曾李 倪冬姣 熊愛軍 張增玉 邢深 吳日紅 邢孔萍 郭麗 盧秋詠

摘? 要：本試驗旨在研究發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞的產(chǎn)蛋性能、雞蛋品質(zhì)、血清生化指標以及腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響。試驗選取1 200羽150日齡的海蘭褐蛋雞，并隨機分入2個組，每個組設(shè)2個重復，每個重復飼養(yǎng)300羽蛋雞。對照組蛋雞飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組蛋雞飼喂由基礎(chǔ)日糧和添加4%發(fā)酵茶籽粕后組成的日糧，試驗期30 d。結(jié)果表明，與對照組蛋雞相比，試驗組蛋雞：（1）產(chǎn)蛋率提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著降低（P<0.05）;（2）所產(chǎn)雞蛋的品質(zhì)提高，蛋殼厚度和蛋殼強度分別提高了10.53%（P<0.05）和11.96% （P<0.05），蛋黃高度、蛋黃顏色和哈氏單位均有不同程度的提高（P>0.05）;（3）血清中尿酸含量顯著降低? ? ? ? ?（P<0.05），總蛋白、白蛋白、葡萄糖和甘油三酯的含量有所下降（P>0.05）;（4）回腸和盲腸中的乳酸菌含量顯著提高（P<0.05），大腸桿菌和沙門氏菌的含量顯著下降（P<0.05）。綜上所述，在飼料中添加4%發(fā)酵茶籽粕，能顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能和雞蛋品質(zhì)，調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的結(jié)構(gòu)，有利于蛋雞腸道健康。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵茶籽粕;海蘭褐蛋雞;產(chǎn)蛋性能;雞蛋品質(zhì);血清生化指標;腸道菌群

中圖分類號：S816 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2020）03-0067-06

我國是油料生產(chǎn)和消耗大國，除大豆外，每年榨取各類油脂后，能剩下1 500萬t以上的各種餅粕。由于受多種因素的制約，餅粕在飼料中應用不足30%[1]，大量餅粕只能簡單用作肥料或者廢棄，不但浪費資源，而且嚴重污染環(huán)境。在當前集約化規(guī)模養(yǎng)殖生產(chǎn)與生態(tài)環(huán)境保護相矛盾的情況下，有效合理地利用餅粕成為研究熱點。茶籽粕是茶籽提取茶油后剩下的殘渣，據(jù)統(tǒng)計我國每年有近百萬噸茶籽粕未被有效利用。由于加工工藝的不同，茶籽粕含有濃度高低不等的茶皂素以及單寧等抗營養(yǎng)因子，同時還含有較高水平的植物多糖、多酚和類黃酮等功能性營養(yǎng)成分[2-4]。微生物發(fā)酵可以降解茶籽粕中的抗營養(yǎng)因子，提高發(fā)酵料中有機酸和小肽的含量，降低茶籽粕中粗纖維的含量。發(fā)酵茶籽粕的生產(chǎn)工藝要求低，生產(chǎn)成本不高。本研究主要是選取海蘭褐蛋雞，在蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵茶籽粕，探討其對海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能、雞蛋品質(zhì)、血清生化指標以及腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響情況，為發(fā)酵茶籽粕在蛋雞生產(chǎn)中的科學應用提供依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 發(fā)酵菌種

枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌均由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部生物飼料重點實驗室提供。

1.1.2 發(fā)酵茶籽粕

混合發(fā)酵菌種為乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢桿菌，按5∶4∶1的比例混合。茶籽粕、玉米和豆粕按8∶1∶1的比例混合，隨后均勻粉碎作為發(fā)酵底物。初始發(fā)酵條件為：pH=6～7，溫度為30 ℃～32 ℃，發(fā)酵水分28%～30%，固態(tài)密閉發(fā)酵7 d后，儲存?zhèn)溆?。發(fā)酵茶籽粕的營養(yǎng)成分指標見表1。

1.1.3 試驗日糧

基礎(chǔ)日糧由播恩生物技術(shù)股份有限公司提供。日糧組成及營養(yǎng)水平參照NRC和海蘭褐育種公司蛋雞營養(yǎng)標準配制，見表2。

1.1.4 試驗動物

150日齡健康的海蘭褐蛋雞1 200羽。

1.2 試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理

1 200羽150日齡的健康海蘭褐蛋雞隨機分成2組，每組2個重復，每個重復300羽蛋雞。1組為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧;? 2組為試驗組，所用飼料由基礎(chǔ)日糧添加4%發(fā)酵茶籽粕混合而成。試驗蛋雞采用4層階梯式籠養(yǎng);每天以人工光照和自然光照相結(jié)合的方式進行光明，時間為16 h;通風采用機械通風+自然通風;自由采食，自由飲水;按正常免疫程序接種疫苗，定期消毒。試驗期為30 d，每日6：30、11：30和17：30喂料，每日11：00和17：00收集蛋，并進行計數(shù)、標記和存放，同時計算每日的產(chǎn)蛋率和破蛋率。

