劉春來(lái),聶思橋,劉照清,傅 強(qiáng)*,付啟明,孫 炯
(1.湖南省農(nóng)藥檢定所,湖南 長(zhǎng)沙 410005;2.湖南文譜檢測(cè)技術(shù)研究有限公司,湖南 長(zhǎng)沙 410137)
植保無(wú)人機(jī)技術(shù)是我國(guó)農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化的重要組成部分,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用比重不斷增大,隨著農(nóng)業(yè)規(guī)模化、規(guī)范化的發(fā)展,植保無(wú)人機(jī)的效果、效率和效益顯著提升。近幾年,植保無(wú)人機(jī)呈現(xiàn)爆發(fā)性增長(zhǎng),目前關(guān)于無(wú)人機(jī)的研究主要集中在設(shè)計(jì)參數(shù)[1-3]、防治效果[4-5]、農(nóng)藥減量方面[6-10]的研究,然而,采用植保無(wú)人機(jī)進(jìn)行病蟲(chóng)害防治時(shí),兌水量少,藥液濃度高,農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留量水平未見(jiàn)其研究。
本試驗(yàn)通過(guò)采用植保無(wú)人機(jī)和背負(fù)式噴霧器,按照GAP進(jìn)行田間殘留試驗(yàn),對(duì)比兩種不同施藥器械下吡蚜酮在水稻樣品中的最終殘留量,為農(nóng)作物采用植保無(wú)人機(jī)進(jìn)行病蟲(chóng)害防治時(shí),農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留量風(fēng)險(xiǎn)提供科學(xué)數(shù)據(jù),以期為植保無(wú)人機(jī)在生產(chǎn)實(shí)際上的科學(xué)、合理使用提供重要依據(jù)。
2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器 本試驗(yàn)所用農(nóng)藥為25%吡蚜酮懸浮劑,吡蚜酮標(biāo)準(zhǔn)品(純度98.5%),乙腈(色譜純),乙腈(分析純),甲酸(色譜純),氯化鈉(分析純)。
Agilent1290Ⅱ-6470高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀( LC-MS /MS) 及Agilent -C18色譜柱(1.8μm 2.1×50mm),TP-1000A電子天平(d=0.01g)、ATY224電子天平(d=0.1mg)2500T型數(shù)控超聲波清洗器。
2.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)于2019年9月下旬至10月上旬在湖南省益陽(yáng)市沅江市共華鎮(zhèn)和裕村進(jìn)行,試驗(yàn)共計(jì)3個(gè)小區(qū),對(duì)照小區(qū)和背負(fù)式噴霧器施藥小區(qū)面積均為100m2,無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)面積為6 667m2,各小區(qū)間設(shè)有保護(hù)帶。選用25%吡蚜酮懸浮劑按照制劑用量28mL/667m2進(jìn)行莖葉噴霧1次,背負(fù)式噴霧器施藥按用水量45L/667m2兌水噴霧,無(wú)人機(jī)施藥按用水量0.9L/667m2兌水噴霧,植保無(wú)人機(jī)施藥由專業(yè)的植保無(wú)人機(jī)飛手進(jìn)行操控噴霧,背負(fù)式噴霧器施藥根據(jù)NY/T788-2018《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[11]和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2570號(hào)公告《農(nóng)藥登記試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求進(jìn)行噴霧施藥。
2.2 樣品采集與制備 在施藥后2h、14d采集水稻植株和稻谷樣品。因無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)面積有10×667m2。將該小區(qū)平均分成9個(gè)小區(qū),在對(duì)角線的5個(gè)小區(qū)內(nèi)采集樣品。每個(gè)小區(qū)的采樣方式和采樣量同對(duì)照小區(qū)和背負(fù)式噴霧器噴霧小區(qū)。
稻谷:采用對(duì)角線或棋盤(pán)法采樣,每個(gè)小區(qū)采集2個(gè)獨(dú)立樣品,每個(gè)樣品采集≥12個(gè)點(diǎn),每個(gè)樣品重量≥1kg。小區(qū)的邊行和每行距離兩端0.5m內(nèi)不采樣。
水稻植株:按對(duì)角線采樣或棋盤(pán)法采樣,每個(gè)處理小區(qū)采集2個(gè)獨(dú)立樣品,采集土表以上的生長(zhǎng)正常的全株(去根的全株)12株,取樣量≥0.5kg,將水稻植株剪成1cm以下的小段,容器內(nèi)外各加上標(biāo)簽,保存在-18℃冰箱中待測(cè)。
各樣品加入適量干冰,用搗碎機(jī)將其粉碎,分別取200g 2份,分別裝入封口樣品容器中,容器內(nèi)外各加上標(biāo)簽,保存在-18℃冰箱中待測(cè)。
2.3 殘留檢測(cè)分析方法
2.3.1 樣品前處理 稱取稻谷5g(水稻植株2.5g)于100mL的具塞三角瓶中,加入30mL乙腈,震蕩提取30min,過(guò)0.22μm有機(jī)相濾膜至進(jìn)樣瓶中,待LC-MS/MS檢測(cè)。
2.3.2 儀器條件 流動(dòng)相:0.1%甲酸乙腈(A)和0.1%甲酸水溶液(B),流速為0.3mL/min;梯度洗脫程序:55%A保持2min,在2.01min由55%A直接增加至95%A,保持2min,隨后,在4.01min由95%A直接回落至55%A,保持2min;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:2μL;
質(zhì)譜條件:多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM) 模式掃描,電噴霧正離子源( ESI+),離子噴霧電壓:3 500V,霧化氣壓力:45psi,干燥氣溫度:300℃,干燥氣流速:5L/min,鞘氣溫度:250℃,鞘氣流速:11L/min。具體質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)(表1)。
