李建華 韓 玲

膽管癌是現(xiàn)階段臨床中較為常見的源于膽管上皮的惡性腫瘤，屬于高侵襲性消化道腫瘤[1]。目前有臨床流行病學(xué)研究結(jié)果顯示，膽管癌的臨床發(fā)病率及病死率呈明顯的逐年增高趨勢[2]。由于膽管癌臨床癥狀相對(duì)較為隱匿且多無明顯臨床癥狀，因而臨床早期診斷及確診有一定困難?，F(xiàn)階段臨床中在對(duì)膽管癌進(jìn)行診斷評(píng)估時(shí)多采用影像學(xué)檢查，但單純影像學(xué)診斷無法有效對(duì)病變區(qū)進(jìn)行定性分析[3-4]。目前臨床中所應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物較多，但在對(duì)膽管癌術(shù)前診斷時(shí)其特異度及靈敏度較差，因而如何有效尋找到合理且高效的用于診斷膽管癌的相關(guān)蛋白和生化指標(biāo)具有十分重要意義[5]。肝細(xì)胞生長因子(HGF，hepatocyte growth factor)、糖鏈抗原199(CA199，carbohydrate antigen 199)和胃癌抗原(CA724，gastric cancer antigen 724)是現(xiàn)階段臨床中應(yīng)用較廣的評(píng)估腫瘤的指標(biāo)，但聯(lián)合診斷在評(píng)估膽管癌中的應(yīng)用仍鮮有報(bào)道，本研究對(duì)膽管癌患者血清HGF、CA199、CA724進(jìn)行聯(lián)合檢測，分析其在膽管癌診斷及復(fù)發(fā)預(yù)測中應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 膽管癌患者選擇標(biāo)準(zhǔn)

入組標(biāo)準(zhǔn)：①患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為膽管癌；②術(shù)前或術(shù)中未接受其他抗腫瘤方案進(jìn)行治療；③患者未合并其他類型腫瘤；④患者臨床資料完整，且對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：若患者符合如下任一標(biāo)準(zhǔn)則將其排除出本研究，①術(shù)前經(jīng)外科或姑息治療方案進(jìn)行治療；②精神異常并無法有效配合本研究；③臨床或隨訪資料缺失；④經(jīng)手術(shù)治療但缺少病理學(xué)檢查；⑤主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究。

1.2 一般資料

經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選取2016年1月至2018年1月間我院收治的100例膽管癌患者為膽管癌組，其中男性61例、女性39例，年齡30～66歲，平均(44.83±7.12)歲，腫瘤位于肝門處38例、膽總管遠(yuǎn)端51例、膽總管中段11例。同期選取我院收治的100例良性膽管疾病患者為對(duì)照組，其中男性58例、女性42例，年齡29～66歲，平均(44.29±7.09)歲，其中膽囊息肉43例、膽囊結(jié)石57例。2組患者年齡、性別等資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，分組合理。

1.3 方法

所有受試者入組后采集空腹靜脈血，離心收集血清，然后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者血清中HGF水平，所用試劑盒均購買自浙江杭州聯(lián)科生物科技有限公司，并嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進(jìn)行操作。采用化學(xué)發(fā)光法對(duì)受試者血清中CA199進(jìn)行檢測，所用試劑盒購買自鄭州安圖綠科生物工程有限公司，且遵照試劑盒說明書嚴(yán)格操作。采用放射免疫法檢測血清中CA724水平，所用試劑盒購買自南京晶美生物科技有限有限公司，并遵照試劑盒說明書進(jìn)行操作。并對(duì)患者隨訪1年，記錄膽管癌患者是否出現(xiàn)復(fù)發(fā)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，使用百分率表示計(jì)數(shù)資料且行卡方檢驗(yàn)，以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示計(jì)量資料后行t檢驗(yàn)。以分組結(jié)果及預(yù)后結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析各指標(biāo)及聯(lián)合診斷和預(yù)測患者是否復(fù)發(fā)的價(jià)值，且以Logistic回歸模型分析聯(lián)合診斷價(jià)值，若P<0.05則差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者預(yù)后質(zhì)量調(diào)查結(jié)果

對(duì)患者隨訪1年，其中復(fù)發(fā)21例，未復(fù)發(fā)79例。

2.2 各組患者HGF、CA199、CA724水平比較

對(duì)照組患者血清中HGF、CA199、CA724水平明顯低于膽管癌組(P<0.05)；膽管癌復(fù)發(fā)患者血清中HGF、CA199、CA724水平顯著高于未復(fù)發(fā)患者(P<0.05)，見表1。

表1 患者HGF、CA199、CA724水平檢測結(jié)果

2.3 各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合診斷膽管癌的結(jié)果比較

本組研究對(duì)象共200例，HGF診斷膽管癌陽性共92例，CA199診斷膽管癌陽性共95例，CA724診斷膽管癌陽性共99例，聯(lián)合診斷診斷膽管癌陽性共101例，見表2。

