李艷婷，徐莉娜，郭霄飛，朱 敏，南曉潔，李銀生，郭 尚*

(1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 食用菌研究所，山西 太原 030031；2.山西省太原市陽(yáng)曲縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山西 太原 030100)

【研究意義】樺褐孔菌，Inonotusobliquus(Fr.)Pilat，屬擔(dān)子菌亞門(mén)(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymeno-mycetes)、銹革孔菌目(Hymenochaetales)、銹革菌科(Hymenochaetaceae)、褐臥孔菌屬(Inonotus) (=纖孔菌屬)，異名斜纖孔菌、斜生纖孔菌、樺癌孔菌、白樺茸、茶卡、和薔甘等[1]。樺褐孔菌受到全世界的廣泛關(guān)注是從1968年前蘇聯(lián)諾貝爾文學(xué)獎(jiǎng)獲得者Aleksandr Isayevich的小說(shuō)《癌病房Rakovy Kovpus》而開(kāi)始的[2]。近年來(lái)，樺褐孔菌作為一種珍貴藥用真菌，因具有調(diào)節(jié)血糖血脂、抗腫瘤、抗氧化、調(diào)節(jié)、抗炎、保肝、調(diào)節(jié)免疫等作用[3]，逐漸引起越來(lái)越多國(guó)內(nèi)學(xué)者的關(guān)注?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】樺褐孔菌主要分布在北半球北緯40°～50°的地區(qū)，如北美(北部)、芬蘭、波蘭、俄羅斯、日本等國(guó)家和地區(qū)[4-5]。在我國(guó)，樺褐孔菌主要分布在位于黑龍江、吉林和內(nèi)蒙古自治區(qū)的大興安嶺、小興安嶺和長(zhǎng)白山地區(qū)[6-11]。山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所郭尚勞模創(chuàng)新工作室在山西省方山縣的關(guān)帝山(呂梁山南段)也發(fā)現(xiàn)有大量的樺褐孔菌分布，當(dāng)?shù)剡€成立有專門(mén)的公司進(jìn)行樺褐孔菌的粗加工及銷售。根據(jù)戴玉成和范宇光[12-13]的調(diào)查，樺褐孔菌在我國(guó)屬于稀有和瀕危類型。樺褐孔菌的野生資源匱乏，人工栽培雖有成功報(bào)道，但尚未實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)[14-18]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】本文首次報(bào)道了山西樺褐孔菌的相關(guān)研究。通過(guò)對(duì)采自山西呂梁山南段的樺褐孔菌進(jìn)行形態(tài)特征分析、分子生物學(xué)鑒定、品質(zhì)鑒定，同時(shí)還選用了山西常見(jiàn)的小米、小麥、藜麥、黃豆、大豆、蕎麥、燕麥、玉米、薏米和大米共十種雜糧谷物作為發(fā)酵基質(zhì)，對(duì)采自山西的樺褐孔菌分離得到的菌絲體進(jìn)行谷物固態(tài)發(fā)酵，并明確樺褐孔菌在這十種雜糧谷物中的發(fā)酵特點(diǎn)?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】通過(guò)了解其生長(zhǎng)特性以獲得最優(yōu)質(zhì)的發(fā)酵產(chǎn)物，為這一特殊的野生資源的開(kāi)發(fā)與利用提供基礎(chǔ)和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

菌株來(lái)源：本課題組在2017年10月于山西呂梁山脈的關(guān)帝山(北緯37.5°，東經(jīng)111.2°)采集到樺褐孔菌，標(biāo)本編號(hào)IOSF373816。將采集的樺褐孔菌菌核進(jìn)行組織分離得到純菌株，保存在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所菌種庫(kù)。

品質(zhì)鑒定試劑：葡萄糖，Agar，酵母膏，HNO3，H2O2，KH2PO4，K2HPO4，MgSO4·7H2O，元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg/L)，超純水、蒸餾水、無(wú)水乙醇、苯酚、濃硫酸、過(guò)硫酸鉀等，均為分析化學(xué)純。

