李曼曼 劉 永
1許昌市中醫(yī)院中西藥房,河南許昌 4610002惠州市九惠制藥股份有限公司技術研發(fā)部,廣東惠州 516007
黃芪是豆科植物黃芪的干燥根,屬于常用的中藥材,其中黃酮類、糖類、氨基酸類、皂苷類是其主要成分。臨床應用黃芪治療疾病時,普遍通過炮制的方法以降低藥物毒性、提高療效。研究[1]表明,不同的中藥炮制方法會導致中藥的成分含量產(chǎn)生差異,從而導致效用存在差別。因此,本研究采用炒黃芪、酒黃芪、生黃芪三種炮制方法,探究其對黃芪黃酮類、糖類成分的影響,現(xiàn)報道如下。
筆者選用的中藥黃芪,均為同一批次,且購買自同一家藥材公司。所需器材及藥品為:紫外線分光光度儀(上海天呈醫(yī)流科技股份有限公司,型號:721-110)、電子分析天平(美國梅特勒公司,精密度0.001 g)、高效液相色譜儀(上海費爾伯恩精密儀器有限公司,型號:26963);毛蕊異黃酮、芒柄花素、毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷、濃硫酸、苯酚、葡萄糖對照品、甲醛、甲酸、蒸餾水等,均購自上海純優(yōu)生物科技有限公司。
炒黃芪:取出300 g黃芪,使用文火翻炒黃芪,直至顏色轉為棕黃色,并晾干備用;酒黃芪:取出300 g黃芪,加入米酒60 ml攪拌,黃芪、米酒充分浸潤后,靜置1 h,并炒干備用;生黃芪:取出300 g黃芪,用40℃左右的溫水浸泡5 min,浸泡后用溫麻布覆蓋在黃芪上進行潤化,2 h后切成小片,并干燥至恒重,最后晾干備用。
①水溶性糖的提?。簭呐谥频母黝慄S芪中,分別取出100 g研磨成粗粉,放置于錐形瓶,加入30 ml的85%乙醇混合,混合充分后放置水浴鍋中水浴,溫度為50℃,時間60 min,水浴后,使用紗布過濾,并加熱去除乙醇,然后用蒸餾水稀釋至100 ml,吸取2 ml到25 ml的量瓶,加水至相應刻度備用;②還原性糖的提?。簭呐谥频母黝慄S芪中,分別取出100 g磨成粗粉,放置于圓底燒瓶,加入蒸餾水20 ml回流,并離心過濾殘渣,在殘渣中加入熱水洗滌3次,過濾液混合,加入Ba(OH)2、5% ZnSO4,直至無沉淀產(chǎn)生,過濾到容量瓶,定容到100 ml,再吸取1 ml到25 ml的量瓶,加水至相應刻度備用;③多糖的提?。簭呐谥频母黝慄S芪中,取出定量的黃芪磨成粗粉,加入10倍量蒸餾水回流60 min,并離心過濾殘渣,殘渣使用8倍量的水回流30 min,濾液混合備用;④取黃酮類對照品,進行精密稱重,加入甲醇后,移至50 ml容量瓶,定容后搖勻,獲得不同質(zhì)量濃度的毛蕊異黃酮、芒柄花素等對照樣品液。
①檢測不同炮制方法黃酮類成分的含量,包括毛蕊異黃酮、芒柄花素、毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷等的含量;②檢測不同炮制方法糖類成分的含量,包括水溶性糖、還原性糖、多糖等的含量。
炮制后,酒黃芪毛蕊異黃酮含量顯著高于生黃芪、炒黃芪(P<0.05);酒黃芪、生黃芪芒柄花素含量均顯著高于炒黃芪(P<0.05),其中酒黃芪與生黃芪比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。酒黃芪毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷含量顯著高于生黃芪、炒黃芪(P<0.05),其中炒黃芪含量最低;酒黃芪、生黃芪芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量顯著高于炒黃芪(P<0.05),其中酒黃芪與生黃芪比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。
成分酒黃芪炒黃芪生黃芪毛蕊異黃酮158.06±6.30*△106.30±8.44104.32±10.39芒柄花素77.90±8.32△41.35±5.33*72.03±7.01△毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷469.32±32.01*△315.54±20.01*403.32±30.20△芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷148.02±10.33△118.36±3.01*147.30±10.39△
與生黃芪比較*P<0.05;與炒黃芪比較△P<0.05
炒黃芪、酒黃芪水溶性糖含量均顯著高于生黃芪(P<0.05),其中炒黃芪、酒黃芪水溶性糖含量比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);炒黃芪還原性糖含量顯著高于酒黃芪、生黃芪(P<0.05);炒黃芪、酒黃芪多糖含量均顯著高于生黃芪(P<0.05),其中炒黃芪、酒黃芪多糖含量比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。
表2 不同炮制方法黃芪糖類成分含量比較
與生黃芪比較*P<0.05;與炒黃芪比較△P<0.05
中藥黃芪具有補氣固表、利尿、托毒排膿、生肌的功效,屬補虛藥下屬分類的補氣藥,臨床常用于治療氣短心悸、乏力虛脫、自汗浮腫、久瀉脫肛、子宮脫垂、癰疽難潰、瘡口難愈、支氣管哮喘、乙型肝炎、慢性腎炎等病癥。相關研究[2]顯示,不同的炮制方法對黃芪的功效影響較大,因此,需要了解不同炮制方法的效用差別。臨床中,炒黃芪側重于益氣健脾,主治食欲不振、便溏氣虛;酒黃芪側重于瀉火解毒、清熱燥濕、止血,主治肺熱咯血、咳嗽目赤;生黃芪側重于固表止汗,主治自汗浮腫、心悸體虛。本研究結果表明,酒黃芪毛蕊異黃酮含量明顯高于生黃芪、炒黃芪,且酒黃芪、生黃芪芒柄花素含量高于炒黃芪;酒黃芪毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷含量高于生黃芪、炒黃芪,而酒黃芪、生黃芪芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量高于炒黃芪;表明酒黃芪的炮制方法所保留的黃酮類成分較多,多于炒黃芪、生黃芪,并且其含有較多的毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷,這與李利明[3]研究結果一致。黃芪中的黃酮類成分具有抗氧化、抗病毒、抗癌、降血糖、神經(jīng)保護、骨骼保護、改善疲勞等作用[4],對于治療心肌缺血、心力衰竭等病癥具有重要作用[5]。此外,炒黃芪、酒黃芪水溶性糖含量高于生黃芪,炒黃芪還原性糖含量高于酒黃芪、生黃芪,炒黃芪、酒黃芪多糖含量高于生黃芪,表明炒黃芪最大限度地保留了黃芪的糖類成分,且多于酒黃芪、生黃芪,這與余文強[6]的研究結果一致。糖類成分屬于黃芪中的重要活性部分,具有抗病毒、抗腫瘤以及提高免疫力的功效,對于調(diào)節(jié)機體免疫力具有重要作用[7]。然而,江國榮等[8]研究結果表明,生黃芪的水溶性糖含量,酒黃芪的多糖成分,均要高于炒黃芪,與本研究結果不一致。因此,需要進一步研究這三種炮制方法對黃芪糖類成分的影響。
綜上所述,不同的炮制方法,對中藥黃芪的黃酮類及糖類成分影響較大,因此,須根據(jù)臨床具體需要選擇適宜的炮制方法。