何書平
【摘 要】目的:飲片廠采購甘草為研究對象,測定甘草苷、甘草酸銨含量。用高效液相色譜法測定甘草中甘草苷、甘草酸銨含量。方法:色譜柱為C18(250mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脫),檢測波長為237nm。結(jié)果:結(jié)果表明,甘草中甘草苷、甘草酸銨含量符合2015年版《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。
【關(guān)鍵詞】甘草;甘草苷;甘草酸銨;水分測定;含量測定;高效液相色譜法
【中圖分類號】R927.2【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019(2020)06--01
甘草為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根和根莖。性平味甘,歸心、肺、脾、胃經(jīng)。補(bǔ)脾益氣,清熱解毒,祛痰止咳,緩急止痛,調(diào)和諸藥[1]。甘草是一味傳統(tǒng)的中藥材,有“國老”之稱[2]?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載甘草具有主五臟六腑寒邪氣、堅(jiān)筋骨、長肌肉、倍氣力、金瘡腫、解毒之功效。甘草提取物主要活性成分有甘草皂苷、甘草酸、甘草次酸,甘草總黃酮、甘草苷及甘草多糖等[3]。甘草的藥理主要是抗炎抗菌[4]、抗心腦再灌注損傷[5]、氧化衰老[6]、抗腫瘤[7]、增強(qiáng)免疫[8]等,這些與甘草提取物活性成分的藥理作用密不可分。
1 實(shí)驗(yàn)材料:甘草粉末(過三號篩)。
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器:Aglient高效液相色譜儀、101-1-S-Ⅱ型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、稱量瓶、BS/BT系列電子天平
1.2 試劑:甘草苷對照品、甘草酸銨對照品、乙腈(色普純)、乙醇(分析純)、磷酸。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 水分測定 甘草水分測定用2015年版《中國藥典》0832水分測定法第二法(烘干法)[9],取供試品2-5g,平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中,厚度不超過5mm,精密稱定,開啟瓶蓋在100~105℃干燥5小時(shí),將瓶蓋蓋好,移置干燥器中,放冷30分鐘,精密稱定,再在上述溫度干燥1小時(shí),放冷,稱重,至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量,計(jì)算供試品中含水量(%)。
3.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):色譜柱為C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脫),檢測波長為237nm。
時(shí)間(分鐘) 流動(dòng)相A(%) 流動(dòng)相B(%)
0~8 19 81
8~35 19→50 81→50
35~36 50→100 50→0
36~40 100→19 0→81
對照品溶液的制備:取甘草苷對照品、甘草酸銨對照品適量,精密稱定,加70%乙醇分別制成每1ml含甘草苷20?g、甘草酸銨對照品0.2mg的溶液,即得(甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207)。供試品溶液的制備:取2份甘草粉末(過三號篩)約0.2g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇100ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHz)30分鐘,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,靜置,取上清液濾過,取續(xù)濾液,即得。
測定方法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10?l,注入液相色譜儀測定。
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1 水分測定結(jié)果
水分% 平均水分%
樣品1 6.6 6.7
樣品2 6.8
4.2 甘草苷對照品、甘草酸銨對照品色譜圖、甘草樣品色譜圖(圖1、2)
4.3 含量結(jié)果 測量對照品溶液和供試品溶液中待測物質(zhì)的峰面積,按下式計(jì)算含量:,見表1、表2、表3。
5 結(jié)論
本次實(shí)驗(yàn)對中藥飲片廠采購甘草對照2015年版《中國藥典》,用HPLC法對其進(jìn)行含量測定,按干燥品計(jì)算,含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50%、甘草酸銨(C42H62O16)不得少于2.0%。收購甘草符合藥典規(guī)定含量,控制該藥材的含量,保證飲片的質(zhì)量。
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