固態(tài)發(fā)酵材料：山西產(chǎn)小米、小麥、黃豆、玉米、薏米、燕麥、藜麥、蕎麥、大豆和大米，要求顆粒飽滿、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)蟲(chóng)蛀。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 分離純化 選取新鮮的樺褐孔菌菌核，去除表面雜質(zhì)，75 %酒精清洗其外表面3 次，置于無(wú)菌燒杯中待用。PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1000 mL，pH自然[19]。采用組織分離法進(jìn)行分離。在無(wú)菌條件下，切取5 mm×5 mm的菌核組織塊接入裝有PDA培養(yǎng)基的試管內(nèi)，置于25 ℃[12]恒溫箱中倒置培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中主義觀察，如有污染及時(shí)檢出。待菌絲長(zhǎng)滿試管斜面后，置4 ℃冰箱保存待用。

1.2.2 形態(tài)鑒定與分子生物學(xué)鑒定 肉眼觀察標(biāo)本的顏色、質(zhì)地、形狀、生長(zhǎng)年限、平伏或有菌蓋，菌蓋是否有毛或環(huán)帶等特征，然后用標(biāo)尺測(cè)量子實(shí)體的長(zhǎng)度、寬度和厚度。

將純菌株培養(yǎng)，CTAB法提取菌絲DNA；ITS片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。引物序列如下：ITS 1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ )ITS 4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’ )。 PCR反應(yīng)體系(25 μl)：10×PCR buffer 2.5 μl、TaqDNA 酶0.3 μl、Mg2+(25 mmol/L)2 μl、dNTP 0.3 μl、引物ITS 1/ITS 4各0.7 μl、DNA模板1 μl、ddH2O 17.5 μl。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性4 min；94 ℃變性1 min；54 ℃退火1 min；72 ℃延伸1 min；72 ℃延伸10 min；共35個(gè)循環(huán)。然后再經(jīng)過(guò)PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳、PCR產(chǎn)物的回收、PCR產(chǎn)物序列測(cè)定，用NCBI Blast程序?qū)⑵唇雍蟮男蛄形募cNCBI ribosomal RNA sequence(Bacteriaand Archaea)數(shù)據(jù)庫(kù)中的數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)，與待測(cè)菌種序列相似性最大的菌種，即為鑒定結(jié)果[20-21]。

1.2.3 品質(zhì)鑒定 粗多糖：苯酚-硫酸法[22]；β-葡聚糖：GB5009.5-2010第一法[23]；抗氧化活性：粗多糖清除DPPH自由基能力[24]；粗蛋白：凱氏定氮法[25]；三萜類化合物：參照DB44/T 496-2008[25]；總黃酮：紫外分光光度法[26]；微量元素：ICP-AES法[27]。

1.2.4 固態(tài)發(fā)酵試驗(yàn) ①谷物培養(yǎng)基制備。浸煮：所需谷物稱量，去除雜物，浸煮各谷物，并撈出攤于地面上晾干(水分含量約40 %)。配料分裝與滅菌：將浸煮好的谷物分裝至玻璃瓶中，每瓶濕重約150 g，121 ℃高壓滅菌2 h。 ②接種。滅菌的谷物培養(yǎng)基放涼后，按無(wú)菌操作要求，挑取帶PDA培養(yǎng)基的的斜面菌種(0.5 cm×0.5 cm)，接至谷物培養(yǎng)基中央。③培養(yǎng)與觀察。 25 ℃黑暗培養(yǎng)[12]。發(fā)酵過(guò)程中，定期觀察記錄菌絲生長(zhǎng)情況。并每隔7 d測(cè)量樺褐孔菌菌絲在瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的長(zhǎng)度。

