吳華卓 ， 彭忠利 ， 高彥華 ， 陳仕勇 ， 曾 鈺

（1.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都 610041；2.青藏高原動(dòng)物遺傳資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610041；3.西南民族大學(xué)青藏高原研究院，四川成都 610041）

牦牛（Bosgrunniens）是青藏高原特有的家畜，主要分布在海拔3000 m以上的高寒缺氧地區(qū)，全世界大約95%的牦牛分布在中國(guó)，是當(dāng)?shù)厝罕娭饕纳钯Y料和生產(chǎn)資料（鐘金城等，2006），與當(dāng)?shù)厝罕姷纳钕⑾⑾嚓P(guān)，被譽(yù)為 “高原的珍寶”（Peng等，2018）。高原畜牧業(yè)的發(fā)展主要依賴于天然草地放牧，但由于青藏高原氣候惡劣，全年沒有明顯的四季之分，只有冷季（10～次年5月）和暖季（5～10月）之別，放牧牦牛只能通過在暖季采食牧草儲(chǔ)存的能量度過嚴(yán)寒的冷季，研究表明放牧牦牛在冷季損失的體重大約為暖季末重的10%～20%（Long 等，1999），陷入“夏肥、秋壯、冬瘦、春死亡”的惡性循環(huán)之中（薛白等，2005），嚴(yán)重阻礙高原畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。近年來研究發(fā)現(xiàn)，冷季補(bǔ)飼不僅能提高和改善動(dòng)物的生長(zhǎng)性能，緩解家畜冷季掉膘（金艷梅等，2017；徐田偉等，2016；張建勛，2013），提高動(dòng)物越冬的能力，降低死亡（王萬邦等，1997），而且能減輕草地壓力，促使高原畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)持續(xù)穩(wěn)定的發(fā)展（沈景林等，1996）。王萬邦等（1997）研究表明，在冬春季節(jié)對(duì)牦牛進(jìn)行補(bǔ)飼，可提高牦牛越冬的能力，減少死亡；王威等（2013）研究表明，冷季給懷孕牦牛補(bǔ)飼精料能提高犢牦牛的初生重，且補(bǔ)飼能量飼料的效果優(yōu)于蛋白飼料。研究表明，舍飼育肥可提高牦牛血清總蛋白、球蛋白和高密度脂蛋白含量（王斌星等，2016；陳光吉等，2015）。然而在偏遠(yuǎn)的牧區(qū)并不具備舍飼育肥的條件，而補(bǔ)飼精料是提高牦牛生長(zhǎng)性能的有效措施之一，但對(duì)于養(yǎng)分表觀消化率和血清生化指標(biāo)的報(bào)道較少。本試驗(yàn)以放牧牦牛為研究對(duì)象，旨在研究冷季補(bǔ)飼精料對(duì)牦牛生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率和血清生化指標(biāo)的影響，為放牧牦牛冷季保膘，高效養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)與時(shí)間 試驗(yàn)于2018年1月至3月在西南民族大學(xué)青藏高原基地牧草試驗(yàn)園區(qū)冬季草場(chǎng)進(jìn)行，該地區(qū)位于四川省阿壩州紅原縣邛溪鎮(zhèn)（北緯 31°50'～ 33°22'，東經(jīng) 101°51'～ 103°23'），平均海拔高度在3500 m以上，氣候類型為大陸性高原寒溫帶季風(fēng)氣候，年平均氣溫為1.1℃，平均降雨量750 mm左右，年均日照2518.7 h，無絕對(duì)無霜期。試驗(yàn)草場(chǎng)植被以垂穗披堿草（E-lymus Nutans Griseb）、發(fā)草（Deschampsia Caespitosa（Linn.）Beauv）和小嵩草（Kobresia Humilis）為主，5月開始返青。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，選取132頭健康麥洼牦牛 （按照年齡和體重相近的原則分為犢牦牛46頭，青年牦牛34頭，成年牦牛52頭），按照年齡和體重相近的原則隨機(jī)分為對(duì)照組和補(bǔ)飼組，每組66頭牦牛（各含1.5歲以下犢牦牛23頭，1.5～2.5歲青年牦牛17頭，2.5歲以上成年牦牛26頭），各組間性別組成相同且在試驗(yàn)期間母牦牛沒有懷孕現(xiàn)象。補(bǔ)飼組在歸牧后補(bǔ)飼精料1 kg，對(duì)照組只放牧。

