李學(xué)芳, 邱斌
(云南中醫(yī)藥大學(xué),云南昆明 650500)
短片藁本為傘形科(Umbelliferae)蒿本屬(Ligusticum)植物短片蒿本(Ligusticum brachylobum Franch.)的根[1],又名前胡,也稱旱前胡、川防風(fēng)、水前胡,為治療感冒風(fēng)寒發(fā)汗要藥[2-3]。其根味甘、辛,性溫,有發(fā)表、鎮(zhèn)痛、袪風(fēng)滲濕的功能,用于外感、頭痛昏眩、關(guān)節(jié)疼痛、四肢拘攣、目赤瘡瘍及破傷風(fēng)等病證[4]。文獻(xiàn)報(bào)道,在云南、四川及廣西等省有將短片藁本作《中華人民共和國(guó)藥典》所收載的前胡藥材藥用[5]。其根含有香豆素類化合物[6]及揮發(fā)油[7]。為了能更好地開(kāi)發(fā)利用短片藁本,我們對(duì)其進(jìn)行了初步系統(tǒng)的生藥學(xué)研究,為其鑒定及深入研究提供一定的理論依據(jù),現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。
1.1 藥材本品采自云南昆明、麗江、大理、香格里拉,經(jīng)中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所陶德定副研究員鑒定為傘形科蒿本屬植物短片蒿本(Ligusticum brachylobum Franch.)的根。
1.2 試劑無(wú)水乙醇[分析純,利安隆博華(天津)醫(yī)藥化學(xué)有限公司];TO 型生物制片透明劑(廣西岑溪市松香廠);番紅(上海三愛(ài)思試劑有限公司);固綠(上?;瘜W(xué)試劑站);中性樹膠(無(wú)錫市江原實(shí)業(yè)技貿(mào)公司);石蠟(56~58 ℃,上海永華石蠟有限公司);乙酸乙酯(分析純,上海申博化工有限公司);甲酸(分析純,上海申博化工有限公司);石油醚(分析純,60~90 ℃,廣東光華化學(xué)廠有限公司);甲醇(分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。
1.3 儀器TS-12H+生物組織自動(dòng)脫水機(jī)、BM-Ⅵ生物組織冷凍包埋機(jī)、QP-Ⅲ生物組織切片機(jī)、CS-Ⅳ型生物組織攤片烤片機(jī)、MD-Ⅱ型生物組織刀刃磨機(jī)(湖北孝感儀器公司);FA2004N 電子分析天平(上海分析儀器公司);GZX-9030 MBE 數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱、101A-2E 電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海通用儀器公司);Micr E400 Nikon 顯微鏡、數(shù)碼顯微照相機(jī)(日本尼康公司)。
1. 4 方法按傳統(tǒng)植物分類方法和藥材鑒別方法,制作短片藁本的根橫切面永久制片及粉末臨時(shí)裝片等方法進(jìn)行觀察比較、描述分析。并按常規(guī)方法進(jìn)行化學(xué)成分鑒別預(yù)試驗(yàn)及薄層色譜試驗(yàn)。
2.1 性狀鑒別圖1 結(jié)果顯示:本品呈圓錐形或紡錘形,長(zhǎng)9~25 cm,直徑1~2.5 cm,有分枝。殘留根莖粗大,直徑1~3 cm,密被粗、硬纖維狀葉鞘殘基。表面淺灰褐色或灰黃色,上部有密集的細(xì)環(huán)紋,下部有皺縱溝及橫向皮孔。質(zhì)硬,不易折斷,斷面不整齊,淡黃色,皮部與木質(zhì)易分離,皮部具有少數(shù)黃棕色油點(diǎn),木部具有放射狀紋理。氣芳香而濁,味微辛。
圖1 短片藁本外觀Figure 1 The appearance feature of Ligusticum brachylobum Franch
2.2 顯微鑒別
2. 2. 1 根橫切面 圖2 結(jié)果顯示:木栓層細(xì)胞10 余列。皮層狹窄,散有橢圓形油管。韌皮部寬廣,有裂隙;韌皮射線明顯,向外漸彎曲;油管較多,由外向內(nèi)逐漸變小。形成層成環(huán)。木質(zhì)部較發(fā)達(dá),近形層處木纖維斷續(xù)排列成環(huán),導(dǎo)管單個(gè)或數(shù)個(gè)成群,分布較密集,略呈放射狀排列。本品薄壁細(xì)胞中含淀粉粒。