2 結(jié)果與分析

2.1 樺褐孔菌形態(tài)特征

子實(shí)體呈塊狀，在樹(shù)干上形成大小不等的團(tuán)狀物，菌核。菌核呈瘤狀物、黑褐色或黑色，有不規(guī)則溝痕，內(nèi)部呈棕色或黃褐色，直徑為20～30 cm，表面很硬，干時(shí)脆。菌肉木柱質(zhì)，有模糊不清的環(huán)紋，淡黃色。

圖1 分離菌株的ITS序列Fig.1 ITS sequences of isolated strain

2.2 樺褐孔菌分子生物學(xué)鑒定

將測(cè)序獲得的ITS序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)收錄序列(NCBI No. MH150820.1)進(jìn)行比對(duì)分析，證明兩者為同屬同種，證明本試驗(yàn)所使用的菌種準(zhǔn)確無(wú)誤，保證材料的真實(shí)性(圖1)。

2.3 品質(zhì)鑒定

呂梁山樺褐孔菌菌核多糖含量極高，達(dá)到4.01 g/100g，其中的β-葡聚糖含量為6.25 mg/g；蛋白質(zhì)含量2.82 g/100g；三萜類化合物0.74 %，黃酮含量4.9 mg/100g ，DPPH自由基清除抗氧化活性為93.90 %。有益礦物元素從高到低為K、Mg、Ca、Fe、Mn、Na、Zn，含量依次為40 532.4、2924.0、2824.2、1200.8、164.3、127、116.0 mg/kg。

2.4 樺褐孔菌固態(tài)發(fā)酵

2.4.1 樺褐孔菌在不同谷物培養(yǎng)基質(zhì)上的發(fā)酵情況 樺褐孔菌在這十種谷物基質(zhì)中均能發(fā)酵(表1)，萌發(fā)時(shí)間相同，都為1 d；在燕麥和薏米基質(zhì)中發(fā)酵最快，菌絲生長(zhǎng)速度分別為3.02和2.39 mm·d-1，且菌絲濃密程度都是較密，菌絲均為潔白(圖2)；黃豆和大米中發(fā)酵速度次之，其生長(zhǎng)速度菌在2 mm·d-1左右，無(wú)顯著性差異，但大米中的樺褐孔菌菌絲致密程度欠佳且顏色發(fā)黃；在小麥和小米中菌絲生長(zhǎng)速度分別為1.64和1.79 mm·d-1，小麥中的菌絲濃密潔白，但小米中的菌絲體顏色發(fā)黃且濃密程度與小麥相比欠佳。

在大豆中生長(zhǎng)雖慢，菌絲生長(zhǎng)速度為1.09 mm·d-1，但菌絲非常濃密，顏色潔白；而在藜麥和蕎麥基質(zhì)中，發(fā)酵初期菌絲比較濃密，顏色呈潔白，而到發(fā)酵后期則菌絲呈現(xiàn)黃色。樺褐孔菌在玉米中的發(fā)酵表現(xiàn)最為不佳，不僅生長(zhǎng)慢且菌絲稀疏，全程菌絲發(fā)黃。

表1 樺褐孔菌在10種谷物培養(yǎng)基中的發(fā)酵情況Table 1 Fermentation of Inonotus obliquus in 10 grain media

注：+++表示菌絲濃密，++表示菌絲較密，+表示菌絲稀疏；同列不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。

Note: Mycelium apparent density was classified as +++ (= dense), ++ (= soft), + (= faint); Values in the same column with different superscripts are significantly different (P<0.05).

