■章 霞 徐志進 李凌剛 柳敏海 李偉業(yè) 殷小龍

（浙江省舟山市水產(chǎn)研究所，浙江舟山316000）

大黃魚（Pseudosciaena crocea）屬硬骨魚綱（Osteichthyes）、鱸形目（Perciformes）、石首魚科（Sciaenidae）、黃魚屬，主要分布在我國的南海、東海和黃海南部，有“海水國魚”之稱[1]。20 世紀70 年代，大黃魚因過度捕撈而資源日漸枯竭[2]。自1985 年大黃魚魚苗培育成功以來，大黃魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，目前為浙江和福建沿海城市主要養(yǎng)殖經(jīng)濟魚類，在漁業(yè)經(jīng)濟和漁業(yè)資源恢復中發(fā)揮重要作用[3-4]。

迄今為止，關(guān)于大黃魚的營養(yǎng)健康研究有不少報道，主要集中在養(yǎng)殖模式、飼料營養(yǎng)及遺傳育種等三個方面。韓坤煌等[5]的研究表明，圍網(wǎng)養(yǎng)殖大黃魚的氨基酸總量、粗蛋白、鮮味氨基酸、呈味氨基酸含量明顯高于普通網(wǎng)箱大黃魚（P＜0.05），可通過改變養(yǎng)殖模式如圍網(wǎng)養(yǎng)殖提高大黃魚肉質(zhì)；高有領(lǐng)等[6]的研究表明，投喂配合飼料與投喂鮮雜魚相比可顯著降低大黃魚全魚的粗脂肪含量（P＜0.05），顯著提高總氨基酸含量（P＜0.05），投喂配合飼料提高大黃魚肌肉的營養(yǎng)價值；林利民等[7]的研究結(jié)果表明通過家系選育育種可改良大黃魚的肉質(zhì)等。但對產(chǎn)后大黃魚親魚營養(yǎng)復健影響的研究目前尚無報道。

在日常育苗生產(chǎn)中，大黃魚親魚一般會在產(chǎn)后的2個月或者更短的時間內(nèi)進入網(wǎng)箱養(yǎng)殖，儲備作為來年的親魚。此階段中大黃魚的營養(yǎng)健康是影響大黃魚產(chǎn)后成活率及來年繁育性能的重要條件，因此探究不同餌料對產(chǎn)后大黃魚的營養(yǎng)健康影響具有重要實際意義。

本研究結(jié)合當前育苗種的生產(chǎn)實際，通過投喂冰鮮或鮮活餌料進行產(chǎn)后大黃魚的營養(yǎng)強化，并通過大黃魚肌肉氨基酸和脂肪酸含量分析來評價幾種常見餌料對大黃魚營養(yǎng)效果的影響，以此作為今后生產(chǎn)育苗中的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2017年4月，選自浙江華興水產(chǎn)科技有限公司同一批產(chǎn)后大黃魚雌性親魚作為本試驗的試驗對象，試驗共設(shè)4組，每組各選取100尾大黃魚雌性親魚[平均體重(437.43±65.10) g，平均體長(27.33±0.57) cm]養(yǎng)殖于4 m×4 m的水池中，換水量每天200%，每天投餌量為魚體總重量的2%，投喂次數(shù)為每天2 次，組A每天投喂中華管鞭蝦（Solenocera crassicornis）（以下簡稱紅蝦）0.5 kg/次，組B 投喂沙蠶（Nereis succinea）0.5 kg/次，組C 投喂黃占魚（Trachurus japonicus）魚塊+強化劑（簡稱魚強，親魚強化劑購自青島越洋進出口有限公司，填充量為80 ml/kg）0.5 kg/次，組D 投喂黃占魚魚塊（簡稱魚塊）0.5 kg/次。復健2 個月后取樣，試驗各組取樣，每組設(shè)3個重復，3尾魚1個重復。臨催產(chǎn)前的親魚肌肉氨基酸和脂肪酸含量數(shù)據(jù)記為原始對照組O。

1.2 樣本采集與指標測定

取樣前對樣品魚進行饑餓處理24 h后，依次將養(yǎng)殖池中各組試驗魚適量撈出，用丁香酚（上?；瘜W試劑公司產(chǎn)品，1∶10 000）麻醉，各組大黃魚取背部肌肉40 g，腹部肌肉50 g，分別混合各組樣品，凍存至-80 ℃冰箱用于測定魚肉中的基礎(chǔ)營養(yǎng)成分——粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分以及氨基酸和脂肪酸含量。