1.3 檢測指標和方法

1.3.1 產(chǎn)蛋性能指標的測定

試驗期間以重復為單位，每天記錄蛋雞的采食量、破蛋數(shù)、產(chǎn)蛋數(shù)和產(chǎn)蛋重量，每周統(tǒng)計1次每日平均采食量、產(chǎn)蛋率、破蛋率和料蛋比。

1.3.2 雞蛋品質(zhì)測定

試驗結(jié)束當天，以重復為單位，每個重復隨機抽取10枚雞蛋，測定雞蛋品質(zhì)。測定指標包括蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃高度、蛋黃顏色與哈氏單位。

1.3.3 血清生化指標測定

在試驗結(jié)束當天，從每個重復中隨機選取10羽蛋雞，翅靜脈采血，血液分別置于抗凝管中，靜置待有血清析出然后3 000 r/min離心10 min，取上層清液，置于-20 ℃冰箱待測，采用全自動生化分析儀測定，試劑盒由廣州京誠檢測集團提供。測定總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯和尿酸的含量。

1.3.4 腸道菌群測定

試驗結(jié)束當天，從每重復中抽取5羽雞屠宰，分別取回腸和盲腸內(nèi)容物各2 g，放入已滅菌的塑料袋中，采用平板培養(yǎng)計數(shù)法進行細菌計數(shù)，測定乳酸菌、大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量，以每克腸道內(nèi)容物中細菌總數(shù)的對數(shù)表示。

1.4 數(shù)據(jù)分析方法

試驗數(shù)據(jù)用生物統(tǒng)計軟件SAS 9.1進行單因素方差分析，試驗的結(jié)果以“平均值±標準差”來表示。

2? 結(jié)果和分析

2.1 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

由表3可知，與對照組蛋雞相比，試驗組日糧添加發(fā)酵茶籽粕后，蛋雞的日采食量提高了3.64%（P<0.05），產(chǎn)蛋率顯著提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著下降 （P<0.05）;料蛋比差異不顯著（P>0.05）。

2.2 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞雞蛋品質(zhì)的影響

由表4可知，與對照組蛋雞所產(chǎn)蛋相比，試驗組蛋雞所產(chǎn)蛋的蛋殼厚度和蛋殼強度分別提高了10.53%（P<0.05）和11.96%（P<0.05）;蛋黃高度、蛋黃顏色和哈氏單位均有不同程度的提高，但差異不顯著（P>0.05）。

2.3 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞血清生化指標的影響

由表5可知，與對照組蛋雞相比，試驗組蛋雞血清中總蛋白、白蛋白、葡糖糖和甘油三酯的水平偏低，但差異不顯著（P>0.05）;谷丙轉(zhuǎn)氨酶（降低3.93%，P<0.05）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（降低8.41%，P<0.05）和尿酸（P<0.05）的含量顯著降低。

2.4 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響

從表6可知，與對照組蛋雞的腸道菌群結(jié)構(gòu)相比，日糧中添加發(fā)酵茶籽粕后，試驗組蛋雞回腸中乳酸菌含量顯著增加? ? ? ?（P<0.05）、大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量顯著減少（P<0.05）;盲腸中乳酸菌的數(shù)量有所增加（P>0.05），大腸桿菌的數(shù)量顯著減少（P<0.05），沙門氏菌的數(shù)量有所減少（P>0.05）。

3 討論

3.1 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

發(fā)酵茶籽粕是經(jīng)過脫殼、脫皂和微生物發(fā)酵等一系列技術(shù)手段處理后產(chǎn)生的一種優(yōu)質(zhì)飼料原料。有研究表明，茶籽粕中的提取物可作為一種天然綠色的飼料添加劑來代替抗生素，減少飼料中的抗生素使用量[5]。但是，未經(jīng)發(fā)酵處理的茶籽粕含有較高水平的抗營養(yǎng)物質(zhì)，會嚴重影響飼料的適口性和動物腸道的消化吸收能力。本研究的試驗結(jié)果顯示：在基礎(chǔ)日糧中添加4%的發(fā)酵茶籽粕，海蘭褐蛋雞的平均日采食量提高3.64%（P<0.05），平均產(chǎn)蛋率提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著降低（P<0.05）。其原因可能是由于茶籽粕經(jīng)微生物發(fā)酵后，所含的大量纖維素被轉(zhuǎn)化為可消化的單糖和低聚糖，改善了適口性;同時產(chǎn)生了高含量的有機酸、小肽和酶，并含有大量的活性益生菌。這些發(fā)酵代謝產(chǎn)物提高了蛋雞對飼料中能量、蛋白質(zhì)、鈣和磷等養(yǎng)分的消化、吸收和利用。此外，發(fā)酵茶籽粕還含有微量的茶皂素、單寧和茶多酚等功能活性成分。單寧能夠降低蛋雞腸道的蠕動，提高飼料消化率[6]，茶皂素能夠增加蛋雞腸道黏膜的通透性，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高飼料利用效率[4]。茶多酚的殺菌和抗氧化等功能可促進動物腸道吸收和利用日糧中的鈣、磷以及微量元素，增加蛋殼中鈣的含量，提高蛋重及產(chǎn)蛋率，增強蛋殼硬度，降低破蛋率[7]。本試驗的結(jié)果也同樣顯示：發(fā)酵茶籽粕在提高產(chǎn)蛋率的同時，顯著降低了海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋的破蛋率。