1.3 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所使用的精料由西南民族大學(xué)牦牛健康養(yǎng)殖團(tuán)隊(duì)研發(fā)，由四川新通達(dá)生物飼料科技有限公司生產(chǎn)；精料的組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理 所有試驗(yàn)牦牛在兩個(gè)牧場(chǎng)進(jìn)行放牧 （牧草營(yíng)養(yǎng)成分無差異），每天08：00出牧，17：00歸牧，自由飲水。為了便于當(dāng)?shù)啬撩竦墓芾?，歸牧后犢牦牛在暖棚中過夜，其他牦牛在圍欄中過夜。

1.5 樣品的采集

1.5.1 牧草、飼料和糞便的采集 2018年1月15日，在冬季放牧草場(chǎng)隨機(jī)選擇10個(gè)0.5 m×0.5 m樣方，用不銹鋼剪刀齊地面刈割，稱重并記錄，風(fēng)干后再稱重。帶回實(shí)驗(yàn)室干燥后粉碎過0.45 mm篩，室溫下密封保存待測(cè)。

表1 試驗(yàn)精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

試驗(yàn)結(jié)束前3 d開始，各組隨機(jī)選取20頭牦牛，每天收集每頭牦牛新鮮糞便100 g，每份糞便加入10 mL 10%的硫酸（H2SO4）固氮，三天收集完成后，將同一頭牦牛的糞便混合，取150 g于-20℃冷凍保存。除糞樣外，每天同時(shí)采集補(bǔ)飼組精料1 kg，將3 d的樣品混合后，取1 kg低溫冷藏備用。

1.5.2 血清的采集 試驗(yàn)第60天放牧前，在牦牛稱重時(shí)，對(duì)每頭牦?？崭诡i靜脈采血10 mL，置于15 mL離心管中，然后4℃、3500 r/min離心15 min；將血清分裝于1.5 mL離心管中，立即置于-20℃保存。

1.6 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.6.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 試驗(yàn)開始第1天清晨對(duì)所有參試牦牛進(jìn)行空腹稱重，記錄初始重，試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天清晨進(jìn)行空腹稱重，記錄末重，并計(jì)算試驗(yàn)期間的增重和平均日增重。

1.6.2 血清指標(biāo) 血清中葡萄糖（GLU）、總蛋白（TP）、甘油三脂（TG）、膽固醇（CHO）、肌酸激酶（CK）、尿素氮（UN）含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶 （ALT）的活性采用全自動(dòng)生化分析儀（江西特康科技有限公司，TC6010L）測(cè)定。

1.6.3 養(yǎng)分表觀消化率 將采集的樣品帶回實(shí)驗(yàn)室，65℃烘干制成風(fēng)干樣本，粉碎后進(jìn)行常規(guī)分析，其中總能（GE）采用氧彈式熱量計(jì)測(cè)定；干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗灰分（Ash）、鈣（Ca）和總磷（TP）的測(cè)定參考張麗英（2007）《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》的方法，中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）的測(cè)定參照Van Soest等（1991）的方法，OM通過計(jì)算得出。采用鹽酸不溶灰分 （AIA）作為指示劑，測(cè)定方法參見 GB/T 23742-2009《飼料中鹽酸不溶灰分的測(cè)定》，某養(yǎng)分表觀消化率計(jì)算公式如下：

某養(yǎng)分表觀消化率/%=[1-（飼料中AIA含量/糞中AIA含量）×（糞中某養(yǎng)分含量/飼料中某養(yǎng)分含量）]×100。

1.7 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用 Excel 2016進(jìn)行初步整理，然后采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05為差異顯著，P＞0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 放牧牦牛的生長(zhǎng)性能 由表2可知，放牧牦牛補(bǔ)飼組與對(duì)照組初始重和末重均無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，補(bǔ)飼組牦牛的總增重和平均日增重顯著提高 （P＜0.05），掉膘降低41.42%。補(bǔ)飼組成年牦牛、犢牦牛的總增重和平均日增重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），成年牦牛掉膘降低55.14%，犢牦牛掉膘降低57.31%。

