者預(yù)后更差。因此，闡明乳腺癌鉬靶X線惡性鈣化征象與患者臨床病理特征的關(guān)系，可能有助于乳腺癌治療選擇和預(yù)后判斷。

ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)是劃分乳腺癌分子分型的重要依據(jù)，對乳腺癌治療方案選擇和預(yù)后判斷具有指導(dǎo)意義[1～3]。ER、PR是乳腺癌的生物學(xué)標(biāo)志物，是目前國內(nèi)外臨床針對乳腺癌內(nèi)分泌治療和預(yù)后評估的重要指標(biāo)。ER是一種具有與雌激素特異性結(jié)合形成激素-受體復(fù)合物，從而使激素產(chǎn)生效應(yīng)的蛋白質(zhì)分子。PR是ER作用于染色體后新合成的一種蛋白質(zhì)，可調(diào)節(jié)乳腺上皮細(xì)胞生長。PR的合成受到ER的調(diào)控，故PR陽性者ER大多亦陽性。正常乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)存在ER、PR，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時，ER和PR可能保留也可能丟失。如果細(xì)胞內(nèi)仍保留ER和(或)PR，表明乳腺癌細(xì)胞高分化，其增殖仍受內(nèi)分泌調(diào)控，稱為激素依賴性乳腺癌；反之，表明乳腺癌細(xì)胞低分化，其增殖不受內(nèi)分泌調(diào)控，稱為非激素依賴性乳腺癌。激素依賴性乳腺癌往往生長緩慢，對內(nèi)分泌治療反應(yīng)性高，患者預(yù)后較好；非激素依賴性乳腺癌對內(nèi)分泌治療效果不佳，預(yù)后較差。但乳腺癌患者預(yù)后還受其他因素影響，如病理類型、TNM分期、有無轉(zhuǎn)移等，不能僅依靠ER和(或)PR陽性來判斷患者預(yù)后[7]。HER-2是表皮生長因子受體家族成員之一，是乳腺癌常用的基因標(biāo)志物。在乳腺癌組織中HER-2過表達(dá)，其過表達(dá)與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移和患者預(yù)后密切相關(guān)。大約20%的原發(fā)性乳腺癌患者存在HER-2基因擴(kuò)增或蛋白過表達(dá)現(xiàn)象。有研究表明，HER-2表達(dá)與TNM分期、腫瘤大小和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系，與ER、PR表達(dá)及組織分化程度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系[8]，提示HER-2可作為判斷乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的分子標(biāo)志物。Ki-67是一種與細(xì)胞增殖相關(guān)的核抗原，在細(xì)胞增殖期表達(dá)，能夠特異性反映腫瘤細(xì)胞的增殖活性。有研究認(rèn)為，乳腺癌組織Ki-67表達(dá)越高，腫瘤惡性程度越高[9]。有研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67表達(dá)與乳腺癌早期復(fù)發(fā)有關(guān)，乳腺癌復(fù)發(fā)越早，Ki-67表達(dá)越高；乳腺癌Ki-67陽性表達(dá)≥14%者復(fù)發(fā)和死亡的風(fēng)險高于乳腺癌Ki-67陽性表達(dá)<14%者[10]。因此，Ki-67表達(dá)變化與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，并可作為指導(dǎo)乳腺癌新輔助化療并預(yù)測化療敏感性的分子生物學(xué)指標(biāo)[11]。但目前ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)與乳腺癌鉬靶X線惡性鈣化征象的關(guān)系報道較少。

既往研究認(rèn)為，鉬靶X線惡性鈣化征象的乳腺癌患者病理特征多表現(xiàn)為HER-2陽性表達(dá)和ER、PR陰性表達(dá)[12]；起源于乳腺導(dǎo)管上皮的乳腺癌惡性鈣化率較高，HER-2在腫塊合并簇狀鈣化乳腺癌患者中表達(dá)最高，且與腫塊影像學(xué)表現(xiàn)有關(guān)[13，14]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，有惡性鈣化組ER、PR陽性表達(dá)率均低于無惡性鈣化組，而HER-2、Ki-67陽性表達(dá)率均高于無惡性鈣化組，提示鉬靶X線惡性鈣化征象可在一定程度上反映乳腺癌ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況。

綜上所述，鉬靶X線惡性鈣化征象可在一定程度上反映乳腺癌ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況，這為乳腺癌術(shù)前輔助內(nèi)分泌治療和預(yù)后判斷提供了更多有價值的參考信息。