圖2 短片藁本(根)橫切面圖Figure 2 The cross section manifestation of Ligusticum brachylobum Franch.(root)
2.2.2 粉末特征 圖3 結(jié)果顯示:粉末呈黃棕色或棕色。木栓細(xì)胞表面觀類方形或類長(zhǎng)方形,壁薄。淀粉粒類圓形,直徑3~10 μm,臍點(diǎn)呈點(diǎn)狀或裂縫狀,層紋不明顯;復(fù)粒由2~4 個(gè)分粒組成。油管碎片呈管狀,內(nèi)含黃棕色條狀分泌物。主導(dǎo)管為網(wǎng)紋及具緣紋孔導(dǎo)管,直徑20~65 μm。木纖維細(xì)長(zhǎng),兩端漸尖,壁較厚,紋孔較少。
2. 3 理化預(yù)試驗(yàn)參照天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[8]中預(yù)試液的制備及相應(yīng)方法進(jìn)行理化預(yù)試驗(yàn)。結(jié)果表明,短片藁本主要含蛋白質(zhì)、皂苷、苷類、黃酮類、內(nèi)酯、酚性成分、甾醇、萜類、揮發(fā)油、油脂、香豆素及其苷類等成分。
2.4 薄層鑒別
2.4.1 供試液的制備 取4 個(gè)不同產(chǎn)地樣品粉末各10 g,加甲醇100 mL 超聲30 min。濾過(guò),收集濾液,取濾液60 mL,加入60 mL 的石油醚萃取,放出甲醇層,以作供試液。
2. 4. 2 展開(kāi)劑的篩選 提取物分別以石油醚∶乙酸乙酯(7∶3)、石油醚∶乙酸乙酯(7∶4)、石油醚∶乙酸乙酯(7∶5)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶8)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶10)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶12)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶16),乙酸乙酯∶石油醚(3∶17)等為展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)。結(jié)果以石油醚—乙酸乙酯(16∶3)展開(kāi)的重現(xiàn)性較好。
圖3 短片藁本(根)粉末特征圖Figure 3 The power features of Ligusticum brachylobum Franch.(root)
2. 4. 3 試驗(yàn)結(jié)果 按照《中華人民共和國(guó)藥典四部》(2015 年版)[9]薄層色譜的基本要求,吸取上述4 個(gè)不同產(chǎn)地藥材溶液各10 μL,分別于同一硅膠G 薄層板上點(diǎn)4 個(gè)點(diǎn),以乙酸乙酯—石油醚(3∶16)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(254 nm)下檢視。圖4結(jié)果顯示:昆明、麗江、大理、香格里拉等4個(gè)不同產(chǎn)地的藥材供試液在同一硅膠G 板相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn),分離效果較好。
短片藁本始載于《滇南本草》,為感冒發(fā)熱用藥。該藥資源豐富,療效明確,具有較好的研究開(kāi)發(fā)價(jià)值。
通過(guò)對(duì)短片藁本藥材性狀、顯微特征的研究,結(jié)果顯示,其藥材性狀及顯微鑒別特征明顯,具有較好的鑒定意義,可為其與同屬其他植物的鑒定提供了理論依據(jù)。
薄層色譜試驗(yàn)結(jié)果圖片清晰,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,分離度、重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均較好,為該藥的鑒定、藥材標(biāo)準(zhǔn)制定提供研究基礎(chǔ)。
圖4 4個(gè)不同產(chǎn)地短片藁本的薄層色譜圖Figure 4 The thin-layer chromatogram for Ligusticum brachylobum Franch 4 different habitats
從化學(xué)大類成分預(yù)試結(jié)果可知,其所含化學(xué)大類成分較多,可對(duì)其進(jìn)一步深入研究和開(kāi)發(fā)。