2.2 養(yǎng)分表觀消化率 由表3可知，補(bǔ)飼組牦牛CP、NDF、ADF的表觀消化率顯著高于對(duì)照組 （P＜0.05），分別提高了7.56%、9.86%、8.45%。 補(bǔ)飼組中犢牦牛、成年牦牛ADF的表觀消化率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），犢牦牛提高10.52%，成年牦牛提高10.69%。

2.3 放牧牦牛血清生化指標(biāo) 由表4可知，補(bǔ)飼組與對(duì)照組放牧牦牛血清中ALT、AST活性和TP、UN、GLU、TC、TG 及 CK 含量均未表現(xiàn)出差異（P ＞0.05）。在不同年齡段放牧牦牛補(bǔ)飼組和對(duì)照組血清生化指標(biāo)比較中，補(bǔ)飼組成年牦牛血清中TP含量顯著高于對(duì)照組 （P ＜0.05），提高了24.41%。

3 討論

3.1 補(bǔ)飼精料對(duì)牦牛生長(zhǎng)性能的影響 青藏高原地區(qū)的氣候特征決定了天然草地的生產(chǎn)力和牧草營(yíng)養(yǎng)輸出季節(jié)性的不平衡。在暖季，氣候適宜，牧草生長(zhǎng)旺盛，其產(chǎn)量和質(zhì)量相對(duì)充足，使得放牧牦牛呈現(xiàn)出“夏肥、秋壯”的生長(zhǎng)趨勢(shì)；而冷季漫長(zhǎng)寒冷，可利用牧草數(shù)量少、品質(zhì)低，同時(shí)低溫導(dǎo)致牦牛維持代謝增加，使放牧牦牛體重下降，呈現(xiàn)出“冬瘦、春死亡”的生長(zhǎng)趨勢(shì)。本試驗(yàn)條件下，對(duì)照組牦牛體重下降較大；補(bǔ)飼組牦牛體重下降相比對(duì)照組顯著降低，兩組牦牛體重都出現(xiàn)降低，冷季牧草品質(zhì)的降低可能是體重降低的主要原因，同時(shí)低溫使維持需要增加，從而牧草中獲取的營(yíng)養(yǎng)不能滿足維持需要，導(dǎo)致牦牛體重下降。與對(duì)照組相比，補(bǔ)飼精料緩解牦牛體重降低的效果明顯，這與其他研究者（徐田偉等，2016；王威等，2013；張建勛，2013；王萬邦等，1997；沈景林等，1996）的結(jié)果一致。補(bǔ)飼精料不僅可以直接為牦牛提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還能促進(jìn)牦牛對(duì)牧草的消化 （張建勛，2013），進(jìn)一步為其提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有利于放牧牦牛維持體重（王威等，2013）。本試驗(yàn)條件下，在冷季給放牧牦牛補(bǔ)飼精料1 kg/d可以改善其生長(zhǎng)性能，緩解牦牛的冷季掉膘或減重，且對(duì)犢牦牛的效果優(yōu)于青年牦牛。