各個餌料和魚肉營養(yǎng)成分的測定：粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、灰分、水分的含量分別采用凱氏定氮法（GB 5009.5—2016）、索氏抽提法（GB/T 6433—2006）、550 ℃燃燒后稱量殘余物的方法（GB 5009.4—2016）、直接干燥法（GB 5009.3—2016）測定。采用GB/T 5009.124—2003測定肌肉中的氨基酸含量，脂肪酸含量采用水解提取-氣相色譜法（GB/T 22223—2008）測定。

試驗儀器采用IE363 氨基酸分析儀（日本日立L-8900）和氣相色譜儀（日本島津GC-2010）。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件開展單因素方差分析（ANOVA），差異性顯著分析采用Duncan's 法多重比較。

2 結(jié)果

2.1 四種餌料的基礎(chǔ)營養(yǎng)測定和氨基酸、脂肪酸的含量

2.1.1 四種餌料的基礎(chǔ)營養(yǎng)測定（見表1）由表1可知，不同餌料之間，水分含量差別較大，由多到少依次是沙蠶、紅蝦、魚塊、魚強，各種餌料間差異顯著（P＜0.05）；粗蛋白含量由多到少依次是魚強、魚塊、紅蝦、沙蠶，其中魚強粗蛋白含量顯著高于魚塊、紅蝦和沙蠶（P＜0.05），魚塊和紅蝦差異不大；粗脂肪含量由大到小為魚強、魚塊、沙蠶、紅蝦，其中魚強、魚塊顯著高于沙蠶和紅蝦（P＜0.05）；粗灰分含量由大到小紅蝦、沙蠶、魚強、魚塊，紅蝦顯著高于沙蠶、魚塊和魚強（P＜0.05），魚塊和魚強無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 不同餌料的基本營養(yǎng)成分比較（n=3，以鮮基計，%）

2.1.2 四種餌料的氨基酸含量（見表2）

表2 不同餌料的氨基酸含量比較(n=3，以鮮基計，%)

由表2可知，四種餌料的氨基酸總含量最高為魚強（16.99±0.68）%，超過紅蝦1.22個百分點、魚塊2.35個百分點、沙蠶7.87 個百分點，紅蝦和魚塊差異不顯著（P＞0.05）；沙蠶的非必需氨基酸總量（4.57±1.01）%顯著低于紅蝦、魚塊、魚強（P＜0.05），其他三組之間差異不顯著（P＞0.05）；魚強的必需氨基酸總量（9.22±0.25）%，顯著高于紅蝦、魚塊和沙蠶（P＜0.05），紅蝦和魚塊差異不顯著（P＞0.05），呈味氨基酸總量紅蝦顯著高于魚塊和沙蠶。

2.1.3 四種餌料的脂肪酸含量（見表3）

表3 不同餌料的脂肪酸含量比較（n=3，以鮮基計，%）

由表3可知，四種餌料的脂肪酸總含量最高為魚強（3.077±0.616）%，超過魚塊0.696 個百分點、沙蠶1.309 個百分點、紅蝦2.664 個百分點，魚強總脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦（P＜0.05）；魚強的飽和脂肪酸含量顯著高于魚塊、沙蠶和紅蝦，魚塊、沙蠶的飽和脂肪酸含量差異不顯著（P＞0.05）；魚強、魚塊的不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦（P＜0.05）；魚強、魚塊的單不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦（P＜0.05），沙蠶和紅蝦之間差異不顯著（P＞0.05）。魚強的多不飽和脂肪酸和高不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦；EPA+DHA的含量魚強高于魚塊（P＞0.05），顯著高于沙蠶和紅蝦，且沙蠶顯著高于紅蝦（P＜0.05）。

2.2 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚氨基酸的含量

2.2.1 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚背部氨基酸含量

通過投喂不同餌料復健的產(chǎn)后雌性大黃魚親魚背部氨基酸含量見表4 所示。復健2 個月后，各組總氨基酸含量組C＞組A＞組O＞組D＞組B，各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。非必需氨基酸含量為組C＞組A＞組D＞組O＞組B，各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。必需氨基酸含量為組O＞組A＞組C＞組D＞組B，各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。呈味氨基酸含量為組C＞組A＞組O＞組D＞組B，各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。組A、B、C、D的各種氨基酸含量存在差異的為谷氨酸、蛋氨酸和脯氨酸；谷氨酸含量組C顯著高于組A、B、D（P＜0.05）；蛋氨酸組A 顯著高于組B、C、D，脯氨酸組D顯著高于組C（P＜0.05）。