圖2 樺褐孔菌在各培養(yǎng)基質(zhì)上的發(fā)酵情況Fig.2 Growth of Inonotus obliquus at the different stages of grain fermentation

在發(fā)酵試驗(yàn)中，發(fā)酵滿瓶時(shí)間最短的是燕麥，僅需5 d即可完成；薏米和大米需要7周；小麥、玉米、黃豆和小米次之，為8周；蕎麥和大豆基質(zhì)中發(fā)酵時(shí)間是10周；藜麥完成發(fā)酵時(shí)間最長(zhǎng)，長(zhǎng)達(dá)到15周時(shí)間，并且由于發(fā)酵時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，菌絲已發(fā)黃老化。

2.4.2 樺褐孔菌谷物發(fā)酵過(guò)程中不同階段的菌絲生長(zhǎng)量 如圖3所示，樺褐孔菌在十種谷物發(fā)酵過(guò)程中的不同階段，其菌絲生長(zhǎng)趨勢(shì)基本一致，發(fā)酵菌絲在接種后2～4周內(nèi)長(zhǎng)滿基質(zhì)上表面并開(kāi)始縱向向下生長(zhǎng)，其中菌絲蓋面時(shí)間為2周的是薏米、大米和小米，菌絲蓋面時(shí)間為3周的是小麥、玉米、黃豆、藜麥和燕麥，而在大豆和蕎麥基質(zhì)中的菌絲蓋面時(shí)間分別為4和5周，從第5和6周才菌絲才開(kāi)始向下縱向生長(zhǎng)。

在薏米、大米和小米中3種培養(yǎng)基中，前3周的菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度分別為58.5、47.8、58.3 mm，薏米和大米培養(yǎng)基中7周發(fā)酵完成，小米培養(yǎng)基中8周完成發(fā)酵。綜合計(jì)算，樺褐孔菌在薏米和小米固態(tài)發(fā)酵過(guò)程中前五周菌絲的生長(zhǎng)長(zhǎng)度分別為95.1和84.1 mm，分別占到總量的95.1 %和87.9 %；大米基質(zhì)中，發(fā)酵前5周菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度是99.3 mm，占到總量的98.9 %。

在燕麥、小麥、黃豆3種培養(yǎng)基中，前4周的菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度分別為58.5、47.8、58.3 mm，小麥和黃豆培養(yǎng)基中8周發(fā)酵完成，而燕麥中僅需要5周時(shí)間。燕麥在第5周的菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度僅有3.1 mm，前4周的菌絲生長(zhǎng)量占到總生長(zhǎng)量的96.8 %；在小麥培養(yǎng)基中，第6、7、8周的菌絲生長(zhǎng)量分別為9、13.5、10 mm；在黃豆培養(yǎng)基中，發(fā)酵完成時(shí)間為7周，在第7和8周的菌絲生長(zhǎng)量分別為5.3、1.3 mm，因此，前6周的菌絲生長(zhǎng)量占到總生量的93.1 %和98.6 %。

在玉米基質(zhì)中，8周完成發(fā)酵。前3周其菌絲生長(zhǎng)量依次降低，分別是9.6、8.3和6.7 mm，到第4周時(shí)達(dá)到峰值37.8 mm，隨后又依次降低，到第8周時(shí)菌絲生長(zhǎng)量只有5.75 mm，因此，樺褐孔菌在前7周的菌絲生長(zhǎng)量占到了總量的94.5 %。

在大豆和蕎麥培養(yǎng)基中，均為10周發(fā)酵完成。大豆培養(yǎng)基中前5周的菌絲生長(zhǎng)量為49.8 mm，而6周以后每周的生長(zhǎng)量分別為8、4.9、4.1和3 mm，分別占到了總生長(zhǎng)量的10.2 %、6.22 %、5.2 %和3.8 %；蕎麥培養(yǎng)基中前5周菌絲生長(zhǎng)量依次降低，在第6周達(dá)到高峰值，為46.798 mm，而后又依次降低，在第9周和第10周的菌絲生長(zhǎng)量分別降到了3.14和3.28 mm，分別占到了菌絲總生長(zhǎng)量的3.17 %和3.31 %。

