張 琰 張 苗

（1.保定市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 河北保定 071000；2.保定市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督管理站；3.保定市食品藥品檢驗(yàn)所）

1 前言

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和居民生活水平以及養(yǎng)生觀念的日漸提升，蔬菜和水果在居民飲食消費(fèi)中的占比越來(lái)越高，其含有的大量維生素、礦物質(zhì)與粗纖維等，對(duì)于保持健康有重要作用。我國(guó)種植蔬菜水果的過(guò)程中為防止蟲害會(huì)大量使用農(nóng)藥，其中有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥使用尤為廣泛，這些農(nóng)藥殘留在菜葉與果皮上往往難以清洗干凈，不僅會(huì)對(duì)居民的健康造成危害，大量農(nóng)藥的隨意使用也會(huì)造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。

目前常用的檢測(cè)蔬菜水果中有機(jī)磷與有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的方式為氣相色譜法、氣相色譜-單四極桿質(zhì)譜法和氣相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法。其中，氣相色譜法依靠時(shí)間參數(shù)進(jìn)行定性檢測(cè)，雖然有方便快捷的優(yōu)勢(shì)，但也存在檢測(cè)精度不高和難以檢測(cè)多組分農(nóng)藥殘留的缺陷[1]；而單四極桿質(zhì)譜法僅采用單離子測(cè)試，難以進(jìn)行精度更高的定量檢測(cè)，符合組分的檢測(cè)精度也較差。而本文采用的氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法通過(guò)質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式進(jìn)行掃描，結(jié)合時(shí)間、特殊離子含量等參數(shù)進(jìn)行綜合檢測(cè)，不僅檢測(cè)精度更高，而且對(duì)于含有混合組分的農(nóng)藥也能夠?qū)崿F(xiàn)較好的定性和定量檢測(cè)，非常適用于檢測(cè)含有多種有機(jī)磷、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的蔬菜和水果樣品。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

氣相色譜三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（7890B）；固相萃取儀（EXTRA）；定量濃縮儀、震蕩儀（超聲波震蕩與混合震蕩）；固相萃取柱（Carb/NH2）、乙腈、丙酮、氯化鈉、醋酸鈉、硫酸鎂等。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品

含農(nóng)藥中常見(jiàn)的有機(jī)磷、有機(jī)氯的標(biāo)準(zhǔn)濃度樣品若干（100 μg/mL），其中包括甲拌磷亞砜、甲拌磷砜、五氯硝基苯、七氯等。

2.3 條件

2.3.1 色譜條件

色譜柱：15m×0.25mm×0.25μm；載流氣體：99.99%高純氦，溫度280～320℃；后運(yùn)行柱：溫度 320℃，進(jìn)樣口壓力2 psi，EPC壓力50 psi，總共運(yùn)行5 min。

2.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：EI大小80eV，溫度290℃；傳輸溫度310℃；四級(jí)桿溫度180℃；載流氣體為氮?dú)猓髁?.5mL/min；檢測(cè)方式為MRM檢測(cè)。

2.4 方法

2.4.1 樣品處理

實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)自市場(chǎng)中出售的蔬菜與水果若干，均已按照常規(guī)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程噴灑農(nóng)藥。處理樣品時(shí)，蔬菜取菜葉，水果取果皮，共計(jì)取樣1.00 kg后將樣品切碎后制作為勻漿。提取時(shí)每次取勻漿5.0 g，向其中加入乙腈10 mL、氯化鈉粉末2.0 g后，將其置于離心機(jī)中采用超聲波離心（20 min，2 000 r/min旋轉(zhuǎn)離心2 min），離心完畢后取上清液再次進(jìn)行提取操作（與上步相同），提取完畢后向其中加入約8.0 g的無(wú)水硫酸鎂，震蕩5 min使各組分充分混合均勻，隨后將其置入蒸發(fā)儀器中，在153 mbar和60℃的條件下蒸發(fā)一定時(shí)間至水分基本蒸發(fā)殆盡，隨后向蒸發(fā)后的樣品中加入丙酮和二氯甲烷的等比例混合液3mL，此時(shí)用于檢測(cè)的樣品檢測(cè)液已經(jīng)制作完畢，可直接進(jìn)行檢測(cè)。