表4 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚背部氨基酸含量比較(n=3，以鮮基計，%)

2.2.2 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚腹部氨基酸含量

通過投喂不同餌料復健的產(chǎn)后雌性大黃魚親魚腹部氨基酸含量見表5 所示。復健2 個月后，各組總氨基酸含量組A＞組C＞組D＞組O＞組B，其中組A 顯著高于對照組O 及組C、D、B（P＜0.05）。非必需氨基酸含量為組A＞組C＞組O＞組D＞組B。必需氨基酸含量為組A＞組D＞組C＞組B＞組O，其中組A 顯著高于對照組O（P＜0.05）。呈味氨基酸總含量為組C＞組A＞組O＞組D＞組B，各組之間無顯著性差異。相對于對照組，各組的氨基酸含量有變化的為天門冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、酪氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸和纈氨酸。組A 和組C的天門冬氨酸和谷氨酸顯著高于組B、D（P＜0.05），組A 的蛋氨酸含量顯著高于組B、D(P＜0.05)。

2.3 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚脂肪酸含量

2.3.1 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚背部脂肪酸含量

通過投喂不同餌料復健的產(chǎn)后雌性大黃魚親魚背部脂肪酸含量如表6 所示。在大黃魚親魚復健期間通過不同的餌料對大黃魚進行投喂效果不同。在大黃魚復健2 個月后，各組總脂肪酸含量組D＞組C＞組B＞組O＞組A，其中組B、C、D 顯著高于組A（P＜0.05）。飽和脂肪酸含量組D＞組B＞組O＞組C＞組A，組D 顯著高于組O、A、B、C（P＜0.05）。不飽和脂肪酸含量組C＞組D 組B＞組O＞組A，組C 顯著高于組B、A和組O（P＜0.05）。多不飽和脂肪酸含量組C＞組D＞組O＞組B＞組A，組C顯著高于組O、A、B（P＜0.05）。高不飽和脂肪酸、EPA+DHA 含量A、B、C 三組差異不顯著，但組O、D顯著高于組A、B、C餌料組。

2.3.2 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚腹部脂肪酸含量

通過投喂不同餌料復健的產(chǎn)后雌性大黃魚親魚腹部脂肪酸含量見表7 所示。在投喂不同的餌料對大黃魚進行復健2個月后，各組總脂肪酸含量組C＞組D＞組B＞組O＞組A，其中組D、組C顯著高于組A，但組O、B 和組A 之間無顯著性差異。飽和脂肪酸含量組B＞組C＞組D＞組O＞組A，其中組B 顯著高于組O、A（P＜0.05）。不飽和脂肪酸含量組C＞組O＞組D＞組B＞組A，其中組C、D、O無顯著性差異，顯著高于組A（P＜0.05）。多不飽和脂肪酸含量組O＞組C＞組D＞組B＞組A，其中組O 與組B、C、D 無顯著性差異（P＞0.05）。高不飽和脂肪酸含量組O＞組D＞組C＞組B＞組A，其中組O顯著高于其他4組，其他四組之間無顯著性差異（P＞0.05）。EPA+DHA含量組O＞組C＞組D＞組B＞組A，其中組O 顯著高于其他4 組（P＜0.05），其他四組之間無顯著性差異（P＞0.05）。

表5 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚腹部氨基酸含量比較(n=3，以鮮基計，%)

表6 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚背部脂肪酸含量比較(n=3，以鮮基計，%)

表7 產(chǎn)后復健雌性大黃魚親魚腹部脂肪酸含量比較(n=3，以鮮基計，%)