在藜麥培養(yǎng)基中，樺褐孔菌15周才能完成發(fā)酵。前3周的菌絲生長(zhǎng)量較小，只有15.3 mm，在第4周菌絲生長(zhǎng)量達(dá)到峰值，為26.86 mm，隨后幾周一直保持在5 mm左右(第6周例外，為11 mm)，前6周菌絲生長(zhǎng)量占總量的61.4 %，前8周菌絲生長(zhǎng)量占總量的72.6 %，直到第15周發(fā)酵即將完成時(shí)，菌絲生長(zhǎng)量降到了3 mm，達(dá)到最低值，占到菌絲總量的3.1 %，綜合來(lái)看，后9周的菌絲生長(zhǎng)量占到總量的38.6 %，而后7周僅占到27.4 %。

3 討 論

樺褐孔菌是一種藥用價(jià)值很高的、含有很多特殊功能成分的多年生大型真菌，可用于治療各種消化道癌癥、降血糖、防治艾滋病、抗衰老、降血脂、降血壓，還能夠改善過(guò)敏體質(zhì)，增強(qiáng)免疫力[28]，目前對(duì)樺褐孔菌的生物活性成分以及功能效用的研究較多[12]。而對(duì)于食品應(yīng)用領(lǐng)域的深度開(kāi)發(fā)利用較少。雖然有一些例如樺褐孔菌多糖保鮮劑，樺褐孔菌的中藥渣固體發(fā)酵，保健飲料研制，多糖口服液等，但是這些報(bào)道多數(shù)是關(guān)于樺褐孔菌的生物活性成分的研究，將樺褐孔菌的功能成分與風(fēng)味物質(zhì)經(jīng)過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)，融合制成具有人們喜歡的風(fēng)味，同時(shí)又具有特效功能的食品原料，定會(huì)為健康飲食生活帶來(lái)更好的前景。

圖3 樺褐孔菌谷物發(fā)酵過(guò)程中不同階段的生長(zhǎng)情況Fig.3 Growth of Inonotus obliquus at the different stages of grain fermentation

樺褐孔菌主要集中分布在我國(guó)黑龍江、內(nèi)蒙古和吉林地區(qū)的大興安嶺、小興安嶺和長(zhǎng)白山。潘學(xué)仁等1996年于大興安嶺阿里河林區(qū)進(jìn)行了森林真菌資源調(diào)查，在活樺樹(shù)干上發(fā)現(xiàn)樺褐孔菌[23]。畢湘虹等2003-2005年從生態(tài)學(xué)角度對(duì)黑龍江省小興安嶺天然紅松林林內(nèi)的大型真菌進(jìn)行了較全面的調(diào)查和研究，發(fā)現(xiàn)了在豐林國(guó)家自然保護(hù)區(qū)、涼水自然保護(hù)區(qū)和大海林林業(yè)局的紅松闊葉混交林中有數(shù)量較多的樺褐孔菌，而紅松云冷杉針葉混交林中則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)[24]。張躍華等從2003-2008年對(duì)位于黑龍江省東部地區(qū)小興安嶺南麓的大亮子河國(guó)家森林公園和臨近的黑金河和腰營(yíng)林場(chǎng)的野生大型經(jīng)濟(jì)真菌資源進(jìn)行了全面、系統(tǒng)的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)在紅松闊葉混交林中同樣也存在數(shù)量較多的樺褐孔菌，而紅松云冷杉針葉混交林中則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)[25]。孫亞紅等在地處大興安嶺北段的內(nèi)蒙古根河市也發(fā)現(xiàn)了樺褐孔菌分布[26]。張春鳳等在黑龍江省和吉林省的汪清、延吉、長(zhǎng)白山、敦化都采集到了樺褐孔菌[27]。趙俊[12]等在1997年考察長(zhǎng)白山木腐菌時(shí)發(fā)現(xiàn)，樺褐孔菌在長(zhǎng)白山區(qū)只發(fā)生在海拔較高的活樺樹(shù)上，特別是成熟樹(shù)上。