檢測(cè)使用Carb/NH2檢測(cè)柱，通過(guò)丙酮與二氯甲烷的混合液對(duì)檢測(cè)柱進(jìn)行充分清洗后，用正乙烷定容至1 mL，采用針式過(guò)濾器將其轉(zhuǎn)移到色譜儀中，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析測(cè)定。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品配制

選取含有機(jī)磷與有機(jī)氯的標(biāo)準(zhǔn)樣品各300 μL，用正丁烷定容至2 mL，此時(shí)的有機(jī)磷和有機(jī)氯的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度為10.00 mg/L，標(biāo)準(zhǔn)樣品需在使用時(shí)臨時(shí)配制。

選取在特殊生長(zhǎng)環(huán)境下生長(zhǎng)的不含農(nóng)藥的蔬菜與水果樣品，樣品的處理方式與之前相同，作為空白對(duì)照組。在將空白樣品制作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照基質(zhì)液后，用正丁烷將其按照濃度梯度進(jìn)行定容，濃度為20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L 和 500 μg/L，用作對(duì)照實(shí)驗(yàn)和測(cè)定農(nóng)藥殘留的線性方程。

3 結(jié)果與討論

3.1 儀器條件優(yōu)化

3.1.1 色譜優(yōu)化

色譜柱采用非極性DB-5MS色譜柱，采用2.3.1中的色譜條件，待測(cè)定目標(biāo)完全流出色譜柱后，對(duì)色譜柱采用反吹的方式將其中的大分子從進(jìn)樣口流出，防止大分子物質(zhì)對(duì)色譜柱造成污染[2]。

3.1.2 質(zhì)譜優(yōu)化

通過(guò)查詢環(huán)境污染物MRM數(shù)據(jù)庫(kù)（G9250）中常見(jiàn)的有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的質(zhì)譜條件，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)中所用儀器的工作條件，確定檢測(cè)化合物的最佳保留時(shí)間、碰撞能量和相對(duì)豐度。

3.2 線性方程、檢出限和定量限

實(shí)驗(yàn)中的12種有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的線性方程、檢出限和定量限之間的關(guān)系詳見(jiàn)表1。其中線性檢測(cè)范圍為 20～50 μg/L，相關(guān)系數(shù) r＞0.997，計(jì)算得出檢測(cè)限（LOD）和定量限（LOQ）。

3.3 樣品測(cè)定

對(duì)收集到的常見(jiàn)蔬菜和水果樣品進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，毒死蜱為0.012～0.020 mg/kg，檢出率20%；甲拌磷砜0.03 mg/kg，檢出率9%。其他種類的農(nóng)藥的含量均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2019《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[3]中對(duì)有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的規(guī)定含量，含有毒死蜱和甲拌磷砜的樣品中提取的離子流圖詳見(jiàn)圖1和圖2。

表1 線性方程、檢出限和定量限

圖1 毒死蜱提取的離子流

圖2 甲拌磷砜提取的離子流圖

由圖1和圖2可知，含有毒死蜱的樣品中的離子流與標(biāo)準(zhǔn)樣品中離子豐度吻合性較好，而甲拌磷砜的離子流在199.0→143.0區(qū)段則存在少量偏差，但仍符合標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子流圖，造成這種現(xiàn)象的原因可能是甲拌磷砜的樣品中存在其他的雜質(zhì)干擾[4，5]。

4 結(jié)論

本文采用GC-QqQ-MS/MS法對(duì)常見(jiàn)蔬菜和水果中的12種含有機(jī)磷和有機(jī)氯的農(nóng)藥進(jìn)行了測(cè)試。結(jié)果表明，樣品中的農(nóng)藥含量均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，且該方法與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的離子流圖中標(biāo)準(zhǔn)樣品的吻合性較好，說(shuō)明該方法可作為檢測(cè)蔬菜水果中有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的方式，并且具有操作簡(jiǎn)單和使用成本低的優(yōu)勢(shì)，值得在相關(guān)行業(yè)推廣使用。