3 討論

3.1 不同餌料對產(chǎn)后大黃魚雌魚肌肉氨基酸的影響

水生動物的繁殖性能與餌料的蛋白質(zhì)水平具有密切關(guān)系[8-9]。Luo等[10]和孫瑞建[11]的研究表明隨著飼料中蛋白質(zhì)水平的升高，魚體蛋白質(zhì)會逐漸升高。本研究結(jié)果中，紅蝦、沙蠶、魚強、魚塊四種餌料中粗蛋白含量由多到少依次是魚強、魚塊、紅蝦、沙蠶，總氨基酸含量依次為魚強、紅蝦、魚塊、沙蠶；在營養(yǎng)復健2個月后，大黃魚背部的總氨基酸、非必需氨基酸含量組C＞組A＞組D＞組B，但差異不顯著，與吳雷明等[12]的研究結(jié)果基本相似。另結(jié)果表明，復健后各組大黃魚背部的總氨基酸、非必需氨基酸、必需氨基酸、呈味氨基酸結(jié)果相較于組O均不顯著，這與本試驗室先前研究結(jié)果親魚強化對大黃魚雌性親魚肌肉的必需氨基酸和氨基酸總含量影響不大的結(jié)果相一致[13]。此外本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，餌料中紅蝦、魚強和魚塊的天門冬氨酸、谷氨酸顯著高于沙蠶，沙蠶的蛋氨酸含量顯著低于其他3 組。在復健后，背部肌肉中的谷氨酸組C顯著高于其他3組，組A的蛋氨酸顯著高于組B、C、D；大黃魚腹部肌肉組A和組C的天門冬氨酸和谷氨酸顯著高于其他兩組，組A的蛋氨酸含量顯示高于組B、D，這表明餌料中的氨基酸組成差異可能是影響魚類肌肉氨基酸組成差異的原因[14]。但研究發(fā)現(xiàn)餌料中沙蠶的纈氨酸含量顯著低于魚強和魚塊，在復健后，大黃魚背部和腹部的肌肉中，組A、B、C、D的纈氨酸含量無顯著性差異，這可能與大黃魚的限制性氨基酸有關(guān)。郭全友等[15]的研究表明纈氨酸為大黃魚的第一限制性氨基酸，但也可能與大黃魚的養(yǎng)殖模式[16]、餌料營養(yǎng)配比[17]、餌料的適口性[18]、養(yǎng)殖階段[19]等相關(guān)，因此闡明氨基酸的吸收利用機制還需要更加科學精細的試驗。

3.2 不同餌料對產(chǎn)后大黃魚雌魚肌肉脂肪酸的影響

脂肪是在魚類機體代謝中的能源，是維持魚類正常生長、發(fā)育、繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，而飼料中的脂肪酸是影響魚類脂肪及脂肪酸的重要因子[20-21]。由研究結(jié)果可知四種餌料的總脂肪酸含量、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸含量、單不飽和脂肪酸含量、多不飽和脂肪酸含量、高不飽和脂肪酸含量以及EPA+DHA 含量魚強組＞魚塊組＞沙蠶組＞紅蝦組，其中魚強組和魚塊組顯著高于紅蝦組。在大黃魚復健2個月后，大黃魚背部總脂肪酸含量組D＞組C＞組B＞組A，腹部脂肪酸，組C＞組D＞組B＞組A，其中組D、C差異不顯著，但顯著高于組A（P＜0.05）。魚體肌肉的脂肪酸組成基本上符合餌料脂肪酸的組成[22]。這與陳家林等[23]的研究異育銀鯽肌肉脂肪酸受餌料脂肪酸正相關(guān)關(guān)系影響的結(jié)果相符。在本研究中發(fā)現(xiàn)，餌料中魚強組多不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶組和紅蝦組；在大黃魚復健后，大黃魚背部、腹部肌肉脂肪酸中的多不飽和脂肪酸組C＞組D＞組B＞組A，這與高堅等[24]、諶芳等[25]的研究結(jié)果相符，魚油可以顯著提高魚體中n-3系列脂肪酸的含量。此外在本研究發(fā)現(xiàn)，餌料中EPA+DHA含量魚強組高于魚塊組，顯著高于沙蠶組和紅蝦組。復健后，大黃魚背部肌肉中EPA+DHA 含量組D＞組C＞組B＞組A，其中組D 顯著高于其他3 組（P＜0.05），與原始對照組組O 無顯著差異，大黃魚腹部肌肉中EPA+DHA 含量組C＞組D＞組B＞組A，各組差異不顯著，但均顯著低于原始對照組O。產(chǎn)后大黃魚腹部肌肉脂肪酸顯著低于產(chǎn)前大黃魚腹部肌肉脂肪酸，此結(jié)果推測可能與大黃魚養(yǎng)殖階段及餌料脂肪酸均衡配比組成有關(guān)[26]，但具體的影響機制目前尚未有具體報道，可作為今后的研究方向。