近年來(lái)，本團(tuán)隊(duì)在山西省關(guān)帝山區(qū)(北緯37.5°，東經(jīng)111.2°)的樺樹(shù)上發(fā)現(xiàn)了樺褐孔菌(NCBI登錄號(hào)MH150820.1)，是目前發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)在最南地區(qū)的種類。在本研究中，通過(guò)對(duì)采集自該地區(qū)的樺褐孔菌進(jìn)行形態(tài)特征和環(huán)境條件的進(jìn)行了分析，與大興安嶺的樺褐孔菌相比，形態(tài)特征相似，環(huán)境條件差異較大。通過(guò)測(cè)定山西樺褐孔菌的一些營(yíng)養(yǎng)成分和化學(xué)成分含量等，發(fā)現(xiàn)多糖含量達(dá)4.01 g/100g，與大興安嶺的樺褐孔菌相比，超過(guò)其73.59 %，蛋白質(zhì)含量為2.82 g/100g，低于大興安嶺樺褐孔菌；山西樺褐孔菌富含多種無(wú)機(jī)礦質(zhì)元素，包括K、Mg、Ca、Fe、Mn、Na、Zn等20余種，其中K含量為40 532.4 mg/kg ，超過(guò)大興安嶺的樺褐孔菌93.1 %?？梢?jiàn)采自山西呂梁山脈關(guān)帝山區(qū)的樺褐孔菌是多糖含量與鉀含量極高的一個(gè)種類。通過(guò)組織分離得到了試驗(yàn)用山西樺褐孔菌的純菌株，經(jīng)分析其ITS序列，并進(jìn)行了比對(duì)，相似性結(jié)果為100 %，證明為同種，保證了下一步樺褐孔菌谷物發(fā)酵使用菌種的準(zhǔn)確性。

樺褐孔菌屬稀有和瀕危物種，野生資源極度匱乏，人工栽培雖有成功報(bào)道，但尚未實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)[6-10]。樺褐孔菌具有重要的藥用功能，其發(fā)酵產(chǎn)物也具有多種保健作用，如抗腫瘤作用，抗氧化作用，降血糖作用，免疫調(diào)節(jié)作用等[29-34]，因此，采用樺褐孔菌菌絲體代替其菌核進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用，不僅可以有效利用其功能成分，還能達(dá)到降低生產(chǎn)成本、減少野生資源破壞的效果。

谷物營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，深受人們喜愛(ài)。山西省小雜糧資源品種豐富、產(chǎn)品品質(zhì)上乘、種植面積大且種類齊全，在國(guó)內(nèi)外享有“小雜糧王國(guó)”之稱，并以其獨(dú)特的風(fēng)味和營(yíng)養(yǎng)保健功能備受現(xiàn)代人青睞。采用絲狀真菌發(fā)酵谷物，可以提高其營(yíng)養(yǎng)成分含量。通過(guò)對(duì)山西樺褐孔菌菌絲體在山西部分特色雜糧谷物中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，利用培養(yǎng)過(guò)程中真菌菌絲的發(fā)酵作用平衡雜糧谷物的營(yíng)養(yǎng)成分，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)過(guò)烘干與粉碎，其中不僅包含有雜糧谷物原有的豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和菌絲體的功能性成分，還含有菌絲體通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生的多種酶類和代謝產(chǎn)物。這些都是生產(chǎn)功能食品(如面包、蛋糕、餅干)的好原料[35]。