2.4 各指標(biāo)診斷膽管癌的價(jià)值

本組研究結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測血中HGF、CA199、CA724水平對(duì)診斷膽管癌的靈敏度、特異度及AUC均顯著高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(P<0.05)，見表3及圖1。

2.5 各指標(biāo)預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)的結(jié)果比較

結(jié)果顯示，HGF預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)共34例，CA199預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)共25例，CA724預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)共31例，聯(lián)合診斷預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)共22例，見表4。

2.6 各指標(biāo)預(yù)估膽管癌復(fù)發(fā)的效能

本組研究結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測血中HGF、CA199、CA724水平對(duì)預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)的靈敏度、特異度及AUC均顯著高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(P<0.05)，見表5及圖2。

表2 各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合診斷膽管癌結(jié)果/例

表3 各指標(biāo)診斷膽管癌的價(jià)值/%

注：AUC：ROC曲線下面積。

圖1 各指標(biāo)診斷膽管癌的ROC曲線圖

表4 各指標(biāo)預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)結(jié)果/例

表5 各指標(biāo)預(yù)估膽管癌復(fù)發(fā)的價(jià)值/%

圖2 各指標(biāo)預(yù)測膽管癌復(fù)發(fā)的ROC曲線圖

3 討論

一般情況下，腫瘤的發(fā)生及發(fā)展具有多樣性和異質(zhì)性，因而單一指標(biāo)對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷評(píng)估具有一定的局限性[6]。目前臨床中亟需尋找到特異度及靈敏度均較為理想的腫瘤標(biāo)志物。國外研究結(jié)果顯示，在對(duì)膽管癌患者進(jìn)行早期診斷及預(yù)后評(píng)估時(shí)采用多指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用具有較高的應(yīng)用價(jià)值，并有利于及時(shí)檢出患者可能存在的隱匿性病灶[7]。有研究發(fā)現(xiàn)，膽管癌其起病相對(duì)較為隱匿并缺乏臨床特異性表現(xiàn)，因而很難對(duì)患者進(jìn)行早期診斷，且膽管癌與多種膽管良性病變影像學(xué)特征存在多種相似性，因而臨床中單獨(dú)通過影像學(xué)檢測難以及時(shí)對(duì)膽管病變進(jìn)行分析，因此臨床診斷及治療有一定困難[8-9]。有學(xué)者從分子學(xué)角度對(duì)膽管癌進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，在膽管癌的發(fā)生及發(fā)展過程中原癌基因激活及抑癌基因、凋亡基因的失活在其中起到十分重要的作用[10]。有研究指出，腫瘤標(biāo)志物多由腫瘤細(xì)胞合成并釋放，并可對(duì)腫瘤細(xì)胞的繁殖產(chǎn)生一定的刺激作用，與此同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞及組織影響則較小[11]。

有學(xué)者指出，腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有高靈敏度、特異度的優(yōu)點(diǎn)。本組研究結(jié)果顯示，膽管癌患者血中HGF、CA199及CA724水平明顯高于其他膽管良性病變，且隨訪1年結(jié)果顯示，膽管癌復(fù)發(fā)患者血中HGF、CA199及CA724水平顯著高于未復(fù)發(fā)患者，因而筆者對(duì)三指標(biāo)聯(lián)合檢測對(duì)診斷膽管癌及預(yù)測患者復(fù)發(fā)情況進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，三指標(biāo)聯(lián)合檢測可顯著提高各指標(biāo)診斷膽管癌及預(yù)測患者預(yù)后的準(zhǔn)確性，且ROC曲線下面積均大于0.9，診斷和預(yù)測復(fù)發(fā)與否的敏感度及特異度均大于85%，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

CA199及CA724是臨床中常見的腫瘤標(biāo)志物，其在腫瘤的鑒別、療效觀察、預(yù)后判斷及腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過程中具有十分重要意義。有研究指出，CA199及CA724是人體內(nèi)重要的消化道腫瘤抗原，在胃癌、胰腺癌、大腸癌、膽管癌及肝癌患者血清中均可見CA199及CA724水平異常升高，但其特異性較低，因而臨床中可與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測以提高臨床檢測特異性[12]。HGF是人體內(nèi)重要的功能性細(xì)胞因子，有研究指出HGF在細(xì)胞的有絲分裂過程中起到十分重要的作用，與腫瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)密切相關(guān)[13]。本組研究中通過對(duì)HGF、CA199及CA724等指標(biāo)建立Logsitic回歸模型的聯(lián)合診斷可有效提高其診斷效能，分析認(rèn)為HGF、CA199及CA724在膽管癌發(fā)生及發(fā)展過程中起到不同的作用，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測相輔相成能夠有效反映患者病情變化，可提高診斷及評(píng)估患者預(yù)后的準(zhǔn)確率。

綜上所述，聯(lián)合檢測血清中HGF、CA199、CA724水平可顯著提高膽管癌的診斷及預(yù)測復(fù)發(fā)的準(zhǔn)確度，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。但本組研究中臨床樣本數(shù)較少，且未對(duì)患者進(jìn)行長期隨訪，研究結(jié)果有待后續(xù)深入分析探討。