表1 吡蚜酮的串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)
2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取0.025 6g吡蚜酮標(biāo)準(zhǔn)品,用色譜乙腈溶解,定容至50mL容量瓶中,制成500mg/L的母液。再用色譜純乙腈稀釋母液,逐級(jí)配置0.000 5、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2mg/L濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3.1 方法學(xué)驗(yàn)證
3.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 將吡蚜酮母液用乙腈稀釋為0.000 5、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2mg/L 系列標(biāo)液,在上述條件下進(jìn)行檢測(cè),橫坐標(biāo)X為濃度(mg/L),縱坐標(biāo)Y為峰面積,標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=858 187.6X-4.3,R2為0.999 6。
3.1.2 添加回收率 將不同濃度的吡蚜酮標(biāo)液分別加入到水稻植株和稻谷空白樣品中,按上述方法進(jìn)行樣品的提取和凈化。當(dāng)?shù)竟忍砑铀?.01、0.1、1 mg/kg 和水稻植株添加水平0.02、0.2、2 mg/kg時(shí),吡蚜酮在水稻植株和稻谷中的回收率在72%~104%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4%~11%之間 (表2)。吡蚜酮在水稻植株和稻谷中的定量限分別為0.02和0.01mg/kg。
表2 添加回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果(n=5)
3.2 水稻植株和稻谷中吡蚜酮最終殘留量 通過(guò)對(duì)植保無(wú)人機(jī)和背負(fù)式噴霧器的噴速、飛行速度(行走速度)進(jìn)行校準(zhǔn),植保無(wú)人機(jī)施藥和背負(fù)式噴霧器施藥具體參數(shù)(表3、表4)。
表3 植保無(wú)人機(jī)施藥參數(shù)
表4 背負(fù)式噴霧器施藥參數(shù)
制劑用量按照28mL/667m2,植保無(wú)人機(jī)施藥按照用水量0.9L/667m2配制藥液,背負(fù)式噴霧器施藥按照用水量45L/667m2配制藥液。施藥完畢后,植保無(wú)人機(jī)最終用水量為8.80L,背負(fù)式噴霧器最終用水量為6.62L。按照實(shí)際用水量推算,植保無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)實(shí)際用藥量為27.38mL/667m2,背負(fù)式噴霧器施藥小區(qū)實(shí)際用藥量為27.47mL/667m2。
采用兩種不同施藥器械施藥,在施藥后2h和施藥后14d(水稻成熟)時(shí),采集水稻樣品,得出水稻植株和稻谷中吡蚜酮的最終殘留數(shù)據(jù)結(jié)果(表5、表6)。
表5 吡蚜酮在稻谷上的規(guī)范殘留試驗(yàn)結(jié)果
表6 吡蚜酮在植株上的規(guī)范殘留試驗(yàn)結(jié)果
從表中數(shù)據(jù)可以得出,在同一施藥劑量下,施藥后2h和施藥后14d采集的樣品中吡蚜酮?dú)埩袅烤@示為:無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)樣品>背負(fù)式噴霧器施藥小區(qū)樣品。其中施藥后2h,無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)樣品是背負(fù)式噴霧器施藥小區(qū)樣品中吡蚜酮?dú)埩袅考s1.4倍,但施藥后14d,無(wú)人機(jī)施藥小區(qū)稻谷殘留量是背負(fù)式噴霧器施藥小區(qū)的2.8倍,植株是3.7倍。我國(guó)吡蚜酮在稻谷中的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)為1mg/kg[12],此試驗(yàn)中,無(wú)人機(jī)施藥1次,稻谷中吡蚜酮的殘留量為0.0391mg/kg,遠(yuǎn)低于我國(guó)制定的限量標(biāo)準(zhǔn)。若增加施藥次數(shù)或者其他限量標(biāo)準(zhǔn)低的農(nóng)藥采用無(wú)人機(jī)施藥,是否會(huì)產(chǎn)生農(nóng)產(chǎn)品中殘留量超標(biāo)還需進(jìn)一步研究。蒙艷華[13]等研究無(wú)人機(jī)施藥在小麥上的消解動(dòng)態(tài)結(jié)果表明,即使在減量20%藥量的情況下,其原始沉積量依然顯著比背負(fù)式噴霧器的高。
楊潤(rùn)芝[6]等對(duì)水稻農(nóng)藥減量技術(shù)進(jìn)行了探索,通過(guò)植保無(wú)人機(jī)施藥的統(tǒng)防統(tǒng)治實(shí)施,全年在農(nóng)藥總量減少39.5%的情況下,主要病蟲(chóng)害防效達(dá)到或略超過(guò)常規(guī)用藥防效水平。彭志清[7]等研究了無(wú)人機(jī)施藥對(duì)水稻病蟲(chóng)害防效的影響,結(jié)果表明農(nóng)藥減量20%可以達(dá)到常規(guī)用藥的防效水平。還有研究玉米田、小麥田采用無(wú)人機(jī)施藥情況[8-10],均表明減量均能達(dá)到防治效果。
針對(duì)無(wú)人機(jī)施藥后農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量研究較少,從以上結(jié)果表明,采用無(wú)人機(jī)施藥能達(dá)到農(nóng)藥減量使用的效果,但也存在農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量增高的風(fēng)險(xiǎn)。因此在采用植保無(wú)人機(jī)施藥防治病蟲(chóng)害時(shí),需關(guān)注農(nóng)產(chǎn)品中殘留量的變化。