3.2 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞雞蛋品質(zhì)的影響

蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃顏色以及哈氏單位都是評價雞蛋品質(zhì)的重要指標[8]。蛋殼厚度及強度主要表現(xiàn)在蛋殼致密堅固性上，其會受到飼料的營養(yǎng)物質(zhì)含量、養(yǎng)殖環(huán)境以及蛋雞健康狀況等不同條件的影響。崔闖飛等[9]的研究表明，在蛋雞飼料中添加枯草芽孢桿菌，雞蛋的蛋殼厚度和強度得到了明顯的提高。而本試驗也獲得了相似的結(jié)果，日糧中添加用枯草芽孢桿菌發(fā)酵的茶籽粕后，蛋雞所產(chǎn)蛋的蛋殼厚度比對照組的提高了10.53%，蛋殼強度提高了11.96%。哈氏單位與雞蛋新鮮程度呈正相關(guān)，并且哈氏單位可以體現(xiàn)雞蛋的蛋白質(zhì)含量，其值越高表明蛋白黏稠度越高，雞蛋也就越新鮮[10]。另外，益生菌能促進蛋雞對多種營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，而本試驗所用的枯草芽孢桿菌、酵母菌以及乳酸菌在發(fā)酵茶籽粕中以活菌形式存在，促進了海蘭褐蛋雞對維生素A和胡蘿卜素等的吸收，加速了有效色素的沉淀，從而提升了蛋黃的顏色質(zhì)量。本試驗的結(jié)果跟前人的研究結(jié)果類似，說明發(fā)酵茶籽粕經(jīng)過復合益生菌發(fā)酵后含有高水平的活菌，可實現(xiàn)跟益生菌類似的功能，改善海蘭褐蛋雞的雞蛋品質(zhì)。

3.3 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞血清生化指標的影響

在本試驗中，日糧中添加發(fā)酵茶籽粕后，蛋雞血清中總蛋白、白蛋白和免疫相關(guān)的酶低于對照組蛋雞的，但是差異不顯著，說明降低程度是在適當可控的范圍內(nèi)變化。血液中總蛋白、白蛋白和酶類含量的高低表明了機體代謝情況以及免疫情況[11]，這些指標在一定的范圍內(nèi)變化，說明試驗所用的蛋雞處于相當健康的水平。研究表明，尿酸作為蛋禽類氨基酸的最終代謝產(chǎn)物，其在血清中的濃度反映了機體對蛋白質(zhì)分解的程度以及效率，本試驗在日糧中添加發(fā)酵茶籽粕降低了雞血清中的尿酸含量。有研究表明，血清中尿酸的減少意味著蛋白質(zhì)在機體其他部位的沉積增多[12]。在本試驗中，實驗組蛋雞的產(chǎn)蛋率、料蛋比以及雞蛋品質(zhì)等結(jié)果也證實了發(fā)酵茶籽粕可以降低蛋雞血清中尿酸的含量，從而間接提高了試驗組蛋雞的產(chǎn)蛋率及雞蛋品質(zhì)。

3.4 發(fā)酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響

蛋雞腸道內(nèi)存在大量有益菌和有害菌，它們一方面參與腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收以及機體對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和代謝等，另一方面與腸道的相互作用達成共生關(guān)系后一起維持腸道內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)平衡。所以，蛋雞腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化會影響蛋雞的腸道健康，并影響機體的健康。馮華等[13]在日糧中添加乳酸菌后，蛋雞腸道中的大腸桿菌被抑制，同時數(shù)量顯著降低。馬春陽等[14]在蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌后，發(fā)現(xiàn)蛋雞盲腸乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著增加，大腸桿菌數(shù)量顯著減少。本試驗的結(jié)果也證實在海蘭褐蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵茶籽粕后，蛋雞腸道中乳酸菌的生長加快，沙門氏菌和大腸桿菌等有害微生物被抑制。另外，發(fā)酵茶籽粕所含的微量茶皂素、茶多酚和茶籽多糖等活性成分也可能會對病原菌產(chǎn)生一定的影響，從而改善腸道菌群的結(jié)構(gòu)，促進海蘭褐蛋雞對營養(yǎng)物質(zhì)更好地吸收，影響其生產(chǎn)性能和雞蛋品質(zhì)。

4? 結(jié)論

飼料中添加4%的發(fā)酵茶籽粕能提高海蘭褐蛋雞的產(chǎn)蛋性能和雞蛋品質(zhì)，改善蛋雞腸道菌群結(jié)構(gòu)，提高蛋雞的健康水平。

參考文獻：（14篇;略）

基金項目：贛州市科技計劃項目重點研發(fā)計劃——茶粕微生物發(fā)酵飼料的研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化;廣東省重點領(lǐng)域研發(fā)計劃資助（2019B020218001）