表2 補(bǔ)飼對(duì)放牧牦牛生長(zhǎng)性能的影響

表3 補(bǔ)飼對(duì)放牧牦牛養(yǎng)分表觀消化率的影響%

表4 補(bǔ)飼對(duì)放牧牦牛血清生化指標(biāo)的影響

3.2 補(bǔ)飼精料對(duì)牦牛養(yǎng)分消化率的影響 動(dòng)物對(duì)飼糧的采食量，瘤胃內(nèi)停留時(shí)間、食糜流通速度與消化速度和瘤胃微生物活性等均可影響消化率。目前，有關(guān)冷季補(bǔ)飼精料對(duì)動(dòng)物養(yǎng)分表觀消化率影響的報(bào)道較少，但已有較多的關(guān)于舍飼育肥牦牛養(yǎng)分表觀消化率的報(bào)道。景小平等（2016）在冷季對(duì)藏羊進(jìn)行尿素-糖蜜型舔磚和精料補(bǔ)飼，結(jié)果表明補(bǔ)飼能顯著提高DM、OM、CP等的消化率。本課題組前期研究表明，舍飼育肥牦牛的CP、NDF和ADF表觀消化率分別為60%～65%、62%～68%和61% ～66%。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼組CP、NDF和ADF的表觀消化率均顯著高于對(duì)照組，且高于舍飼育肥牦牛，與景小平等（2016）研究結(jié)果一致。可能是因?yàn)槔浼狙a(bǔ)飼精料可為牦牛提供更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)牦牛對(duì)牧草的利用，從而提高其消化率（張建勛，2013）；另外，冷季牧草數(shù)量減少且品質(zhì)降低，使牦牛采食的牧草在放牧牦牛瘤胃中停留的時(shí)間延長(zhǎng)，微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化更徹底。

3.3 補(bǔ)飼精料對(duì)牦牛血清生化指標(biāo)的影響 動(dòng)物的血清生化指標(biāo)能不同程度地反映動(dòng)物機(jī)體健康和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝狀況。GLU是動(dòng)物機(jī)體能量的主要來源（許先查等，2011），血清GLU是機(jī)體能量平衡的主要指標(biāo)，可以間接的反映動(dòng)物對(duì)碳水化合物消化吸收的能力。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼組牦牛血清GLU含量高于對(duì)照組，但差異不顯著，可能是補(bǔ)飼精料促進(jìn)了動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高了機(jī)體代謝水平，緩解牦牛冷季掉膘。血清中TP和UN的濃度與蛋白質(zhì)代謝密切相關(guān)，可以反映動(dòng)物飼糧中的蛋白質(zhì)水平及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼組TP和UN含量均高于對(duì)照組，但差異不顯著，表明補(bǔ)飼精料能提高牦牛氮利用率。補(bǔ)飼精料能為放牧牦牛提供一定的粗蛋白質(zhì)，加強(qiáng)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)牦牛的生長(zhǎng)，與韓興泰等（1996）的研究結(jié)果一致。ALT和AST是反映蛋白質(zhì)代謝和肝臟功能的重要指標(biāo)。范小紅等（2017）研究表明，牦牛血清中ALT活性為29.33～43.00 U/L，AST活性為57.00～85.17 U/L。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼組和對(duì)照組血清ALT和AST差異不顯著，且在范小紅等（2017）研究范圍內(nèi)。血清中TG和TC是反映機(jī)體能量和脂肪代謝的重要指標(biāo)，也能直接反映機(jī)體對(duì)脂肪消化吸收的情況。本試驗(yàn)條件下，補(bǔ)飼組血清中TG和TC的含量均高于對(duì)照組，與楊俊等（2013）的研究結(jié)果一致?？赡苁茄a(bǔ)飼精料增加了牦牛的采食量進(jìn)而提高了脂肪絕對(duì)攝入量，使機(jī)體脂肪代謝水平增強(qiáng)，進(jìn)而增加血清中TG和TC的含量。肌酸激酶（CK）又稱肌酸磷酸激酶，其主要功能是催化三磷酸腺苷中的高能磷酸鍵轉(zhuǎn)移到磷酸分子上，生成磷酸肌酸而貯存能量，為肌肉收縮和運(yùn)輸系統(tǒng)提供能量（王春昕等，2016；張彩虹等，2008；周秀菊等，2002），通常情況下，血液中肌酸的含量較低，如果肌肉收縮強(qiáng)度提高，血液中肌酸的含量就會(huì)大幅度提高（朱永剛等，2017），本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼組與對(duì)照組血清中肌酸激酶的活性差異不顯著，說明補(bǔ)飼精料對(duì)生長(zhǎng)無顯著影響。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，冷季補(bǔ)飼精料可顯著提高放牧牦牛的生長(zhǎng)性能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，可緩解牦牛冷季掉膘或減重，且犢牦牛的效果優(yōu)于青年牦牛。