在谷物固態(tài)發(fā)酵試驗(yàn)中，選用10種基質(zhì)，分別是小麥、玉米、黃豆、藜麥、蕎麥、薏米、燕麥、大豆、大米和小米，樺褐孔菌孔菌在這10種基質(zhì)中均能進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，即這10種固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物均可作為“樺菌谷物食品原料”。谷物固態(tài)發(fā)酵滿瓶時(shí)間依次為8、8、8、15、10、7、5、10、7和8周；菌絲體總體生長(zhǎng)趨勢(shì)基本保持一致，均是前幾周菌絲的生長(zhǎng)量及生長(zhǎng)速度一次降低，中間達(dá)到一個(gè)高峰值，后幾周又依次降低；同一種谷物基質(zhì)中每周菌絲體生長(zhǎng)速度存在顯著的差異。在藜麥基質(zhì)中發(fā)酵最慢，發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng)達(dá)15周，且菌絲長(zhǎng)勢(shì)不好。在接種后的前八周時(shí)間里，菌絲生長(zhǎng)量占到總量(滿瓶菌絲長(zhǎng)度)的72.6 %；蕎麥、大豆基質(zhì)次之，滿瓶時(shí)間均為10周，但其菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，在接種后的前八周時(shí)間里，菌絲生長(zhǎng)量占總量的91 %～94 %；在小麥、玉米、黃豆和小米基質(zhì)中，發(fā)酵滿瓶時(shí)間為8周，小麥中后3周菌絲生長(zhǎng)量保持在10 mm左右，玉米中最后一周的生長(zhǎng)量為5.75 mm，而黃豆培養(yǎng)基中后兩周的生長(zhǎng)量只有5.3、1.3 mm，前6周占到總量的93.1 %，小米中前5周的菌絲生長(zhǎng)量占到總生長(zhǎng)量的87.88 %；在薏米和大米基質(zhì)中，發(fā)酵滿瓶時(shí)間為7周，薏米前5周菌絲生長(zhǎng)量占到總生長(zhǎng)量的95.1 %，大米前6周占到了98.9 %；在燕麥基質(zhì)中5周完成發(fā)酵，前4周菌絲生長(zhǎng)量占到總生長(zhǎng)量的96.8 %。

在制備“樺菌谷物食品原料”時(shí)，能充分利用樺褐孔菌在各谷物發(fā)酵中不同生長(zhǎng)階段的特點(diǎn)，選擇好固態(tài)發(fā)酵所需谷物的裝量和各谷物需要的發(fā)酵時(shí)間，以達(dá)到減少生產(chǎn)投入、降低生產(chǎn)成本的目的。以本次試驗(yàn)為例，樺褐孔菌的藜麥發(fā)酵可以在裝料時(shí)選擇谷物量為原重量(濕重150 g)的72.6 %，即108.9 g，當(dāng)發(fā)酵至8周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；樺褐孔菌的小米發(fā)酵可以在裝料時(shí)選擇谷物量為原質(zhì)量的87.88 %，即131.8 g，當(dāng)發(fā)酵至5周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；樺褐孔菌在蕎麥、大豆發(fā)酵時(shí)可選擇谷物裝量為136～141 g，當(dāng)發(fā)酵至8周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；玉米發(fā)酵可選擇裝量150 g，當(dāng)發(fā)酵至8周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；黃豆發(fā)酵可裝量140 g，當(dāng)發(fā)酵至6周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；薏米發(fā)酵可裝量143 g，當(dāng)發(fā)酵至5周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；大米發(fā)酵可裝量148 g，當(dāng)發(fā)酵至6周時(shí)結(jié)束發(fā)酵；燕麥發(fā)酵可裝量145 g，當(dāng)發(fā)酵至4周時(shí)結(jié)束發(fā)酵。

4 結(jié) 論

山西呂梁山南段的樺褐孔菌，作為目前發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)在最南地區(qū)的種類，與我國(guó)東北地區(qū)樺褐孔菌相比，其多糖含量極高、鉀元素含量極高，具有很高的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。本文首次對(duì)山西樺褐孔菌的相關(guān)研究進(jìn)行了報(bào)道?，F(xiàn)階段我們對(duì)山西樺褐孔菌只進(jìn)行了形態(tài)特征、分子生物學(xué)鑒定、環(huán)境條件分析、品質(zhì)鑒定和固態(tài)發(fā)酵初步研究等，下一步還將對(duì)山西產(chǎn)樺褐孔菌進(jìn)行更廣泛深入的研究。